ю
4
00 00
Изобретение относится к области виноградарства и может быть использовано для определения степени вызревания любого участка побега (однолетнего прироста) виноградного растения, чтобы получить тем самым показатель предзимнего состояния кустов и виноградника в целом, а также качества привоя и подвоя.
Цель изобретения - ускорение и повышение точности определения.
При осуществлении способа необходимо пользоваться разработанной шкалой (таблицей) определения степени вызревания побегов винограда по люминесцентно-микроскопической картине зрелости феллемы (пробкового слоя) перидермы (возбуждающий светофильтр ФС-1, запирающий ЖС-18 или ЖС-18 КЗС-19), по которой определяют степень вызревания в баллах.
Балл
Структура и флуоресценция феллемы
Сплошное кольцо, соответствующее конфигурации перидермы Не обнаруживается клеточное строение. Желто-золотистое свечение, яркое, равномерное по интенсивности;
Сплошное кольцо, местами суженное. Видны очертания клеток, большинство из которых сплюснутые. Содержимое клеток светится желтым цветом, только у отдельных клеток или небольших участков феллемы яркое желтое свечение их содержимого.
Сплошное кольцо, местами суженное. Видно клеточное строение. Клетки не сплюснуты свечение их содержимого зеленожелтое, местами ярко-зеленое
Несплошное кольцо, местами сильно суженное или рваное. Четкое клеточное строение, свечение их содержимого неяркое зеленое без оттенка желтого;
Только местами видны участки феллемы. Слои клеток узкие.
Продолжение табли.цы
Структура и флуоресценция
Балл феллемы
Хорошо различимы очертания клеток, свечение их содержимого грязно-зеленое.
римечание,
Наблюдаемые люминесцентно-микроскопические картины, как правило, позволяют также определить и промежуточное положение между двумя оценками.
Способ осуществляют следующим образом.
Пример 1. Производят бритвой или микротомом срез (толщиной 50-100 мкм) однолетнего побега винограда, степень вызревания которого желательно определить.
Срез или несколько срезов производят в одной или нескольких точках по длине побега (в зависимости от задачи), кладут на предметное стекло микроскопа, наносят сверху 1-2 капли вазелинового масла или глицерина (эти вещества не флуоресцируют), покрывают покровным стеклом и просматривают в отраженном свете любого люминесцентного (флуоресцентного) микроскопа при объективе Эпи 9 или же в обычном световом биологическом микроскопе с люми.. несцентным осветителем ОИ-28 при объективе 10. Возбуждающий светофильтр ФС-1, запирающий -ЖС-18 или ЖС-18+ЖЗС-19. Перемещая столик микроскопа и фокусируя, наводят сперва объектив на флоэму (луб), кotopый легко распознать по красному свечению хлорофилла клеток мягкого луба и характерному расположению и зеленому свечению пучков твердого луба. Затем, уже сориентировавшись по лубу, переводят объектив к периферии среза, где на границе луба и корки расположено кольцо
0 перидермы. Для начинающих рекомендуется сперва наладить обычное освещение (вставив белый светофильтр МС-13 («молочный) или нейтральный светофильтр НС-10 вместо возбуждающего фиолетового ФС-1), определить расположение тканей, а затем,
5 поставив соответствующие светофильтры, просмотреть структуру феллемы и ее флуоресценцию. Форма феллемного (как и всей
перидермы) кольца, благодаря выступам на перекрещении с сердцевинными лучами настолько характерна, что этот слой исключительно легко обнаружить. Для лучшего освоения предлагаемого способа рекомендуется сделать серию срезов: по одному от каждого междоузлия осеннего побега, расположить их в той же последовательности на предметном стекле и начать просмотр со среза первого междоузлия от основания лозы.
