Способ хранения крови Советский патент 1984 года по МПК A61K35/14 

Изобретение относится к медицин и может быть использовано при хранении крови. Известен способ хранения крови в жидком состоянии при 4°С с консервантом ЦОЛИПК-78 ij . Однако известный способ не обес печивает длительного хранения кров с сохранением функциональной актив ности ее компонентов. Целью изобретения является увеличение сроков хранения крови. Указанная цель достигается тем, что согласно способу хранения кров . в жидком состоянии, последнюю под давлением 400-500 атм охлаадают соответственно до (-5)-(-6) С. Пример. Контейнер предварительно стерилизуется и заполняется кровью. Используются контеймеры двух типов: стеклянные и резиновые (силиконовые). Контейнер заливается дистиллированной водой и кипятится в течение 30-45 мин в закрытом виде в стерилизатбре для шприцов. Затем стерилизатор с контейнером переносится в бокс. В боксе находится кровь, привезенная со станции переливания крови. Кровь, стабилизированная гепарином из расчета 5 ед. на 1 мл крови берут во флаконы емкостью 50 мл. В стерильном боксе вскрывается завальцованный флакон с кровью, и кровь наливается в контейнер, предварительно извлеченный из стерилизатора и ополоснутый физраствором. Это делается в целях избежания гемолиза водой,,в которой кипятился контейнер. Заполненный кровью контейнер помещается в камеру высокого давления,, которая представляет собой цилиндр с завинчивающимися пробками и с электровводами для измерения давления и температуры. Полость кам ры заполняет глицерин, который бес контактно, передает давление образцу, так как контейнер с кровью пред кзтавляет собой цилиндр с пробками, играющими роль поршня. В камере руч ным насосом создается давление. Следующая операция, охлаждение камеры, осуществляется в криостате до заданной температуры. Образец с кровью хранится в течение определен ного времени ;{5,10,20,30 сут). Зате начинается обратный процесс: камеру вынимают из криостата и через 15-20 мин, когда ее температура достигает комнатной температуры, начинают пла но сбрасывать давление до атмосферного. Такая последовательность операций необходима для предотвращени замерзания крови. Температура в кон тейнере поднимается медленно, в течение нескольких минут. В случае быстрого Сброса давления, кровь ка кое-то время находится при отрицате ной температуреt что неизбежно приводит к гемолиз у. После сброса давления образец извлекается из камеры для биохимических анализов. Определяется процент разрушенных эритроцитов, содержание гемоглобина, выход калия в плазму, содержание калия в эритроцитах, Pjo - характерный показатель, использующийся для оценки положения кислородно-диссоционных .:, кривых, приведенный к стационарным условиям ( рН7,4),по формуле Р5о Р + 0,48 рН 7,4, где Р фактически наблюдаемое парциальное давление кислорода при рН опыта. Морфология исследуется на мазках под микроскопом ( определяется число нормоцитов, шИповидных,сфероцитов). Кроме исследования красного ряда, исследуется белая кровь - фагоцитарная активность лейкоцитов по биолюминесцентному тесту. Все эти показания сравниваются с предварительно исследованными на контрольной гепаринизированной крови в день забора. В табл.1 дана сравнительная оценка хранения крови по предлагаемому и известному способам. В камере создается давление 400 атм и температура-(5+0,1) С.Образцы крови хранятся в этих условиях 5-3jO сут (табл.1). Через 5 сут исследуют жизнеспособность клеток крови и получают следующие результаты: разрушение эритроцитов менее 1% и составляет -О, 5±0, 5%. Сфероцитов и шиповидных клеток не обнаружено, а в известном их количество за это время увеличивается до 80%. Содержание калия в плазме по предлагаемому способу составляет 20,5 Т 1,2 мг%, а по известному содержание калия в плазме к 5 сут увеличивается до 33,,5мг%, Содержание калия в эритроцитах по предлагаемому способу к этому времени составляет 289+3,0 мг%, что выше, чем в известном (257+0,3 мг%). через 7 сут хранения составляет 19,3±1,29 мм рт.ст., а по известному способу - М5,2+0,95 мм рт.ст. Фагоцитарная активность лейкоцитов за 4 сут хранения почти не изменяется (90-95%), а в известном составляет 0%. Через последующие 10, 20 и 30 сут почти все параметры, характеризующие функциональное состояние крови (табл.2), лучше,чем в известном. В табл.2 приведены результаты экспериментов по хранению эритроцитов крови, стабилизированной гепарином (разрушение эритроцитов в процентах). Преимущества предлагаемого способа по сравнению с известным зак- лючаются в том, что в известном уже через 12 ч лейкоциты практически

1 11249744

все терянзт свою активность, а врующих растворов, некоторые из копредлагаемом способе активностьторых токсичны.

остается высокой даже через 22 сут

хранения; предлагаемый способ эффек-Предлагаемый способ также позвотивнее по сохранению функциональ-ляет увеличить срок хранения крови

ных свойств красной крови; хранение при сохранении ее функциональной

крови не требует никаких консерви-активности/

in .«

% О

к

м

ъ

1Л

N

И

го

«п

ъ ОЧ

;t«

m с

о

.

00 N

1Л

ъ СО

Н в

h to n

оо

о +« о

м

0)

ъ

|

ю

N

i

гм

CN

+1 О

u

N

ОЧ

О.

ъ

гч

-Н гм

ъ

л

1Л

СПОСОБ ХРАНЕНИЯ КРОВИ в жидком состоянии, отличающийся тем, что, с целью увеличения сроков ее хранения, кровь под давлением 400-500 атм охлаждают соответственно до (-5)-(-6)С.

А

о гч

о

00

Н

Н S

in г

441

о

Ч

о о

N

Л

т

CN

о

N

Таблица2