Способ определения состояния сенсибилизации организма к вирусу гриппа Советский патент 1985 года по МПК A61B10/00 

«Л

с

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОСТОЯНИЯ СЕНСИБИЛИЗАЦИИ ОРГАНИЗМА К ВИРУСУ ГРИППА путем исследования миграционной активности лейкоцитов в присутствии антигена с последующим учетом полученных результатов, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, клетки зоны миграции фиксируют, окрашивают по Романовскому-Гимза, определяют состав мигрирующих клеток и по преобладанию в зоне миграции лимфоцитов при отсутствии нейтрофилов диагностируют сенсибилизацию к вирусу гриппа.

со Ф 1C

f

Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано для оценки состояния сенсибилизации организма при проведении вакцинации и ревакцинации, а также в научных исследованиях для установления закономерностей формирования противогриппозного иммунитета.

Целью изобретения является повышение точности способа..

Пример. Лейкоциты вьщеляют из гепарииизированной крови привитых и добавляют аллантоисную жидкость, содержащую вирус гриппа, смесь инкубируют 30 мин при -4 С, надосадочную жидкость удаляют из клетки, культивирук1Т в среде 199 с 1% альбумина человека. Камеры для постановки РИМЛ монтирзпот на высушенных предметных стеклах, предварительно обработанных хромпиком и хранящихся в соляно-кислом спирте (1 часть НСГ и 10 частей 96° спирта) На каждое предметное стекло наклеивают 3 камеры и с помощью четырех капель парафина укрепляют на стекле, Примечание.

976422

используемом для постановки РИМЛ. После учета РИМЛ тонко оттянутой дастеровской пипеткой отсасывают культуральную жидкость, на нарушая

зоны миграции, после чего препараты высушивают, фиксируют в метило- .вом спирте 3 мин и окрашивают по Романовскому-Гимза. с промытых и высушенных препаратов удаляют камеры, а предметные стекла снимают со стекла для постановки РИМЛ, Готовые препараты исследуют под микроскопом с использованием объективов х20, X 90. При этом определяют основной тип мигрирующих клеток (нейтрофилы либо лимфоциты).

Преобладание в зоне миграции лимфоцитов и отсутствие нейтрофилов указывает на активный синтез фактора, ингибирующего миграцию нейтрофилов.Результаты определения вида мигрирующих клеток и индекса миграции У вакцинированных и ревакцинирован- ных инактнвированной гриппозной вакциной представлены в таблице. 12 3 нейтрофилы, 9 лимфоциты ср, 1,09 8 7 нейтрофилов 1 лимфоцит ср. 1,11. - - 1 г после I прививки. - 4,5 мес после П прививки. Р70,05. j Из приведенных в таблице данных видно, что величина индексов миграции у первично и повторно привитых заметно не отличалась. Вместе с тем у большинства первично привитых через год после иммунизации в зоне миграции обнарз живали лимфоциты (что указывает на сенсибилизацию к вирусу гриппа), тогда как у повторно привитых - нейтрофилы. Наличие в зоне миграции лимфоцитов 197642 4 указывает на нецелесообразность лнв1о даже противопоказанность ревакцинации в период сохранения организмом сенсибилизации к вирусу гриппа, j Таким образом, точность определения состояния сенсибшгаздции организма при использовании предлагае(Mofo способа повышается в 4 раза ; (по прототипу - состояние сенсибню -пизации определено у 16,6%, а при предлагаемом способе 75%).