Способ массового разведения нематод-мермитид RомаNомеRмIS cULIcIVoRax Rотн aND SмIтн Советский патент 1987 года по МПК A01K67/00 

Изобретение относится к области медицинской паразитологии, а именно, § биологическому методу борьбы с паразитическими насекомыми.

Целью изобретения является повышение выхода нематод и сокращение трудозатрат при разведении личинок-комаров.

Пример 1. Для культивирования мермитид используют личинки комаров лабораторной культуры Culex pi- piens molestus (штамм Московского государственного университета). Кладки собирают, подсчитывают количество яиц в них и помещают в эмалированные кюветы (33x26x4 см) с дехлорированной водопроводной водой.В каждой кювете заражают от 1 до 5 тыс.личинок комаров 1-2-го возраста.

Для этого заливают препарат мермитид водой определенного объема (обычно 50-200) мл для получения предпара- зитических личинок. Препарат представляет собой песок с содержащимися в нем самцами, самками и яйцами мермитид. Через 2-3 ч эту воду сливают, тщательно перемешивают, берут 10 капель по 0,1 или по 0,05 мл на дно чашки Петри и определяют число предпаразитических личинок в одной пробе под бинокуляром. Например, в одной пробе содержится: 7, 16, 11, .9, 12., 20, 11, 6, 8, т.е. всего 113 личинок следовательно, в среднем 11,3 экз.в 0,05 мл, тогда в 100 мл воды их содержится 22,600. Если в каждой пробе (0,1 или 0,05 мл) содержится больше 20 предпаразитических личинок, то объем воды, налитой в препарат, следует увеличить в 2-3- раза.

Для заражения личинок комаров в соотношении 1:4 (хозяин:паразит) берут приблизительно 5500 личинок 2- го возраста (54001100) в кювете и добавляют к ним воду с предпаразити- ческими личинками. Сравнение продукции Romanomermis culicivorax при различных соотношениях заражения хозяин:паразит приведено в табл.

На следующий день зараженных личинок комаров рассаживают по 1500- 2000 экземпляров в кюветы размером 44 X 33 X 4 см. Кормят личинок пивными или гидролизными дрожжами,воду в кюветах периодически аэрируют с помощью микрокомпрессоров МК-Л12.На

с мермитидами на хра- в термостат при-26 С. Через

седьмые-восьмые сут. зараженных личинок комаров сливают на сито, промывают и оставляют сито с личинками в сосуде- с водой., закрепив его на расстоянии 3-5 см от дна сосуда. По мере выхода из личинок комаров постпаразитические личинки мермитид проходят через сито и опускаются на

дно сосуда. Их затем сливают в меньшие сосуды, повторно промывают водой несколько раз, осушают фильтровальной бумагой, взвешивают и помещают в стеклянные чашки или кристаллизаторы (диаметром 60-100 мм). На дне чашек находится промытый и прокипяченный речной песок (размер частиц 0,4-1,6 мм). Слой песка в 1,5-2 см, покрытый водой, толщина водного слоя

0,1-0,2 см. Через 2-3 дня излишки . воды оттягивают из песка пипеткой и ставят чашки нение 4-5 недель препарат, мермитид можно

залить водой для получения-предпаразитических личинок. После первого залива препарата и выплода из него личинок производят повторные заливы с интервалами 3-5 дней. Можно заливать препарат в любое время

после истечения 4-5 недель хранения его в термостате (см. табл.).

Пример 2. Заражецке личинок в соотношении хозяин-паразит как

Ij5 проводят так же, как описано в примере 1. Для заражения, например, 2000 личинок берут 10000 предпаразитических личинок мермитид (см.табл.). Пример 3. Для заражения

личинок комаров в соотношении 1:6 берут соответствунлцее чи сло предпаразитических личинок и проводят все операции, как описано в примере 1 (см. табл.). .

Пример 4. Заражение личинок; комаров в соотношении 1:10 проводят аналогично, масса продукции, получаемая в результате опыта, оказывается меньше, чем масса продукции при меньших вели-чинах соотношений хозяин:паразит (см. табл.).

Пример 5. Заражение личинок комаров в соотношении 1:3 проводят, как в предыдущих случаях, масса продукции постпаразитических личинок оказывается меньше (см. табл.).

Пример 6й7. Заражение 1;7 и 1:10 проводят так же, масса продукции постпаразитов тоже меньше, чем

масса предлагаемых оптимальных соотношениях хозяин:паразит (см. табл.).

В результате заражения личинок комаров мермитидами пропорция полов (самки/самцы) -при соотношении 1:4- 1:6 составляла 1/1-1/5, а при соотношении 1:10 она увеличивалась до 1/10-1/30,при повьпаении этого соот- ношения она будет еще выше. Самки

В результате опытов из кажд сячи зараженных личинок комаро 1ех pipiens molestus получали

мермитид весят в 2-2,5 больше, чем W нем 607 мг взрослых мермитид.

Сравнение массы продукции мермитид Romanomermls cullcivorax при различных соотнршаниях заражения хозяин;паразит

Соотношение

хозяин/паразит 1:31;4liS1:61:7lilO1:12 1:13 1:14 Iil5

7

75

813II

79.7387

Продукция мер-

мити д из ,1 тыс.

личинок (мг) 470+52 620+60 590+65 613+68 506+58 512+53 440 495 480 535

Соотношение по-...

лов в потомст-

ве1/2-1/3 1/2-1/5 1/1-1/51/2-1/4 1/3-1/15 I/IO-J/30-Абсолютный

выход самок

(мг)157-117,5207-103290-98 204-122,5 126,5-31,6 4fe,5-16,5 -- Составитель В. Горбатовский Редактор С. Рекова Техред А.КравчукКорректоре. Кравцова

Заказ 5910Тираж 628. Подписное

ВИИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Прои знодственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

самцы. Этим объясняется повышение массы продукции мермитид при заражеНИИ 1:4 - 1:6. При увеличении числа самок повышается число отложенных

ими яиц и, следовательно, эффективность препарата.

В результате опытов из каждой тысячи зараженных личинок комаров Си- 1ех pipiens molestus получали в средII

29 28 40 3

7394

75 80 85 88