Способ дифференциальной диагностики хронического гепатита у детей Советский патент 1988 года по МПК G01N33/48 A61B10/00 

Изобретение относится к области медицины, а именно к педиатрии.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Пример 1. Ребенок П.,8 лет В два года перенесла вирусный гепатит В. После выписки из стационара длительно сохранялись жалобы диспепза нуклеиновых кислот препараты переносят в этанол на 5-6 мин. Фиксированные препараты доводят до воды через серию спиртов понижающейся концентрации 96, 75, 50, 25%), после чего помещают в 0,2 М ацетатный буфер рН 4,2 на 2- 3 мин, В дальнейшем препараты окраши

Изобретение относится к медицине, точнее к педиатрии. Цель изобретения - повьшение точности способа. Для этого проводят поверхностную скарификацию кожи передней поверхности предплечья в верхней трети с целью определения содержания РНК в ядрах макрофагов. Скарификатором снимают слой эпидермиса до видимости петель капилляров. Скарифицированные участки покрывают стерильными стеклами. По содержанию РНК в препаратах клеток оценивают тяжесть поражения печени. S

тического, астено-вегетативного ха- , Ю вают в рабочем растворе акридина

рактера, гиперферментемия. G 5 лет диагносцирован хронический гепатит. При поступлении состояние средней тяжести, отмечались бледность, вялость, снижение аппетита, на коже проявления геморрагического синдрома в виде экхимозов,телеангиоэкта- зии и пальмарная эритема, гепатоме- галия (1,5-2 см ниже реберного края).

печень плотной консистенции. По дру- 20 препарат (отпечаток эксудата с макрогим органам патология не выявлена. В биохимическом анализе крови отмечалось незначительное увеличение тимоловой пробы - до 11,4 ед (при норме 4 ед.), на фоне нормальных показателей билирубина и ферментов. В общих анализах крови и мочи без патологии. В крови обнаруживался,HBS ,Ag, В иммунологическом статусе выявлено снижение показателей Т-лимфо- цитов: Т-акт. до 13% (норма 20,8%) Т-общ, до 34% (норма 69,8%), повышение уровня иммуноглобулинов Ip,G до 3000 мг% (при норме 1230 мг%), в пробе кожного окна снижение хемотаксиса макрофагов до 32% (при норме 75%),

С целью определения содержания РНК в ядрах.макрофагов проводят по25

фагальными клетками с второго скарифицированного участка кожи) инкубируют в растворе РНК-азы в течение 1,5 ч при 37 С, после этого проводят

окрашивание акридином оранжевым. Окрашенные препараты микроскопируют в люминесцентном микроскопе и флюоромет- рируют. Содержание РНК в данном примере 0,20 ед. Диагностируют хрони30 ческий пассивный гепатит.

Пример 2. Ребенок Т. 4 лет 11 мес., перенесла тяжелую форму ви- русного гепатита, после которого сохранялись патологические симптомы.

35 При поступлении со стояние ребенка средней тяжести, выражены: астения, снижение аппетита, печень плотная и выступает из-под реберного края на

4-5-с/З, селезенка пальпируется у верхностную скарификацию кожи перед- 40 реберного края, выслушивается систо- ней .поверхности предплечья в верхней лический шум. В крови обнаружен HBSAg, трети, предварительно обработанной g биохимическом анализе крови увели- .этиловым спиртом. Скарификатором сни- ,, д 29 ед, (норма до5ед.) мают слой эпидермиса в двух участках фруктозо-1-фосфат альдолазы до (размером 0,5x0,5 см) до видимости 45 8 ед. (норма до 3 ед.). Снижение петель капилляров (повреждение капил- протромбинового индекса до 64%, В иммунологическом статусе снижение Т-обш. лимфоцитов до 43% (норма 69,8%), хемотаксиса макрофагов до 35% (норма

ляров и кровотечение не допускаются), Скарифицированные участки покрывают двумя стерильными стеклами, которые

закрепляют лейкопластырем. Через 24 ч 50 75%). Содержание РНК макрофагов асепот начала реакции стекла снимают. Один из отпечатков после фиксации этанолом обрабатывают РНК-азой, йа- тем оба отпечатка фиксируют в смеси абсолютного этилового спирта и ледяной уксусной кислоты в соотношении 3:1 в течение 11-12 мин. Затем с целью удаления следов уксусной кислоты и предотвращения кислотного гидролиоранжевого 1:10000 в 0,2 М растворе ацетатного буфера рН 4,2. Время окрашивания 2 мин с последующей отмывкой в ацетатном буфере рН 4,.2 и диффе- ренцировкой в растворе акридина оранжевого с абсолютным спиртом 1:100000 в течение 20 с. После обработки препаратов РНК-азой РНК из ядер удаляется. Предварительно фиксированный

25

фагальными клетками с второго скарифицированного участка кожи) инкубируют в растворе РНК-азы в течение 1,5 ч при 37 С, после этого проводят

окрашивание акридином оранжевым. Окрашенные препараты микроскопируют в люминесцентном микроскопе и флюороме рируют. Содержание РНК в данном примере 0,20 ед. Диагностируют хрони30 ческий пассивный гепатит.

Пример 2. Ребенок Т. 4 лет 11 мес., перенесла тяжелую форму ви- русного гепатита, после которого сохранялись патологические симптомы.

35 При поступлении со стояние ребенка средней тяжести, выражены: астения, снижение аппетита, печень плотная и выступает из-под реберного края на

55

тической воспалительной реакции 0,15 ед. Диагноз: хронический агрессивный гепатит высокой степени активности. . .

Клиническая оценка текущего патологического процесса известным способом малосимптоматична в ряде случаев (как при персистирующем хрони.. 1

ческом гепатите, так и при активном хроническом гепатите), а также субъективна с точки зрения врача в оценке симптомов. Биохимические методы оценки текущего патологического процесса не дают в сравнении с предлагаемым способом, достаточной продолжительности прогноза, так как регистрируют лишь слабо выраженный синдром цитолиза в период высокой активности патологического процесса непосредственно в печени,.кроме того показатели биохимических тестов могут быть нормальными даже при активно текущем процессе в печени у больных с хроническим гепатитом.

Предлагаемый способ позволяет по содержанию РНК в препаратах кле368702

ток оценить тяжесть чени.

поражения пеФормула изобретения

Способ дифференциальной диагностики хронического гепатита у детей путем исследввания клеток, отличающийся тем, что с целью

повьшения точности способа, контактным методом получают препарат клеток макрофагов кожи, окрашивают акридиновым оранжевым на РНК, по содержанию которой определяют активность

процесса и при содержании РНК 0,19 +

0,03 ед. диагносцируют хронический пассивньй гепатит, а при содержании РНК 0,15iJlO,01 ед диагносцируют хронический активный гепатит.