Способ получения ( )-4-ди(н-пропил)амино-6-карбамоил-1,3,4,5-тетрагидробенз(с, @ )индола или его фармацевтически приемлемой соли Советский патент 1988 года по МПК C07D209/90 A61K31/404 A61P3/04 A61P25/00 A61P25/28 

Изобретение относится к гетероциклическим азотсодержащим соединениям, в частности к способу получения (±)-4-ди(н-пропил)амино-6-карба- моил-1-3,4,5-тетрагидробенз с, d индола формулы 1

СОМН2

.(

ш

или его фармацевтически приемлемой соли, которые являются антагонистами серотонина центральной нервной системы и могут быть использованы при лечении ожирения,ста рческого слабоумия и против курения.

Целью изобретения является разработка способа получения новых производных общей формулы 1, обладающих ценными фармакологическими свойствами.

Предлагаемое изобретение иллюстрируется следующими конкретными примерами получения исходного материала промежуточных соединений и конечных продуктов (отношения являются объемными, если вещества жидкие, и весовыми, -если вещества твердые).

Пример 1. Получение (±)-А- -ди(н-пропил)амино-6-бром-1,2,2а,3, 4,5-гексагидробенз с, d индола.

Смесь, содержащую 5,0 г 5-оксо-1, 2,2а,3,4,5-гексагидробенз fc, dj индола в 100 мл этанола, обрабатывают 1,63 г боргидрида натрия,вводимого отдельными порциями.Полученную смесь перемешивают примерно 4 ч, после чего из нее. в вакууме удаляют массу этанола. Полученный остаток разводят в воде и водную смесь подкисляют 3 М соляной кислотой.Водный раствор фильтруют и фильтрат обрабатывают разбавленным водным раствором едкого натра. Получаемый в реакции (±)-5-окси-1,2,2а,3„4,5-бенз c.d индол нерастворим в щелочной среде и выделяется в осадок. Осадок собирают, промывают водой и затем сушат. Получают 4,72 г (+)-5-оксид-1,2,2а, 3,4,5-гексагидробенз с, dj индола (93% выход). Методом тонкослойной хроматографии обнаруживают одно пятно, т. пл. продукта 205 С.

Вычислено, %: С 75,83; Н 6,94; N 8,04.

Найдено, %: С 75,75; Н 7,16; N 7,89.

Раствор 35 г (±)-5-окси-1,2,2а, - 3,4,5-гексагидробенз с, d индола в 900 мл холодной ледяной уксусной кислоты обрабатывают 22 г брома,растворенного в 100 мл ледяной уксусной кислоты. После исчезновения окрасO ки брома уксусную кислоту отгоняют в вакууме. Остаток,включающий смесь (±)-5-окси-6-бром-1,2,2а,3,4,5-тек- сагидробенз с, dj индола и соответствующего 6,8-дибром-производного

5 разбавляют водой и водную смесь подщелачивают 5 М водной гидроокисью натрия. Гексагидробенз с, d) индолы, нерастворимые в основании, осаждают и осадок собирают. Перекрис0 таллизация осадка из метанола дает примерно 3 г дибромпроизводного плюс примерно 12,5 г монобромпроиз- водного и значительное количество кристаллической фракции, которая

5 представляет собой смесь 1:1 исходного вещества и монобромпроизводно- го. Полученный таким путем (i)-5- -окси-6-бром-1,2,2а,3,4,5-гексагидробенз с, d3 индол имеет т. пл. при0 мерно (с разложением). Перекристаллизацией различных фракций получают 24,1 г (выход 47%) 6-бром- производного. Полученный продукт содержит еще небольшое количество ди- бромпримеси.

