Способ получения межвидовых гибридов первого поколения Советский патент 1987 года по МПК A01H1/02 

Изобретение относится к селекции растений и может быть использовано для получения исходного материала пр селекции луков.

Цель изобретения - повьшение выхода гибридов первого поколения.

П р и м е р. В 1982 и 1983 г луковицы материнских сортов лука репчатого были высажены в Пленочной теп- лице 17 и 26 апреля соответственно. Скрещивания проводились на сортах Штутгартен ризен, Ст ригуновский, Тимирязевский, Смена, начиная с второй декады до конца июля. В начале цвете ния соцветий проводили их индивидуальную изоляцию марлевыми изоляторами на каркасах. Когда на соцветиях одновременно распускалось достаточное количество цветков, проводили кастрацию. Кастировали цветки лука репчатого по мере их распускания утром и вечером с таким расчетом, чтобы на одном соцветии бьшо 40-50 цветков. Через 2-3 сут созревшие пестики в утренние часы опьшяли пьшьцой сли- зуна. Опыление повторяли через 24 ч.

Б период скрещивания и формирования семян материнские растения подвергают : оздействию экстремальных ус- ловий: колебания температур в течение суток от 10-15 ночью до 30-50 С днем что соответствует превьшению дневной температуры над ночной на 22-32 С, влажность воздуха от 85 до абсолютно- го значения. Эти условия создают в пленочной теплице путем регулирования вентиляции и влажности грунта. Подобные условия могут быть также созданы в климатических камерах. Параметры условий и результаты скрещивания по предлагаемому способу по сравнению с контролем показаны в таблице.

На 23-27 сут после опыления ере- зали соцветия и дальнейшую работу проводили стерильно в условиях ламинарного бокса. Завязавшиеся плоды (коробочки) снимали без плодоножки и чашечки, не нарушая целостности стенок завязки. Помещали плоды в марлевые мешочки по 10 щт. и стерилизовали в химических стаканах в течение нескольких секунд в 70%-ном этаноле, затем 5-8 мин в растворе 0,1%-ного диоцидн (целилпиридиния хлорид 666,6 мг/л и этанолмеркурихлорид 333,3 мг/л) с последующей промывкой в 3-4 порциях стерильной воды,. Стерильные плоды помещали в чашки Петри с влажной фильтровальной бумагой вскрывали их при помощи хирургическ игл и выделяли семена, которые пре- паривали под бинокуляром (8x2 или 12x1), Изолированные зародьш1и помещали на агаризованную питательную среду по прописи Dunstan, Short,197 Состав питательной среды, мг/л: .150 KNO,2530

320 230

(NH4)j.

MgSC. . 247

13,2 2,0

,

MnS04-4H O

ZnSO 7H5,0

KI

CoCl

,

2H,,0;

2H20

FeSO,,- 7H2.0

.IA-2E.,0

Никотиновая.

0,75 0,025 3,0 0,25 172

27,8

37,3

кислота1,0

Тиамин HCl 10,0

Пиридоксин HClIjO

2,4-Дихлорфенокси- уксусная кислота 0,28 Meso-unosum100

Сахароза 30000 Указанная среда модифицирована, ее состав дополнен фитогормонами - 6-бензиламинопурином (БАЛ) 0,1 мг/л и oi -нафтилуксусной кислотой ( исключена -2,4-Д, рН среды 5,6-6,2-, концентрация агара 0,7%. Стерилизаци среды проводилась автоклавированием в течение 15-20 мин при 0,7-0,8 атм. Зародьш1и культивировали в чашках Петри диаметром 5-6 -см, содержащих 5 мл среды. Культуру выдерживали при 25+1°С 2 сут в темноте до начала прорастания, затем выставляли на свет (3-6 тыс. лук) с фотопериодом 16 ч. На указанной среде через 7-10 дней 40-50% проростков достигали длины 2- 3 см, затем пересаживали их на жидкую питательную среду того же- состава, но со сниженным до 1%.уровнем сахарозы и фитогормонами БАПО,01 мг/ и НУК 0,2 мг/л. Данная среда стимулировала развитие корневой системы. С появлением 1-2 настоящих листьев через 2-3 недели растения из пробирок пересаживали в торфоперегнойные горшочки (10%), позднее в сосуды болшего размера. Весной растения высаживали в поле.

