Способ определения цистеина в водной среде Советский патент 1986 года по МПК G01N21/78 

Изобретение относится к аналитической химии, к способу фотометрического определения микрограммовых количеств цистеина-аминокислоты, содержащей БН-группу, относящейся к меркаптанам и может быть применено для анализа природных И сточных вод грязевых растворов лечебных грязей, биологических материалов и других природных и промьшшенных объектов.

Целью изобретения является повышение чувствительности способа.

На чертеже представлен градуиро- вочный график для определения концентраций цистеина методом добавок.

Пример 1. а) Каждую пробу грязевого раствора -подвергают гидролизу концентрированной соляной кислотой при кипячении в течение 20- 30 мин, охлаждают, нейтрализуют, доводят уровень до первонача/шного. дистиллированной водой.

К 1 мл спиртового раствора реагента - 1-(хиноксапил-2 )-З-метил- 5(4 -диметиламинофенил)-формазан

концентрации 10 . добавляют

0,1 мл водного раствора азотно-кис .: - -. . моль лой ртути концентрации Ш ,

л

затем О , 1 мл гидролизованного грязевого раствора с хорошим санитарно- бактериологическим показателем (SH- группы отсутствуют), добавляют буфер (универсальная буферная смесь: фосфорная, уксусная, борная кислоты Р,рА М в отношении каждой из .них и Ь,2 к. NuOH), доводят этиловым спиртом до 5. мл. Полученный раствор должен быть с-рН 5,5. Предварительно в контрольном растворе также ycTaHaBjm вают рН 5,5. Полученный раствор фото метрируют в тех же условиях, что и контрольный раствор: при 580 ммк толщине поглощающего слоя J 1 см. Найденное значение оптической плотности исследуемого раствора А,, aAAj . Используя метод добавок, получают прямолинейный график, проходяпщй через начало координат, что свидетельствует об отсутствии цистеина в грязевом растворе с хорошим санитарно-бактериологическйм показателем.б) Приготовление ртутно-формаза- нового комплекса t пробой грязевого раствора, имеющего плохой санитарно- бак-териологический показатель. К 1 м

12395642

спиртового раствора реагента концент,. „ 01

рации IО добавляют 0,1 мл раствора азотно-кислой трути концентра, „ моль „ ,

ции 10 , затем 0,1 мл гидролил

зованного грязевого раствора с плохим санитарно-бактериологическйм показателем (ВН-группы присутствуют),

добавляют буфер, доводят этиловым спиртом до 5 мл. Полученный раствор должен иметь рН 5,5. Предварительно в контрольном растворе также устанавливают рН 5,5. Полученный раствор ,

фотометрируют в тех же условиях, что и контрольный раствор: 580 ммк, i 1 см. Найдено значение оптической плотности исследуемого раствора Аг, а ЛА,,тр г- то значение

ЛА откладьшают на оси ординат. Ис-. пользуя метод добавок, получают прямолинейный график, проходящий через точку в нашем-случае и точку Сд. Абсохпотное значение отрезка ОСх-3,6 ыкг/мл выражает искомую концентрацию Щ1стеина в растворе. Результаты представлены на чертеже.

0

Пример2. а) Приготовление, ртутно-фармазанового комплекса с пробой грязевого раствора, имеющего хороший са1титарно.-бактериологическйй показатель.

К 1 мл спиртового раствора реагенг та (хиноксалил-20-3-метил-5( 5 риме тиламинофенил )-формазан концент. „-4 моль - . . рации 10 - добавляют 0,1 мл вод-J

ного раствора азотно-кислой ртути

, .-,.-3 моль „ . 0 концентрации 10 , затем 0,1 мп

гидролизованного, как указанного в примере 1, грязевого раствора с хорошим санитарно-бактериологическим показателем, добавляют буфер,.дово-. дят этиловым спиртом до 5 мл. Полу- ченный раствор должен быть с рН 12,5, Предварительно в контрольном растворе рН также устанавливают 12,5. Раствор фотометрируют в тех же условиях, что и контрольньй раствор: при 580 ммк, толщине поглощающего слоя J 1 см. Найденное значение оптической плотности исследуемого раствора А/, а ЛА,Ацоцтр -А,0, 5 что свидетельствует об отсутствии цистеина в грязевом растворе с хорб - шим санитарно-бактериологическим показателем.

5

0

б) Приготовление ртутно-формазан вого комплекса с пробой грязевого раствора, имеющего плохой санитар- но-бактериологический показатель.

К 1 мл спиртового раствора реагента концентрации 10 моль добавля1от мл гидролизованного грязевого раствора и 0,1 мл раствора азотно-кислой ртути концентрации

, -. моль .

10 -.-- добавляют буфер, доводят

этиловым спиртом до 5 мл. Полученный раствор должен иметь рН 12,5. Предварительно в контрольном растворе также устанавливают рН 12,5. Раствор фотометрируют в тех же условиях, что и контрольный раствор: jl 580 ммк, I 1 см. Найденное значение оптической плотности исследуемого раствора А,, а Д А

Ь.А от Ацд,. -Aj. S-fo. значение кладывают на .оси ординат. Используя метод добавок, получают, прямолинейный график, проходящий через точку AAj 0,17 в нашем случае и точку С(. Абсолютное значение отрезка ОСу 3,6 мкг/мл выражают искомую концентрацию цистеина в растворе. Количество определяемого вещества в грязевом растворе с плохим санитарно- бактерйологическим анализом с уч 2395644

том .разведения исходного грязевого раствора (графическим способом) составляет 4,32 г/л .

Результаты представлены на черте- 5 же.

Предлагаемый способ позволяет повысить чувствительность определения до 0,32 мкг/мл (в известном способе

1 ,3:,мг/мл).

10

Формула изобретения

1,Способ определения цистеина в водной среде путем обработки анализируемой пробы концентрированной минеральной кислотой при кипячении с последующей нейтрализацией, обработки азотно-кислой ртутью и спиртовым раствором производного формазана

с последующим фотометрированием полученного раствора, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности способа, в качестве кислоты используют соляную кислоту, в качестве производного формазана - 1-(хиноксапил-2 )-Э-метил- -5 (4 -дим етиламинофенил) -формаз ан.

2.Способ по п. 1, о т л и ч а ю- щ и и с я тем, что обработку спиртовьм раствором производного формазана ведут при рН 5,5-12,5.

Сд -г

с, 1 кг/мл.

8 Iff 12

Изобретение относится к аналитической химии, в частности к спо- , собу фотометрич еского определения цистеина в водной среде,. Цель - повышение чувствительности способа. Определение ведут путем обрабОт ки анализируемой пробы концентрированной минеральной кислотой при кипячении. Полученньй раствор нейтрализуют, обрабатывают азотнокислой ртутью и спиртовым раствором 1-(хи- ноксалил-2 ) -З-метил-5 (ll -диметил-t аминофенил)-формазана и фотометри- руют. ОбрэГ Отку желательно проводить при рН 5,5-12,5. Чувствительность способа 0,32 мкг/мл. 1 з.п. ф-лы, 1 ил. ko о DO СО ел

Редактор В. Иванова

Составитель С. Хованская Техред Л.Олейник

Заказ 3388/42

Тираж 778

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

.Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Корректор М.Пожо

Подписное