5

0

5

0

5

Реакционную смесь готовят растворением 27,43 г ()-5-окси-6-бром- -1,2,2а,3,4,5-гексагидробенз с, d индола в,100 мл пиридина и затем добавляют по каплям 25 мл этилового эфира хлормуравьиной кислоты в течение 20 мин. Добавляют примерно 0,5 г 4-(Н,К-диметиламино) пиридина .(ДМАП) и затем полученную реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре примерно в течение 4ч. Реакционную смесь затем охлаждают, выливая ее в 1 л смеси воды и льда. Масло, которое отделяют, практически немедленно переходит в кристаллическую форму. Кристаллы собирают и тщательно промывают водой.Высушенный амид сложного эфира представляет собой твердое вещество, имеющее .слабую розовую окраску, т.пл. продукта примерно 215 С (с разложением). Выход 40,48 г (94%). Анализом установлено, что в продукте в качестве

примеси содержится некоторое количество 6,8-дибромсоединения.

Осуществляют пиролиз 40,1 г (±)-1-этоксикарбонил-5-этоксикарбо- нилокси-6-бром-1,2,2а,3,4,5-гекса- гидробенз с, d индола в отдельных навесках (10 г). Пиролиз проводят при 215-220°С в атмосфере азота.Каждый опыт требует 25-30-минутного нагрева. Объединяют четыре темных маслянистых остатка и разводят в толуоле. Раствор в толуоле пропускают через хроматографическую колонку с силикагелем. Из фракций,содержащих исходный материал, извлекают 1,4 г этого материала, а основной продукт - 1-этоксикарбонил-6-бром-1,2, 2а,3ттетрагидробенз с, d индол перекристаллизовывают из смеси гек- сан-толуол, содержащей преимущественно гексан. Получают 19,36 г второй порции продукта только из гек- сана, выход 65% с поправкой на извлеченный исходный материал, т-пл. 122-123 с.

Вычислено,%: С 54,56; Н 4,58; N 4,55; Вг 25,93. Найдено, %: С 54,59; Н 4,61; N 4,41; Вг 25.84.

Ненасьпценный продукт из описанной стадии эпоксидируют следующим образом.

Раствор 7,5 1-этоксикарбонил-6- -бром-1,2,2а,3-тетрагидробенз с, d индола в 250 мл хлороформа охлаждают примерно до О С смесью лед - соль Добавляют 6 г 85%-ной метахлорпер- бензойной кислоты. Реакционную смесь перемешивают примерно при О С в течение 1 ч и затем выдерживают при температуре холодильника в течение ночи. Реакционную смесь промывают последовательно 1 н. водной гидре окисью натрия, насьш;енным водным раствором бисульфита натрия, вновь 1 н. водным едким натром и наконец рассолом. Органический раствор сушат и растворитель удаляют в вакууме.По- лученный твердый остаток перекристаллизовывают из смеси толуол-гексан. Первая порция получаемого материала 7,33 г, т.пл. 126-128°С; полный выхо (из двух порций) 98%.

Вычислено, %: С 51,8; Н 4,35; N 4,32; Вг 24,65.

Найдено, %: С 51,83; Н 11,33; N 4,16; Вг 24,31.

Раствор 7,5 г 1-этоксикарбонил- -4,5-эпокси-6-бром-1,2,2а,3,4,5-гек сагидробенз с, d индола, полученного ранее, в 50 мл бензола медленно добавляют к кипящему с обратным холодильником раствору 1 г йодида цинка в 450 мл бензола,который высушивют отгонкой 50 мл азеотропной смеси бензол-вода. Кипячение с обратным холодильником продолжают в атмосфере азота в течение 1 ч после того, как прекращают добавление. Реакционную смесь охлаждают.Всплывший слой декантируют и декантированный раствор промывают водой и затем рассолом. Раствор сущат и растворитель отгоняют в вакууме.Остаток,включающий 1-зтоксикарбонил-4-оксо-6-бром- -1,2,2а,3,4,5-гексагидробенз c, дол перекристаллизовывают из смеси то луол-гексан.Получают 5,36 г (71%) кристаллического продукта, т.пл. 186 188°С,

Вычислено, %: С 51,87; Н 4,35; N 4,32; Вг 24,65.

Найдено, %: С 51,75; Н 4,29; N 4,50; Вг 24,80.