Б результате скрещивания завязывалось 6,62-8,7% гибридных семян. Только часть из них имели зародыши. Все зародьши бьши недоразвитыми: глобулярными или в стадии начала дифференциации. Последних было 45-60%, Такие зародьши при посадке на питатель- ную среду продолжали свою дифференциацию и развивались в растения.

Полученные в 1982 году 82 гибридных растения были оценены на основании хромосомного анализа в корешках и полевых наблюдений. Они отличались очень большим разнообразием, вариабельность отдельных признаков выходила за рамки видовой изменчивости. По числу хромосом 77% гибридов оказались триплоидными (2q-24)-. Имела место миксо- и анеуплодия. Часть растений проявляла явный гетерозис, другие, наоборот, имели четкие признаки

угнетения и бьши ослабленными, 84% растений имели антоциановую окраску нижних частей листьев разной интенсивности, не свойственную ни луку слизину, ни сортам лука репчатого, участвующим в скрещивании (скрещивали только сорта с желтоокрашенными луковицами), Число ветвей у гибридов у разных растений 2-11, число листьев на растении 9-149, диаметр ложной луковицы 3,5-34 мм, длина листьев

Температура воздуха. С день

средняя

лимиты

ночь

средняя

лимиты

Разница между дневными ночными температурами, средняя

лимиты

16-52 см, ширина 5-20 мм, у некоторых растений пластинка листа была толстой, желобявой, фасциированной, окраска листьев у разных растений бьта разнообразной: от светло- и желто- зеленой до темно-зеленой с оливковым оттенком и синевой.

Гибриды репчатого лука со слизу- ном перспективным как иммунные к вредоносным заболеваниям можно использовать в качестве исходного материала при селекции на устойчивость.

15 Формула изобретения

Способ получения межвидовых гибридов первого поколения Allium сера L X А. nutans L,, включающий выращивание материнских растений в искусственных условиях, проведение искусственного опыления в оптимальной фазе развития зрелой пыльцой лука слизуна, снятие гибридных семян до стадии начала дегенерации зародьшгей, вьщеле- ние последних из семян и дальнейшее выращивание их на искусственной пита- |тельной среде, отличающий- |с я тем, что, с целью повышения вы- Ьсода гибридов первого поколения, выращивание материнских растений в период скрещивания и формирования гиб

ридных семян осуществляют при температуре ночью 10-15°С, днем 30-50 0 и

25 влажности воздуха 80-100%,

24,0 19,9

18,2-27,514,3-21,0

13,9 -1,4

6,5-18,33,5-2,3

10,1 21,3

11,5-9,210,9-23,3

Влажность воздуха, средняя

Л1ЙО1ТЫ

Завязывание семян,

Доля дифференциаро зародьшей, %

.Редактор Н.Рогулич

Составитель Е.Шкрадюк

Техред В.Кадар Корректор В.Бутяга

Заказ 3991/4Тираж 627Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб,, д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул. Проектная, 4

в

Продолжение таблицы

0

66

150-78 1,01 0,47

25,70 37,50

26

35-22

В 8,6 раза В 13,2 раза

В 2,1 раза В 1,5 раза

Изобретение относится к области селекции растений и может быть использовано для получения исходного материала при селекции луков. Целью изобретения является.повьшеиие выхода гибридов первого поколения. Способ включает опыление пестиков кастрированных цветков А. сера в оптимальной фазе развития зрелой пыльцой А. nu- tans. В период скрещивания и формирования семян материнские растения подвергают воздействию экстремальных условий: колебания температур в течение суток от 10-15 ночью до 30-50 С днем, что соответствует превышению дневной температуры над ночной на 22-32 С, влажность воздуха рт 80 до абсолютного значения, на 23-27 сут после опыления изолируют зародыши-и- выращивают in vitro. 1 табл. о S (Л