Способ определения устойчивости растений к вирусным заболеваниям Советский патент 1987 года по МПК A01G7/00 

Изобретение относится к биологии, в частности к диагностике устойчивости растений к фитопатогенным поражениям, и может быть использовано в селекционной практике для отбора новых сортов растений на устойчивость к вирусной инфекции.

Целью изобретения является сокращение времени, трудозатрат и расхода материалов.

Способ осуществляется следующим образом.

Пример. Исследуют растения

лярограмму обескислороженного раствора в диапазоне потенциала от 0,8 до 1,5 Б относительно насыщенного каломельного электрода при комнатной температуре (18-25°С) со скоростью 0,5 В/мин на полярографе ОН-102 (ВНР) Скорость 0,5 В/мин подобрана экспериментально. Высоту полярографической волны В (мм) замеряют при потенциале от 1,5 до 1,4 В. Па раллельно с этим оставшуюся часть вытяжки помещают в кювету для оптических измерений и при длине волны 652 нм опретабака двух видов; Nicotiana tabacura, 5 деляют оптическую плотность А в отсортов Трапезонд-93 и Самсун 4-28, неустойчивых к вирусу табачной моза ики (ВТМ), сорта Самсун 3073, устойчивого к ВТМ, и Niconiana giutinosa, устойчивого к ВТМ, а также растения сои сорта Приморский 494, неустойчивого к вирусу мозаики сои (ВМС).

Растения выращивают до появления листьев четвертого яруса. Затем от растения отделяют листья 2-4 яруса, обрабатьшают их вытяжкой из системно пораженного ВТМ растения и помещают во влажную камеру (на 24-28 ч). Через 24-48 ч (до появления видимых симптомов заболевания) из зараженных листьев готовят вытяжку следующим образом: навеску 0,5 г зараженных листьев растирают в Ю.мл 96%-но- го этилового спирта, содержащего 0,05-0,2 моль LiCl (или другой нейтральной соли) в течение 2-3 мин при комнатной температуре (18-25 С). Концентрация соли ниже О ,,05 моль недостаточна для обеспечения электропроводности раствора при полярографических измерениях; повышение

.концентрации LiCi вьппе 0,2 моль приводит к изменению экстрагируемости липидных и белковых веществ из листьев .

Затем вытяжку фильтруют. После этого 3-5 мл вытяжки помещают в полярографическую ячейку и из раствора удаляют кислород продувкой инертным газом (азот, аргон или гелий) в течение 8-10 мин. Затем снимают поносительных единицах (Д.Холл, К.Рао. Фотосинтез.М.: Мир, 1983, с. 44) на спектрофотометре СФ-14.

В качестве контроля используют 20 вытяжки из здоровых растений. Для ко- торых также определяют высоту полярографической волны Bj. (в мм) и оптическую плотность А2 в относительных

единицах.

25

30

Измерив высоты полярографических волн (В, и В) и оптическую плотность (А, и А) вытяжек, рассчитьша- ют коэффициент устойчивости по уравнению

К

А2 В,

35

40

45

50

В.таблице приведены средние значения, рассчитанные из трех-пяти измерений.

Как видно из таблицы, значение К 7 1 для N.tabacum сортов Трапезонд- 93 и Самсун -4-28, что свидетельствует о том, что эти сорта неустойчивы к ВТМ, в то время как для сорта Самсун 3073 и N.giutinosa К 1, что свидетельствует о том, что данные растения устойчивы к ВТМ. Для сои сорта Приморский 494 К 1, что характеризует этот сорт как устойчивый к ВМС.

Эти данные по устойчивости различных сортов табака и сои к вирусНой инфекции соответствуют известным данным.

лярограмму обескислороженного раствора в диапазоне потенциала от 0,8 до 1,5 Б относительно насыщенного каломельного электрода при комнатной температуре (18-25°С) со скоростью 0,5 В/мин на полярографе ОН-102 (ВНР) Скорость 0,5 В/мин подобрана экспериментально. Высоту полярографической волны В (мм) замеряют при потенциале от 1,5 до 1,4 В. Па раллельно с этим оставшуюся часть вытяжки помещают в кювету для оптических измерений и при длине волны 652 нм определяют оптическую плотность А в относительных единицах (Д.Холл, К.Рао. Фотосинтез.М.: Мир, 1983, с. 44) на спектрофотометре СФ-14.

В качестве контроля используют 20 вытяжки из здоровых растений. Для ко- торых также определяют высоту полярографической волны Bj. (в мм) и оптическую плотность А2 в относительных

единицах.

25

30

Измерив высоты полярографических волн (В, и В) и оптическую плотность (А, и А) вытяжек, рассчитьша- ют коэффициент устойчивости по уравнению

К

А2 В,

35

40

45

50

В.таблице приведены средние значения, рассчитанные из трех-пяти измерений.

Как видно из таблицы, значение К 7 1 для N.tabacum сортов Трапезонд 93 и Самсун -4-28, что свидетельствует о том, что эти сорта неустойчивы к ВТМ, в то время как для сорта Самсун 3073 и N.giutinosa К 1, что свидетельствует о том, что данные растения устойчивы к ВТМ. Для сои сорта Приморский 494 К 1, что характеризует этот сорт как устойчивый к ВМС.

Эти данные по устойчивости различных сортов табака и сои к вирусНой инфекции соответствуют известным данным.

12889494

Определение коэффициента устойчивости растений к вирусным заболеваниям

85,5103

89,8

158

78,5

177,5

Редактор Е.Корина

Заказ 4938Тираж 627Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

-.«.-..-.-.-.-.-..----..- .- ---.----.-- -- -------- ---«--- - -- -- ---- ------------- -- -

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

71,5

77

1,12

75

68

0,96

81

82

1,11

Составитель И.Марченко Техред А.Кравчук

Корректор С.Черни