Готовят реакционную смесь из 14 г 1-этоксикарбонил-4-оксо-6-бром- -1, 2-2а, 3,4,5-гексагидррбенз с, d индола, 28,3 г н-пропиламина, 4,9 мл ледяной уксусной кислоты и 300 мл ацетонитрила. Реакционную смесь перемешивают в атмосфере азота в течение примерно 1 ч. Для поглощения воды добавляют молекулярные сита 3 А Затем последовательно добавляют 5.6 г цианборгидрида натрия и 14 мл ледяной уксусной кислоты. Эту реакционную смесь перемешивают несколько часов и в течение этого времени добавляют 7 мл ледяной уксусной кислоты. Реакционную смесь перемешивают еще 2 ч и вновь добавляют ледяную уксусную кислоту в количестве 7 мл. Затем слой над молекулярными ситами декантируют и основную массу летучих загрязняющих веществ отгоняют в вакууме. Оставшийся раствор вливают в холодный водный 2 н. раствор едкого натра. Щелочную смесь экстрагируют метиленхлоридом. Экстракт промывают 0,5 н. водным раствором едкого натра, а затем рассолом. Растворитель отгоняют в вакууме.Полученный остаток растворяют в 1 н. водной соляной кислоте, к которой бьт добавлен метанол. Этот кислый раствор промыва

513

ют серным эфиром и серноэфирную промывочную жидкость сбрасывают. Кислый раствор затем подщелачивают 5 н. водным раствором едкого натра и нерастворимый в этой среде (+)-1- -этоксикарбонил-4-пропиламино-6-бром 1,2,2а,3,4,5-гексагидробенз с, d индол, который получают по указанной выше реакции, отделяют и экстра- гируют метиленхлоридом.Метилеихлорид ный экстракт отделяют и из него отгоняют растворитель, получая 16,7 г оранжевого масла, которое используют в следующей стадии без дополнительной очистки.

Полученный сырой продукт растворяют в 50 мл ацетонитрила, 3 мл н-пропилйодида и 2 мл диизопропил- этиламина. Этот раствор вьщерживают в темноте примерно три недели. Затем растворитель отгоняют при пониженном давлении и остаточную смесь разделяют между серным эфиром и 0,5 н. водным едким натром. Органический слой отделяют и водный щелочной слой экстрагируют несколько раз серным эфиром. Эфирные экстракты промывают рассолом и затем сушат. Серный эфир удаляют в вакууме. К полученному остатку добавляют ксилол и испаряют для удаления следов дии- зопропилэтиламина. Неочищенный остаток медленно кристаллизуется.Кристаллы растворяют в 20 мл метиленхлори- да и добавл5 ют 1 мл уксусного ангидрида. Спустя примерно 1 ч удаляют в вакууме летучие примеси и полученный остаток растворяют в метиленхло- риде. Метиленхлоридный раствор пе- ремешивают с водным насьпценным раствором карбоната натрия для удаления любого избытка уксусного ангидрида. Отделяют Метиленхлоридный слой и

ривают в вакууме и остаток хромато- графируют через силикагель,используя в качестве элюирующего растворителя этилацетат. Фракции, содержащие целевой материал, объединяют и из них отгоняют в вакууме растворитель.Белый кристаллический остаток переносят на фильтровальную бумагу, используя холодный изооктан.Полный выход (+)-1-этоксикарбонил-4-ди(н- пропил)амино-6-бром-1,2,2а,3,4,5- гексагидробенз с, d индола составляет 2,39 г и получают в двух порциях, т. пл. 90-94°С.

Вычислено, %: С 58,68; Н 7,14;

N

6,84; Вг 19,52. Найдено, %: С 58,98; Н 6,88;

0

5

0

5

0

N 6,59; Вг 18,74.

Альтернативно раствор 15,7 г сырого вторичного амина.

