Способ выявления серотонина на гистологическом препарате Советский патент 1990 года по МПК G01N33/48 A61B10/00 

Изобретение относится к области медицины.

Целью изобретения является повьше- ние точности способа за счет более полного выявления ееротонина по мёс- ту тканевой локализации.

Способ осуществляют следующим образом.

Биологическую ткань (нервные узлы) монтируют на предметные стекла. Далее их обрабатывают 0,1%-0, 25%-HbjM раствором резерпина в течение 15 - 30 мин. Затем образцы промывают в физиологическом растворе и помещают на 20 минут в 2%-ный раствор глиоксило- вой кислоты на фосфатном буфере с рН 3,0 - 5,5. Образцы подсушивают под струей воздуха, а затем переносят в термостат с температурой 90-100°С на 5 мин. После прогревания в термостате пробы заключают в вазелиновое масло или полистирол и изучают под минесцентным микроскопом в падающем ;

свете со светофилг трами ФС-1-4 и БС 8-2 с диапазоном источника света в пределах 380-540 нм и с запирающими светофильтром ЖЗС-19 или ЖС 18-2 с длиной волны не менее 470 нм).

По интенсивности свечения клеток определяют содержание ееротонина.

Пример 1. Исследованы нейроны дорзальных ядер шва. Готовили криостатные срезы. Далее их помещали ,в 0,1%-ный раствор резерпина на 15 мин, затем помещали в 2%-ный раствор , глиоксиловой кислоты.

л

При люминесцентно-микроскопическом исследовании (максимум свечения при длине волны 532 Т 12 нм) промерялось не менее 20 клеток. Содержание ееротонина в них равно 16,,61 ус.ед.

Пример 2. Исследованы нейроны Ретциуса. Образцы ткани монтировали на стекло. Далее обрабатьшали в 0,25%-ном растворе резерпина и2%-ном

(Л

ел

со

растворе глиоксиловой кислоты При люминесцентной мИ1 роскопии клетки Рет- циуса ярко флуоресцируют. Фотометрический просчет позволил выявить в них содержание серотонина в пределах 21,5+0,54 усл.ед.

Способ позволяет более полно выявить серотонии в клетках и ткани организма, что повьшает точность его определения до 90-100% по сравнению со способами, основанными на биохими гес- ком определении.

При предлагаемом способе флуоресценция серотонина более четкая на нёфпуоресцирующем фоне.

10

5

Формул а изобретения

Способ выявления серотонина на гистологическом препарате путем инкубации в среде, содержащей раствор глиоксиловой кислоты, термостатирова- ния препаратов при 90-100°С с последующим фотометрическим определением серотонина по люминесцентному свечению, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа за счет более полного выявления серотонина в клетках и ткани, препараты перед инкубахщей обрабатьтают О,1-0,25%-ным раствором резерпина в течение 15-30 мин, а раствор глиоксиловой кислоты используют с рН 3,0-5,5.

Изобретение относится к медицине, а именно нейрогистологии. Целью изобретения является повышение точности способа за счет более полного выявления прототипа. Цель достигается тем, что препараты нервных узлов предварительно обрабатывают в 0,1-0,25 % растворе резерпина в течение 15-30 мин, далее инкубируют в 2% растворе глиоксиловой кислоты на фосфатном буфере с PH 3,0-5,5. Содержание серотонина определяют при люминисцентной фотометрии с использованием длины волны 532±12 нм.