СРЕДСТВО ДЛЯ БОРЬБЫ С ЛИЧИНКАМИ КРОВОСОСУЩИХ КОМАРОВ Российский патент 1995 года по МПК A01N63/00 C12N1/20 

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к микробиологии, к препаратам против личинок комаров-ларвицидам.

Известны препараты против личинок комаров на основе бактерий, грибов, простейших и т. д. Наибольшее применение получили из них препараты на основе Bac. thuringiensis Н-14, такие как вектобак, текнар, бактилос, бактоларвицид, бактокулицид, содержащие смесь токсинов и спор.

При наличии сильного ларвицидного действия препараты имеют некоторые недостатки избирательность действия на личинки, деактивация под воздействием факторов внешней среды.

Прототипом изобретения является препарат бактокулицид, состоящий из 3,5-4,5% споротоксического комплекса, остатков питательной среды и наполнителя-хлористого натрия.

Недостатком прототипа является потеря 55% активности через 60 дней после начала применения.

Цель изобретения создание рецептуры более стабильного ларвицидного препарата.

Цель решается путем введения в состав препарата целлюлозосодержащей добавки при следующем соотношении ингредиентов в конечном продукте, мас. Хлористый натрий 3-8
Целлюлозосодержащая добавка 2-15
Остатки культуральной
жидкости, содержащей
споротоксический комплекс (СТК) Остальное
В качестве целлюлозосодержащей добавки используют древесную муку, микрокристаллическую целлюлозу (МКЦ), карбоксиметилцеллюлозу или другие производные целлюлозы, их смеси и т. п.

Содержание СТК в остатках культуральной жидкости (КЖ) зависит от условий культивирования и составляет около 10%
Наряду с хлористым натрием для придания большей прочности готовой формы препарата возможно введение в состав добавок полимерных материалов, например поливинилового спирта в микроколичествах (до 1%).

Препараты ларвицидного действия аналогичного состава в литературе не описаны, что свидетельствует о новизне заявляемого изобретения.

Проведенные исследования технического уровня изобретения показали, что введение в состав препарата целлюлозосодержащей добавки приводит к стабилизации активного начала, по-видимому, за счет физико-химического взаимодействия между полисахаридными цепями целлюлозы и белковой структурой токсина (включая элементы сорбции и комплексообразования). В результате образуется новая стабильная структура препарата, проявляющая как несколько более высокую активность к личинкам разного вида, так и существенно более высокую стабильность сохранение через 60 дней 70% активности. Наличие новой структуры подтверждается тем, что при концентрации добавки 12-15% активность через 60 дней составляет около 55-60% а при 6-8% 70% исходной. Повышение концентрации более 15% приводит к снижению удельной активности за счет сильного разбавления инертным материалом.

Технология получения препарата достаточно проста и включает смешение компонентов с последующим высушиванием смеси, например, на распылительной сушилки с температурой на входе 140^оС.

П р и м е р 1. Смесь, содержавшую 700 г концентрированной культуральной жидкости, содержащей токсины и споры Bac. thuringiensis Н-14 (10,5% сухого вещества, 25 г древесной муки, 20 г карбоксиметилцеллюлозы, 45 г хлористого натрия и 5 г поливинилового спирта смешивали в течениe 30 мин на механической мешалке, а затем сушили на распылительной сушилке с температурой на входе 140^оС.

Полученный порошок исследовали, помещали в стеклянные сосуды с 5 л воды, взятой из природного водоема с илом, растительными остатками и водорослями. Обработка водной поверхности проводилась опрыскиванием из пульверизатора суспензий из расчета на норму расхода препарата в производстве 1,5 кг/га. В сосуды помещали личинок Aedes aegypti инсектарной популяции в день обработки и через 15, 30, 45, 60 дней после обработки. Учет гибели личинок проводили на 5-е сутки. При титре препарата 46 млрд. спор/г эффективность составила (в скобках данные по бактокулициду активностью 53 млрд. спор/г): 3 сут. 100% (100% ), 15 сут. 100%(100%), 30 сут. 100% (100%), 45 сут. 84% (60%), 60 сут. 70%(45%).

П р и м е р 2. В условиях примера 1 получали препарат, содержавший 20% микрокристаллической целлюлозы, 10% КМЦ, 5% хлористого натрия, 83% КЖ, содержащей СТК. Титр-51 млрд. спор/г. Опыты по вышеупомянутой методике проводили на личинках A.aegypti, A.communis, личинок 2 и 4 возраста Culex pipiens molestus. В концентрации 0,25 мг/л гибель через 24 ч составила соответственно: 100,100,92,80% (бактокулицид-100, 100, 98, 84), а через 45 дней: 84, 86, 71, 62 (50, 56, 48, 40).

П р и м е р 3. В условиях примера 1 получали препарат, содержавший 6% древесной муки, 2% бутилцеллюлозы, 3% хлористого натрия, 89% КЖ с СТК. Титр составлял 78 млрд. спор/г. Препарат применялся в виде таблеток массой 20±5 г. Проведенные испытания показали, что при ЛД₅₀ 0,12 мг/л он через 60 дней сохраняет в природных условиях 65% активность против A.aegypti.

Как показали проведенные испытания на личинках различных кровососущих комаров, использование новых препаратов позволяет не только провести разовую практически 100%-ную инсектицидную обработку водоемов, но и добиться пролонгированного эффекта сохранения 65-70% активности через 60 дней после обработки, что почти на 40% превышает показатели используемых в настоящее время биоларвицидов. Внедрение новых препаратов предполагается в промышленных масштабах в 1992-1993 гг. на предприятиях концерна "Биопрепарат", а также на совместном предприятии концерна за рубежом.

Использование: биотехнология, в частности объекты микробиологии. Сущность: предложен препарат на основе Bac. thuringensis H-14, включающий остатки культуральной жидкости, содержащие спорокристаллический комплекс, хлористый натрий и целлюлозосодержащую добавку в определенном соотношении ингредиентов. Препарат имеет высокую активность по отношению к личинкам комаров разных видов. 2 з.п. ф-лы.

1. СРЕДСТВО ДЛЯ БОРЬБЫ С ЛИЧИНКАМИ КРОВОСОСУЩИХ КОМАРОВ, включающее спорокристаллический комплекс бактерий Bacillus thuringiensis Н-14 с остатками культуральной жидкости и хлористый натрий, отличающееся тем, что оно дополнительно содержит целлюлозосодержащую добавку при следующем соотношении ингредиентов, мас.

Хлористый натрий 3 8
Целлюлозосодержащая добавка 2 15
Спорокристаллический комплекс бактерий Bacillus thuringiensis H-14 с остатками культуральной жидкости Остальное
2. Средство по п. 1, отличающееся тем, что в качестве целлюлозосодержащей добавки используют целлюлозу, древесную муку, производные целлюлозы или их смесь.