(±)-1-Этоксикарбонил-4-(н-про- пил)амино-6-бром-1,2,2а-3,4,5-гекса- гидробенз с, d индола в 80 мл пиридина охлаждают примерно до 0°С. Медленно добавляют 16 мл пропионо- вого ангидрида. Раствор вьодерткивают ночь при комнатной температуре. Основную массу растворителя - пиридина отгоняют в вакууме и остаток раствора перемешивают с избытком-водного раствора карбоната натрия в течение нескольких часов, чем обеспечивают полное удаление непрореагировавшего пропионового ангидрида и некоторого количества побочно образующейся пропионо.вой кислоты. Водную смесь экстрагируют мителенхлоридом, отделяют Метиленхлоридный экстракт и промывают 0,5 М водным раствором гидроокиси натрия, 1 н. раствором соляной кислоты и рассолом. Органический раствор сушат, растворитель отгоняют в вакууме и получают в

Изобретение касается производных , d -индолов, в частности получения (±)-4-ди(н-пропил)амино-6-карбамоил-1,3,4,5-тетрагидробенз с , d индола или его фармацевтически приемлемой соли, которые являются антагонистами серотонина центральной нервной системы и могут быть использованы при лечении ожирения, старческого слабоумия и против курения. Цель - создание новых активных веществ указанного класса. Синтез ведут гидролизом цианпроизводного гидроокисью калия в среде трет-бута- нола в атмосфере азота в присутствии диметилсульфоксида с выделением целевого продукта хроматографическим разделением, при необходимости переводят продукт в фармацевтически приемлемую соль кислоты. Испытания показывают, что новые соединения малотоксичны и более эффективны, чем известный (±)-4-диметиламино-1,3,4,5- -тетрагидробенз с, d} индол.2 табл. U)

отгоняют метиленхлорид. Остаток раст-д5 остатке вязкое масло. Масло растворяют в 50 л тетрагидрофурана и этот раствор добавляют в течение примерно 15 мин к 85 мл 1 н. раствора диборана в тетрагидрофуране, который поддерживают примерно при О С. После завершения добавления охлаждающую ванну удаляют и реакционную смесь нагревают до температуры кипения с обратным холодильником в течение примерно 1,5 ч.Затем реакционную смесь охлаждают примерно до О С и осторожно добавляют 50 мл метанола. Полученную реакционную массу перемешивают при комнатной

воряют в смеси разбавленной соляной кислоты и метанола. Полученный мутный раствор промывают серным эфиром и эфир сбрасывают. Кислый слой переводят в щелочной, до бавляя 5 н. вод-т ный раствор едкого натра. Получаемое нерастворимое основание, которое отделяют, экстрагируют метиленхлоридом. После выпаривания растворителя получают влажный кристаллический остаток. Остаток обрабатывают гексаном и гек- сановый раствор отделяют от нерастворимого в гексане коричневого масла путем декантирования. Гексан выпаостатке вязкое масло. Масло раство

ряют в 50 л тетрагидрофурана и этот раствор добавляют в течение примерно 15 мин к 85 мл 1 н. раствора диборана в тетрагидрофуране, который поддерживают примерно при О С. После завершения добавления охлаждающую ванну удаляют и реакционную смесь нагревают до температуры кипения с обратным холодильником в течение примерно 1,5 ч.Затем реакционную смесь охлаждают примерно до О С и осторожно добавляют 50 мл метанола. Полученную реакционную массу перемешивают при комнатной

71

температуре в течение ночи.Метано отгоняют в вакууме.Вновь добавляют метанол и вновь его выпаривают. Полученный остаток начинает отверж- даться. Полутвердый остаток распределяют между серным эфиром и 1 М соляной кислотой, содержащей метанол. В результате этой процедуры в осадок выделяется твердое вещество которое отфильтровывают. Фильтрат подщелачивают добавлением водной гидроокиси натрия и щелочную смесь экстрагируют метилен5слоридом. Полученный вьппе эфирный слой, метилен- хлоридный экстракт и отделенное твердое вещество объединяют и отгоняют растворитель. Остаток нагревают с влажным диметилсульфоксидом и этот р аствор затем разбавляют водой с достаточным количеством 1 М водного раствора едкого натра, при котором обеспечивается щелочная среда. Щелочную смесь экстрагируют серным эфиром. Эфирный экстракт, в свою оче- редь, экстрагируют 1 М соляной кислотой, -содержащей некоторое количество метанола. Кислый экстракт вновь Делают щелочным и полученную щелочную смесь экстрагируют метиленхло- РИДОМ. Метиленхлоридные экстракты объединяют.После испарения растворителя получают 15,49 г сырого оранжево-розового соединения.Твердое вещество растворяют в этилацетате и хроматографйруют череэ силикагель. Фракции, содержащие целевой материал объединяют и растворитель отгоняют в вакууме. Перекристаллизацией твердого вещества из изооктана получают (+)-1-этоксикарбонил-4-ди(н-пропил) амино-6-бром-1,2,2а,3,4,5-гексагидро бенз с, d индол, т.пл. 87-89°С. Выход продукта 14,8 г (94%).

