Устройство для исследования физико-химических параметров живых микрообъектов Советский патент 1985 года по МПК G01N21/03 G01N33/48 G02B21/00 

si

, 1 Изобретение относится к лабортор ной физико-химической технике, а именно к устройствам для исследования физико-химических параметров жи вых микрообъектов, и может быть использовано в различных областях био логии и медицины для наблюдения за движением микрообъектов в слоях раз личных сред фиксированной толщины методами световой микроскопии при одновременном изменении и регистрации физико-химических параметров среды, связанных с жизнедеятельностью микрообъектов. Известна камера для наблюдения фиксированньк живых микрообъектов, состав среды в которой изменяется принудительно при замещении всего объема среды инкубации фиксированных клеток, зазор между предме ным и покровным стеклами составляет несколько миллиметров lJ. Данная камера непригодна для наблюдения за движением живых микрообъектов различными способами свето вой микроскопии (в первую очередь методом темного поля) при одновре менном направленном изменении соста ва среды. Наиболее близким к изобретению п своей технической сущности является устройство для исследования физикохимических параметров живых микрообъектов , содержащее камеру с крышкой и боковьп- и отверстиями, в которые вставлены датчики контроля и изменения параметров среды в камере мешалку с крыльчаткой, а также пред метное и покровное стекла, расположенные соответственно в дне камеры и в крьш1ке 2 . С помощью такого устройства можно изменять физико-химические параметры среды и контролировать происходящие изменения. Однако посредством этого устройства невозможно наблюдать за движением живых микрообъ ектов методами световой микроскопии Целью изобретения является обеспечение одновременного наблюдения за движением живых микрообъектов, заданного изменения параметров среды и их измерения. Указанная цель достигается тем, что в устройстве для исследов ния физико-химических параметров живых микрообъектов предметное 822 и покровное стекла установлены с эксцентриситетом относительно оси камеры, а крьщ1ка установлена с возможностью вращения и на ее внутренней поверхности расположена крыльчатка мешалки. На чертеже схематически изображен общий вид устройства. Устройство включает камеру 1, в дно которой вмонтировано с эксцентриситетом предметное стекло 2. На боковой поверхности камеры выполнено отверстие 3. Крьшака 4 камеры установлена с возможностью вращения и снабжена покровным стеклом 5, ось которого имеет эксцентриситет с осью камеры и крыльчаткой 6 мешалки. Устройство имеет также уплотнительные кольца 7, термостатирующее устройство 8 с входным 9 и выходньм 10 патрубками, прижимное неподвижное полукольцо I1, прижимное подвижное полукольцо 12, эксцентриковый прижим 13, опору 14 эксцентрикового прижима, подшипник 15 скольжения эксцентрикового прижима, подшипник .16 скольжения камеры, шестерню 17 и гильзы 1820, в которые вставлены датчики. Устройство работает следующим образом. Рассмотрим случай исследования влияния высоких концентраций ионов натрия на подвижность Е. со Г в ан- ; аэробных условиях, Камеру 1 устанавливают на предметном столике микроскопа и фиксируют с помощью двух полуколец 11 и 12. Затем камеру нагревают до 30 С с помощью термостатирующего устройства 8, соединенного через патрубки 9 и 10 с выносным термостатом. В одну из гильз вводят электрод для измерения концентрации кислорода. Свет фокусируют Ьа предметном стекле 2 камеры. Далее камеру заполняют средой для инкубации бактерий и закрывают крьшгкой 4. Избыток жидкости вытекает через отверстие 3, через которое в процессе наблюдения вводят добавки. Крьш1ку 4 фиксируют с помощью эксцентриковых прижимов 13, предотвращающих подъем крышки 4 при вращении. Шестерню 17 Крьш1ки 4 npHcqeдиняют к валу двигателя. Объектив микроскопа опускают до попадания предметного стекла 2 в фокус, включают двигатель и перемешивают содержимое камеры с помощью крыльчатки 3.П 6. После стабилизации показаний кислородного электрода через отверстие 3 вносят суспензию бактерий. После равномерного распределения бактерий по камере двигатель выключают и опре деляют скорость движения бактерий в течение 20-30 с. Затем перемешивание продолжают. Остановки крыльчатки мешалки не нарушают линейности по казаний кислородного электрода. После исчерпания в среде инкубаци кислорода скорость движения бактерий подает. Когда скорость движения бактерии достигает нуля, через отвер стие 3 в камеру вносят необходимое 2 количество концентрированного раствора хлористого натрия,перемешивают 30-40 с и производят наблкщение за бактериями. Наблюдение проводят 20-30 мин при периодическом перемешивании среды. Данное устройство позволяет регистрировать одновременно методом световой микроскопии скорость движения бактерий и концентрацию кислорода в среде инкубации, благодаря чему удается показать, что в анаэробных -условиях экзогенные ионы натрия .(150 мкМ возобновляют движение бактерий на 2-3 мин.

УСТРОЙСТВО ДЛЯ ИССЖДОВАНИЯ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИХ ПАРАМЕТРОВ ЖВЫХ МИКРООБЪЕКТОВ, содержа.щее камеру с крьппкой и боковыми отверстиями, в которых размещены датчики контроля и изменения параметров среды в камере, мешалку с крыльчаткой, а также предметное и покровное стекла, расположенные соответ- ственно в дне камеры и в крышке, о тличающе е с я тем, что, с целью обеспечения одновременного наблюдения за движением живых микрообъектов, заданного изменения пара-с метров среды и их измерения,предметное и покровное стекла установлены с эксцентриситетом относительно оси камеры, а крышка установлена с возможностью вращения и на ее внутренней поверхности расположена крыльчат(Л ка мешалки.

fS