Способ оценки токсичности стоматологических сплавов Советский патент 1987 года по МПК A61B10/00 

Изобретение относится к медицине, а именно стоматологии, и может быть использовано при оценке токсичности новых стоматологических сплавов.

Цель изобретения - по вьш1ение точности оценки токсичности стоматологического сплава путем моделирования естественных условий введения пробы.

Способ осуществляется следуюпр- м образом.

Эксперименты проводились на б(1лых крысах линии Вистар одного возраста. Животных в количестве 30 особей для каждого параметра разбили на 3 группы по десять в каждой: 1) контрольную; 2) группу, принимавшей смыв со сплава КХС; 3) группу, принимавшей смыв со сплава хромированная КХС.

Бес всех животных в каждой группе в среднем составлял 3000 г. Были изготовлены образцы сплавов (КХС и хромированная КХС) с соответствующей площадью поверхности. В поилку экспериментальных групп наливают определенное количество воды, достаточное для питья в течение выбранного интервала времени, и опускают в нее изг.отовленньй образец испытываемого сплава. По истечении этого интервала времени наливают свежую порцию воды в том же количестве. В конце рабочего дня наливают воду, достаточную для питья в нерабочее время суток. В контрольной группе животные получ.ают в качестве питья обычную водопроводную воду.

Затравку животных проводят в течение 9 сут. Все группы животных находятся на обычном пищевом режиме вивария.

Начиная с 10-х сут, животных каждой группы декапитируют, извлекают печень, вьщеляют митохондрии (1). Сотав среды вьщеления, моль: сахароза 0,1, КС1 0,1; трис-буфер 2-10 Сое тав среды инкубации, в которой исследуются дыхание митохондрий, следующий: 0,1 моль сахарозы, 0,1 моль KClj 2 ммоль трис-буфер; фосфата, ротенон 0,5 мкг/мг белкаj бе- лок митохондрий 6-8 мг/нп среды инкубации. Исходные растворы АДФ (5 X ) , янтарной кислоты (5-10 мол

Как видно из табл. 2, у животных принимавншх смывы с хромированной КХС,- достоверно ниже дыхательный контроль по сравнению с контрольной группой, что свидетельствует о токсреды вьщеления и инкубации необходимо довести с помощью трис-буфера до 55 сичности сплава, У животных, прини- значений 7,5. Добавление АДФ и ян- мавших смывы с КХС, достоверно вы- тарной кислоты в инкубационную среду ше по сравнению с контрольной груп- производят в ходе эксперимента до пой как скорость окисления янтарной

to

15

20

25

50)

099622

концентрации 0,2-10 моль АДФ и 5 10 моль янтарной кислоты.

Определение белка проводят по Лоури и (2). Скорость дыхания митохондрий измеряют папярографическим методом и оценивают по скорости убыли кислорода в полярографической ячейке в МОл/мг белка мин. Степень сопряжения дыхания с фосфорилированием АТФ из АДФ и Ф(ДК) рассчитывают по отношению скорости окисления янтарной кислоты без АДФ в среде инкубации к скорости окисления янтарной кислоты после добавления АДФ (3).

Полученные данные для опьп-ной и контрольной группы подвергают статистической обработке и оценивают Достоверность отличий показаний опытной группы от контрольной.

Если скорость дыхания митохондрий и (или) степень сопряжения дыхания с фосфорилнрованием опытной группы достоверно ниже, а также если скорость дыхания ниже, а ДК не отличается от контрольной группы, сплав считают токсичным.

Примеры осуществления способа.

Пример 1. Площадь поверхности образцов сплавов составляла 90 мм (0,03 веса). Свежую порцию воды наливали в поилки через каждые 10 мин в количестве 3,3 мл.

Как видно из табл. 1, у животных принимавших смывы с хромированной 35 КХС, достоверно ниже дыхательный контроль по сравнению с животными контрольной группы, что свидетельствует о токсичности хромированной КХС.-Степень сопряжения дыхания с 40 фосфорилированием у животных, принимавших смывы с КХС достоверно выше, чем в контрольной группе, что свидетельствует об отсутствии токсичности этого сплава.

Пример 2. Площадь поверхности образцов сплавов составляла 180 tiM (0,06 веса) .Свежую порцию воды наливали в поилки через каждые 60 мин в количестве 20 мл.

Как видно из табл. 2, у животных, принимавншх смывы с хромированной КХС,- достоверно ниже дыхательный контроль по сравнению с контрольной группой, что свидетельствует о токсичности сплава, У животных, прини- мавших смывы с КХС, достоверно вы- ше по сравнению с контрольной груп- пой как скорость окисления янтарной

3

кислоты, так и степень сопряжения, что свидетельствует о нетоксичности сплава.