Раствор 1 г указанного вьте тр.:- тичного амина в 10 мл 6 н. соляной кислоты выдерживают при температуре кипения с обратным холодильником в течение 8 ч.Методом тонкослойной хроматографии устанавливают присутствие только остаточных (следы) количеств исходного материала и определяют, что основным веществом явг ляется (±)-4-ди(н-пропил)амино-6- бром-1,2,2а,3,4,Зггексагидробенз с, d индол. Кислый раствор выливают в разбавленный водный раствор едкого натра и получаемый щелочной слой экстрагируют хлористым метиле-

ю j 20 5 зо Q

.

5

0

288

ном. Метиленхлоридный экстракт отделяют, промывают рассолом и затем сушат. Испарением растворителя получают вязкое масло, которое кристаллизуется при -Охлаждении. Перекристаллизацией осадка из изЬоктана получают 0,683 г (выход 83%) (±)- -4-ди(н-пропил)амино-6-бром-1,2,2а, 3,4,5-гексагидробенз с, d индола, т.пл. примерно 62-63°С.

Вычислено, %: С 60,53; Н 7,47; N 8,319; Вг 23,69.

Найдено, %: С 60,71; Н 7,57; N 8,30; Вг 23,78.

Пример 2. Синтез (+)-4-ди- -(н- пропил) амино-6-бром-1,2,3,4,- тетрагидробенз с, а индола.

Охлаждают примерно до О С суспензию 0,44 г N-хлорсукцинимида в 16 мл толуола. Добавляют 0,3 мл диметил- сульфида. Через 15 мин реакционную смесь охлаждают в ацетоновой бане с сухим льдом примерно до -60 С. Добавляют в течение 15 мин 0,6 г (ч-) -4- (ди-н-пропил) амино-6-бром-1, 2,2а,3,4,5-гексагидробенз с, dj индола, приготовленного по примеру 1, и 2 мл толуола. Реакционную массу перемешивают примерно при в течение 2 ч и одновременно добавляют 0,8 мл триэтиламина. Удаляют охлаждающую баню и перемешивание продолжают в течение примерно 2,5 ч при температуре окружающей среды. Реакционную смесь затем выливают в холодный водный 1 н. едкий натр и полученную щелочную смесь экстрагируют несколько раз толуолом.Толу- ольные экстракты объединяют, объединенные экстракты промывают рассолом и затем сушат. Растворитель отгоняют и полученный остаток хроматографйруют на 15 г флоризила, используя смесь этилацетат-толуол (1:9). Фракции, содержание целевой продукт, объединяют и вновь пропускают через хроматографическую колонку с силикагелем,используя тот же элюент.Фракции, содержащие целевой продукт, вновь объединяют и растворитель отгоняют, получая зеленоватое масло. Это масло растворяют в примерно.20 мл пентана и фильтруют для удаления бесцветного осадка.Затем пентан удаляют путем испарения в вакууме. Получают желто-зеленое масло (0,303 г, 51%), содержащее (н:)-4-ди( н-пропил )амино-6-бром-1, J

3,4,5-тетрагидробенз с, d индол, который образовался при окислении. Продукт кристаллизуется при стоянии т.пл. 72-73 0.

Вычислено, %: С 60,90; Н 6,91; N 8,36; Вг 23,83.

Найдено, %: С 60,77; Н 6,87; N 8,28; Вг 23,61.

П р и м е р 3. Синтез (±)-А-ди (н-пропил)амино-6-бром-1,3,4,5-тет- рагидробенз с, d индoлa.