Для определения степени вызревания следует провести объективом по всему кольцу феллемы и, пользуясь предлагаемой шкалой, определить балл. Допустим, что кольцо феллемы сплошное, в нем имеются суженные участки, но их всего 2-3, видно клеточное строение. Большинство клеток не сплюснуты, сохранили еше первоначальную форму, они флуоресцируют зеленожелтым цветом. Согласно шкале следует записать, что степень вызревания данного участка побега соответствует баллу 3.
Пример 2. При таком же проведении определения, как в предыдущем примере, картина флуоресценции несколько иная: те же
наблюдаемые данные, что и в предыдущем примере, но нет суженных участков феллемы и часть клеток флуоресцирует ярким желтым светом. В данном случае степень вызревания выше чем балл 3 на 0,5 балла.
Значит и запись должна быть соответствующей:3,5 балла.
Пример 3. Вместо срезов производят только поперечный разрез побега в нужном для анализа месте. Делается это,следующим образом: секатором разрезают побег в том месте, где желают провести определение, например середина первого междоузлия, и место разреза зачишают бритвой от микротома обычной бритвой или хорошо заточенным прививочным ножом. Затем срезают ниже
на 1 см и нижним незачищенным концом прикрепляют к предметному стеклу микроскопа пластилином или другим липучим веществом. Образцу дают подсохнуть в условиях помещения в течение суток. Настраивают люминесцентный микроскоп, исследуют разрез таким же образом, как это описано в первом примере и устанавливают балл степени вызревания по предлагаемой шкале.
название | год | авторы | номер документа |
---|---|---|---|
СПОСОБ ГИСТОХИМИЧЕСКОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТЕПЕНИ ПОВРЕЖДЕНИЯ ВИНОГРАДНЫХ ПОБЕГОВ МОРОЗАМИ | 2013 |
|
RU2549785C1 |
Способ определения серотонина в клетках нервной ткани на гистологическом препарате | 1983 |
|
SU1193497A1 |
Способ выявления серотонина на гистологическом препарате | 1987 |
|
SU1594370A1 |
СПОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИ В- И Т-ЛИМФОЦИТОВ В МАЗКЕ КРОВИ | 1991 |
|
RU2112239C1 |
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ НЕАКТИВНОЙ ФОРМЫ ТУБЕРКУЛЕЗА | 1991 |
|
RU2111489C1 |
Способ флуоресцентного гистологического выявления амилоида | 2015 |
|
RU2611408C1 |
Способ цитохимического определения кальция в клетках крови | 1988 |
|
SU1663487A1 |
СПОСОБ ФЛУОРЕСЦЕНТНОЙ ДИАГНОСТИКИ БАЗАЛЬНОКЛЕТОЧНОГО РАКА КОЖИ | 2008 |
|
RU2387376C1 |
Способ определения устойчивости растений капусты к капустным мухам | 1985 |
|
SU1299550A1 |
ШТАММ ГИБРИДНЫХ КУЛЬТИВИРУЕМЫХ КЛЕТОК ЖИВОТНЫХ MUS. MUSCULUS L., ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ К CHLAMYDIA | 1998 |
|
RU2158760C2 |
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТЕПЕНИ ВЫЗРЕВАНИЯ ПОБЕГОВ ВИНОГРАДА путем анализа побегов, по морфологическим признакам и последующей оценки по изменению последних, отличающийся тем, что, с целью ускорения и повышения точности способа, анализу подвергают структуру феллемного слоя перидермы, которую просматривают в фиолетовых лучах под микроскопом и по цвету и интенсивности первичной флуоресценции судят о степени вызревания побегов таким образом, что при изменении цвета свечения от зеленого к желто-золотистому, а очертаний клеток от четких до полностью исчезнувших степень вызревания соответственно возрастает.
Лазаревский М | |||
А | |||
Изучение сортов винограда | |||
Изд-во Ростовского ун-та, 1963, с | |||
Способ очистки нефти и нефтяных продуктов и уничтожения их флюоресценции | 1921 |
|
SU31A1 |
Авторы
Даты
1985-08-15—Публикация
1983-12-05—Подача