Пример 3. Площадь поверхности образцов сплавов составляла 270 мм2 (0,09 мм2/г веса). Свежая порция воды наливалась в поилки через каждые 120 мин в количестве 40

Как видно из табл. 3, у животных, 10 принимавших смывы с хромированной КХС, достоверно ниже степень сопряжения фосфорилирования с окислением янтарной кислоты по сравнению с контрольной группой, что свидетельствует f5 о токсичности сплава.

При данных параметрах способа, как и при двух предьщущих, у животных.

Формула изобретения Способ оценки токсичности стоматопринимавших смывы с КХС, достоверно выше по сравнению с контрольной груп-20 логических сплавов путем введения пой скорость окисления янтарной кис- пробы в организм животного и дальнейшей оценки скорости дыхания и степени сопряжения дыхания с фосфорилиро- ванием в митохондриях печени животного, отличающийся тем, что, с целью повьппения точности способа

лоты и степень сопряжения, что свидетельствует о нетоксичности сплава.

Оба эти сплава, как и другие из неблагородных металлов, применяются в стоматологии на протяжении многих лет при протезировании.

Существующие методы апробации, ко25

за счет моделирования естественных условий введения пробы, животным в течение не менее 10 дней перорально ввоза счет моделирования естественных ус ловий введения пробы, животным в течение не менее 10 дней перорально вво

торыми они были испытаны на токсичность, прежде чем разрешены для ис- 30дят воду в которую помещен испытуе- пользования в медицинских целях, немый сплав, при этом поверхность спла- показали отрицательных результатов.ва составляет 0,03-0,09 мм из расче- Однако многие пагщенты, протезирован-та на 1 г массы животного, а смену ные неблагородными металлами, жалуют-воцы осуществляют каждые 10-120 мин.

Таблица 1

0,152i3,1±0,30,2П1±4,0±0,2 0,139±2,2±0,2

0,0100,0340,02

Р 0,2Р 0,02 Р 0,6Р 0,02

ся на неприятные ощущения во рту, в желудочно-кишечном тракте.

Известные методы испытания на токсичность стоматологических сплавов не столь чувствительны и информативны по сравнению с предлагаемым, так как предлагаемый способ указал на неблагоприятные воздействия хромированной КХС на процессы метаболизма клетки.

Время, необходимое для проведения исследований по предлагаемому способу, составляет 15-20 дней, что в 4-14 j)a3 меньше по сравнению с существующими.

Формула изобретения Способ оценки токсичности стоматологических сплавов путем введения пробы в организм животного и дальнейшей оценки скорости дыхания и степени сопряжения дыхания с фосфорилиро- ванием в митохондриях печени животного, отличающийся тем, что, с целью повьппения точности способа

20

25

за счет моделирования естественных условий введения пробы, животным в течение не менее 10 дней перорально вводят воду в которую помещен испытуе- мый сплав, при этом поверхность спла- ва составляет 0,03-0,09 мм из расче- та на 1 г массы животного, а смену воцы осуществляют каждые 10-120 мин.

Составитель Л.Артюшина Редактор А.Долинич Техред А.Кравчук Корректор. Л.Пилипенко

Заказ 1816/2 Тираж 596Подписное

ВдаИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий ,113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул. Проектная, 4

Таблица 2

Таблица 3

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, предназначено для оценки токсичности новых стоматологических сплавов. Цель изобретения - повышение точности оценки токсичности стоматологического сплава. Для этого проводят эксперименты. Берут 3 группы подопытньрс животных (крыс) по 10 особей с массой по 3000 г: 1 контрольную, 2 группу, принимавшую смыв со сплава КХС 3 группу, принимавшую смыв со сплава хромированной КХС. В поилку экспериментальных групп напивают воду для питья и опускают в нее изготовленный образец сплава. По истечении . определенного времени наливают свежую воду в том же количестве, а в конце рабочего дня наливают воду для питья в нерабочее время суток. В контрольной группе крысы пьют обычную водопроводную воду. Затравку животных ведут 9 сут. Начиная с 10-х суток животных каждой группы декапи- тируют, вьделяют из печени митохондрии. Сос тав среды вьвделения, моль: сахароза 0,1; КС1 0,1 и трис-буфер 2 -10 . Состав среды инкубации, в которой исследуют дыхание митохондрий: 0,1 моль сахарозы, 0,1 моль КС1, 2 ммоль трис-буфера, 1 -10 моль фосфата, ротенон 0,5 мкг/мг белка, белок митохондрий 6-8 мг/мл среды инкубации. Степень сопряжения дыхания с фосфорилированием АТФ из АДФ и Ф(ДК) рассчитывают по отношению скорости окисления янтарной кислоты без АДФ в среде инкубации к скорости окисления янтарной кислоты после добавления АДФ. Скорость дыхания митохондрий измеряют полярографически по скорости убьши кислорода в полярографической ячейке в белка в 1 мин. Если скорость дыхания митохондрий и(или) степень сопряжения дыхания с фосфорилированием опытной группы ниже, а ДК не отличается от контрольной группы, сплав считают токсичным. 3 табл. (Л со со