Готовят раствор 1 г (+)-4-ди-(н- -пропил)амино-6-бром-1,2,2а,3,4,5- -гексагидробенз с, ё индола, приго- товленного в соответствии с примером 1, в 50 мл гексана. Добавляют 4 г активированной двуокиси марганца и полученную суспензию обрабатывают ультразвуком с частотой 50-55 кГц в атмосфере азота в течение примерно 1 ч. Тонкослойная хроматография к этому моменту показывает почти полное отсутствие исходного материала. Реакционную смесь фильтруют под разрежением и полученный осадок диоксида марганца тщательно промывают свежим гексаном. Гексан удаляют из фильтрата и полученный остаток хро- матографируют, как прежде. Фракции, содержащие целевой индол, объединяют и растворитель удаляют выпариванием. Перекристаллизацией полученного осадка из изооктана получают 0,62 г (выход 62%) (±)-4-ди(н-пропил амино-6-бром-1,3,4,5-тетрагидробенз с, д индола, т.пл. 73-74 С.

Пример 3.Синтез (+)-4-ди(н- -пропил)амино-6-циано-1,3,4,5-тетрагидробенз с, ё индола.

Готовят раствор, растворителя 0,7 г цианида меди (I) в 10 мл N-ме- тил-2-пирролидона, предварительно отдутого азотом. К раствору цианида меди добавляют 1 г (+)-4-ди(н-пропил) амино-6-бром-1,3,4,5-тетрагидробенз с, d индола. Раствор выдерживают в атмосфере азота при 200 С в течени 1 ч.Затем реакционную смесь охлаждают и распределяют между этилацета- том и разбавленной водной гидроокисью аммония. Щелочной слой несколько раз экстрагируют этилацетатом.Этил- ацетатные слои объединяют и последовательно промывают разбавленной водой гидроокисью аммония, разбавленным водным этилендиамином и рассолом Затем этилацетатный слой-сушат и расворитель отгоняют. Остаточное масло

0

20

25

5

дд 30

35

40

растворяют в серном эфире, полученный раствор дважды промывают рассолом. Эфирный слой отделяют и эфир отгоняют в вакууме.Остаток затем растворяют в эфире, эфир разбавляют несколькими объемами петролейного эфира. Всплывающий слой декантируют, темное остаточное масло вновь обрабатывают смесью эфира и петролейного эфира. Объединенные всплывшие слои упаривают, получая в остатке вязкое оранжевое масло. Полученный остаток хроматографируют через силикагель, используя в качестве элюента смесь (1:10) .этилацетата и толуола, получают фракции, содержащие целевой (±)4-ди(н-пропил)амино-6-циано-1, 3,4,5-тетрагидробенз с, д индол,синтезированный в предыдущей реакции. Перекристаллизацией твердого вещества из смеси толуол - гексан получают кристаллический материал, т.пл. 132- 133°С. Выходу 44%.

Вычислено, %: С 76,83; Н 8,24; N 14,83. :Найдено, %: С 76,56; Н 8,09; N 14,86.

Пример 4. Синтез ()-4-(н- -пропил)амино-6-карбамоил-1,3, 4-5- -тетрагидробенз c,d jиндола.

Примерно- 1,5 г порошкообразной гидроокиси калия суспендируют в 10 мл перегнанного трет-бутанола и О,3 мл диметилсульфоксида. Добавляют 0,3 г (±)-4-ди(н-пропил)амино- -6-циано-1-,3,4,5 -тетрагидробенз с, djиндола.Смесь кипятят с обратным холодильником в атмосфере азота в течение примерно 72 ч. К этому моменту тонкослойная хроматография показывает, что реакция проходит частично.Кипячение с обратным холодильником продолжают еще 24 ч. Затем реакцию прекращают добавлением холодной воды и водную смесь экстрагируют метиленхлоридом. Органический слой отделяют, промывают рассо- и затем сушат. Выпариванием раст- вррителя получают остаток, который хроматографируют через флоризил, используя в качестве элюента этилаце- тат с содержанием метанола вплоть до 10%. Исходный материал элюируют смесью метанол - этилацетат (5:95) и целевой продукт (±)-4-ди(н-пропил) амино-6-карбамоил-1,3,4,5-тетрагидробенз с, d индoл элюируют смесью метанол - этилацетат (10:90).Получают 0,14 г продукта и примерно 0,17 г исходного материала.Извлеченный исходный материал обрабатывают как описано вьпие, порошкообразным едким калием в трет-бутаноле и диме- тилсульфоксиде. Вторую гидратацион- ную смесь нагревают до кипения с обратным холодильником в течение примерно,четырех дней. Реакцию прек ращают добавлением холодной воды , но тонкослойная хроматография показывает, что гидратация не завершается. Масса 6-карбамоилпроизводного, полученного из второго опыта, равна примерно 0,5 г. Извлеченный исходный материал обрабатывают, как и прежде, и кипятят с обратным холодильником с основанием в течение примерно одной недели. В результате получают дополнительное количество 6-карбамоилпроизводного. Все фракции, содержащие (±)-4-ди(н-пропил)амин6-6-кар- бамоил-1,3,4,5-тетрагидробенз с, d индол, объединяют,хроматографируют через флоризил, используя этилаце- тат,а затем смесь (1:1) метанола и этилацетата в качестве элюента. Исходный материал элюируют этилаце- татом.Вьщеленный (±.)-4-ди(н-пропил) амино-6-карбамоил-1,3,4,5-тетрагидро бенз c,d индол после перекристаллизации сначала из смеси толуола и гекса на,а затем из толуола имеет т.пл. 163- 165°С. Выход 54%.

N

С 72,21; Н 8,42; 8,27;

Н

40

Вычислено, 14,03.

Найдено, %: С 72,23; N 13,57.

И р и М е р 5. Получение 4-диме- тиламино-6-карбамоил-1,3, 4,5ттетра- гидробенз с, d индол цитрата.

100 мг 4-диметиламино-6-карбамоил-1,3,4,5-тетрагидробенз c, ., следующие: серотонин (Амершам, 11

Кю/ммоль), 2-3 нМ; ЛСД (Амершам, 1,8 Кю/ммоль), 1,8-2,6 нМ; спиперон (Амершам, 20 Кю/ммоль), 0,6-0,7 нМ.

и Н-спиперона в 10 М ЛСД. Специфическое связующее подсчитывают как разность между кол чеством связукщего без добавленного нерадиоактивного соединения и неспе цифическим связующим. Определяют ICjg ,т.е. количество вещества, выз вающего 50%-ное подавление специфического связующего, используя 12 концентраций в диапазоне 10 . Концентрации Н-лигандов

дола растворяют в небольшом количестве этилацетата и медленно добавляют при. перемешивании раствор 71 мг лимонной кислоты (моногидрат) в 10 мл этилацетата. Полученный осадок отделяют и сушат при 50 С при давлении 0,07 мм рт.ст. в течение ночи.

Выход 151 мг (92%)..

Вычислено, %: С 58,64; Н 6,77; N 8,55.

Найдено, %: С 58.,50; Н 6,94; N 8,34.

Центральное серотонергическое действие соединения I.

50

55

Полученные результаты сведены в табл. 1 I,

Определение активности централь- ,кого серотонинного агониста, а также допаминового агониста по изменению количества метаболитов серотони на в головном мозге и допаминовых метаболитов соответственно.

Крысам вида Вистар весом 150- 200 г подкожно вводят (±)-4-ди(и20 5 о

Подавление поглощения меченого серотонина..

Мозговое вещество берут от крыс- самцов вида Вистар весом 150-200 г. Иссекают кору головного мозга и затем гомогенизируют и центрифугируют, используя предварительную инкубацию в буфере без добавления ингибитора фермента моноаминоксидазы, с тем, чтобы подавить эндогенный серото- нин. Для связывания рецепторов каждый образец содержит 300-400 мкг белка мембраны и 10 мкг паргилина в добайок в Н-лиганду в 1 мл 0,05 М трис-буфера, рН 7,4.Анализ связующего серотонина осуществляют в соответствии с методом Беннета и Снидера, анализ меченного спиперона в соответствии с методом Пероутка и Снидера. Образцы выдерживают в течение 15 мин при 37°С и затем фильтруют через GF/C стеклянную волокнистую фильтровую подушку, используя Врендел М-24 клеточный аппарат,модифицированный для связующего рецепторов. После двух ополаскиваний (по 5 мл) фильтровые диски помещают в сцинтил- ляционные пробирки и измерения проводят в 10 МП сцинтилляционной среды Амерсам PCS. Неспецифическое связующее Н-серотонина ( н-5НТ) опреде- в присутствии 10 М серотонина присутствии

5

0

, следующие: серотонин (Амершам, 11

ляют

и Н-спиперона в 10 М ЛСД. Специфическое связующее подсчитывают как разность между количеством связукщего без добавленного нерадиоактивного соединения и неспецифическим связующим. Определяют ICjg ,т.е. количество вещества, вызывающего 50%-ное подавление специфического связующего, используя 12 концентраций в диапазоне 10 . Концентрации Н-лигандов

Полученные результаты сведены в табл. 1 I,

Определение активности централь- кого серотонинного агониста, а также допаминового агониста по изменению количества метаболитов серотонина в головном мозге и допаминовых метаболитов соответственно.

Крысам вида Вистар весом 150- 200 г подкожно вводят (±)-4-ди(и1313

-пропил)амино-6- замещенный тетра- гидробенз с, ё индол (0,3 мг/кг). Затем спустя 60 мин каждую крысу обезглавливают и иссекают гипотала- мус и стриатум и экстрагируют.Методом высокоэффективной жидкостной хроматографии определяют количество гомованилиновой кислоты (ГВК) и 3,4-диоксифенилуксусной кислоты (ДОФУК) в стриатуме и 5-оксииндол- уксусной кислоты (5-ОИУК) в гипоталамусе, используя при этом электрохимическое детектирование..Измеряют также кортикостероиды сыворотки.

Результаты приведены в табл. 2.

Соединение I не показывает значительной активности как агонист допа- мина, однако в отличие от цианосоеди нения обнаруживает значительную ак- тивность как агонист серотонина при одинаковых дозировках.

Соединение 1 можно вводить парентерально в виде изотонического раствора фармацевтически приемлемой соли Предпочтительно пероральное введение при каждой схеме лечения лекарства смешиваются с одним или несколькими фармацевтическими наполнителями и загружаются в пустые желатиновые капсулы или прессуются в виде таблеток, причем каждая таблетка или капсула содержит разовую дозу антидепрессанта.

Формула изобрет е н и я

Способ получения (+)-4-ди(н-про- пил)амино-6-карбамоил-1,3,4,5-тетра- гидробенз с, d формулы 1

.

.Ъ1(СН2СН2.СН5

14

или его фармацевтически приемлемой соли, отличающийся тем, что (+)-4-ди(н-пропил)амино-6-циано- -1,3,4,5-тетрагидробенз с, d индoл формулы

.CN

.КСНгСН2СНз)

HN

подвергают гидролизу гидроокисью калия в среде трет-бутанола в атмосфере азота в присутствии диметилсуль- фоксида.с выделением целевого продукта хроматографическим разделением и при необходимости переводят в фармацевтически приемлемую соль кислоты.

Таблица 1

(±)-4-Ди(н-про- пил)амино-6- -аминокарбо- нил-1,3,4,5-тетрагидробензс, d индол60 4980

(+)-4-Ди(н-про- пил)амино-6-циано-1,3,4,5- -тетрагидробенз

с, d индoл 90 390

(±)-4-Диметиламино-1,3,4,5-тетрагидробенз

с, d индoл120730

15

II

2,34+0,07 А,25+0,25 2,27±0,16 47 t 4

I 1,58+0,03 6,23±0,56 4,12+0,27 49 + 2

Контроль 2,59+0,11

5,58+0,38 4,24+0,27

Статические величинь.

1375128

16 Таблица2

7 + 1