Способ диагностики ревматизма путем выявления ревматического анамнеза Советский патент 1990 года по МПК G01N33/48 

1i:}

Ипобрртение относится к медицине, а именно к иммунологическим способам диат ностики и прогноэировамня рен- мати зма.

Целью изобретения является выявление ранних доклинических стадий ревматизма и повышение точности способа .

Выявление ранних доклинических стадий ревматизма и пoвьпlIe иe точности способа диагностики ревматизма обеспечивается за счет выявления ранее неизвестных ассоциаций НЬЛ-анти- генов,

Пример 1. М., 11 лет, ученица школы. Во время профилактического осмотра выявлен очаг инфекции (хронический тонзиллит), частые заболевания верхних дыхательных путей,

У обследуемой внутривенно забирают кровь 2,5-3 мл, которую дсфибри- нируют и разводят в 1,5-2 раза забу- ференным физиологическим раствором (ЗФР, рН 7,2-7,4). Далее методом фло тации на градиенте плотности фиколл- верографина (,077 .г/см ) при режиме центрифугирования 400q в течение 40 мин выделяют мононуклеарные клетки (МНК), МНК собирают с интер- фазы и oт D lвaют трижды ЗФР. Клетки рссуспендируют в 1 мл среды 1 99 и счи- fareT в камере Г оряепа, Концентрацию МНК доводят до 2-4 тыс. в 1 мкл.

НЪЛ-(}зенотип определяют в стандартном микропимфоцитотоксическом тесте с использованием набора из 92 тестовых анти-НЬЛ-с)1вороток против 23 антгенов I класса НЬЛ комплекса. Коммерческие наборы TCCT-CbfBopoTOK для Н1;Л-типиропания производит РЩ1ТТ Ле- нингрядскогс НИИ гематологии и пере- липания кропи и пр. Учет реакции фе- нотипиропания проводят под микроскопом при 100-150 увеличении. Для авто

матического учета результатов реакции используют микроскоп-фотометр MFV- corapact МТ ,1 Zeifz. Окончательный (}1енотип определяют с помощью спе- цилл1 ноГ| матрицы, прилагаемой к каждой тост-панели и с учетом кросс- реагироиапия некоторых антигенов. Проведено Н .Л-фонотипирование: Л1, 10/В5, 12. 1г)гкольку выявлено сочетание ан- тигенон Л1, 10, прогнозируется вероятное рп:и1 1ти1 ревматизма. Рекоменду ется лис г..) игорное наблюдение и про- мслсниг: пгриичпой гфофилактики ревмаTiriMA .

-5

JQ 5

20

25 ЗО

, 45

50

55

12

Пример 2. Я., 21 год, студент. Во время профилактического осмотра выявлен хронический тонзиллит, частые респираторные инфекции. Проведено НЬА-фенотипиройание: А2,10/ВЗЗ, 40. Поскольку выявлено сочетание антигенов А10/В40, прогнозируется вероятное развитие ревматизма. Рекомендуется диспансерное наблюдение и проведение первичной профилактики ревматизма.

Пример 3. П., 9 лет, ученица школы. Во время профилактического осмотра выявлено, что v девочки отмечаются частые распиратор1тые инфекции, а ее сестра, 17 лет, больна ревматизмом. Проведено HLA-фенотипирование: А9,11/88,17. Поскольку выявлено сочетание антигенов А11/Б8, прогнозируется вероятное развитие ревматизма. Рекомендуется диспансерное наблюдение и проведение первичной профилактики ревматизма.

Пример 4.М., 16 лет, ученица школы. Во время профилактического осмотра выявлен хронический тонзиллит, частые обострения хронического ринита. Проведено HLA-фенотипиропание: A3, 28/В5,35. Поскольку выявлено сочетание антигенов В5, 35, прогнозируется вероятное развитие ревматизма. Реко- ме1 дуется диспансерное наблюдение и проведение первичной профилактики ревматизма.

Пример 5. Жалобы на слабость, одьппку, сердцебиение, боли в области сердца и левого коленного сустава. В анамнезе частые ангины. Объективно: на основании диагностических критериев ревмлтизма - характерного начала заболевания, признаков кардита и полиартрита предположен диат ноз ревматизма (рерматизм вероятный). Производят HLA-фенотипиропание: А1,11/В8, 13. Поскоп1,ку выявлено сочетание антигенов А11/В8, поставлен диагноз: репматизм определе1И1ый.

Пример 6. Боль)1ая С., 41 год. По данным анамнеза больна с 30 лет, когда после ангины д,чительное время сохранялась субфрПриальная температура, слабость, сердцебиение, артрал- гии. Пред7)Я 1Ляет жалобы на рг;зкую слабость, одышку з покое, боли в области сердца. Об1И ктпино на основании диагностичсгких крш ориов: ревматического ПИЛМНГ-1Л и пришлков кар- Л1Г1 а 11родпо;1(1ж(. 11 iM i .i,i rinvi (ревма

тизм вероятный). Произведено ИЬА-фе- нотипнрование: А2, 10/85,40. Поскольку выявлено сочетание антигенов Л10/В60, поставлен диагноз: ревматизм определенный.

Пример 7. Вольная Е., 9 лет Поступила с жалобами на Г5оли в коленных суставах, одышку и сердцебиение, которые усилились вслед за перене- . сенной носоглоточной инфекцией. Объективно на основаяин диагностических критериев ревматизма: характерного начала заболевания, признаков кардита и полиартрита предположен ревматизм (ревматизм вероятный). Произведено НЪЛ-фенотипирование: А2,3/В12 18. Поскольку выявлено сочетание антигенов А2,3 и АЗ/В12, поставлен дианоз: ревматизм определенный.

Пример 8. Больная К., 37 лет По данным анамнеза заболела два года назад, когда после очередного обострения хронического тонзиллита длительное время сохранялась слабость, субфебриллитет, появились и нарастали боли в области сердца, беспокоили сердцебиения и одышка. В настоящее время предъявляет аналогичные жалобы. Объективно на основании диагностических критериев ревматизма:- ревматического анамнеза, характерного начала заболевания и признаков кар

5

л n

5

О

дита предположен репматизм (реяма- тизм вероятньм). 11рии:и)едсм111 И1.Л- фенотипирование: А2, 9/Н5, 3S . Пог.кипь- ку выявлено сочетание лмтштнов , 35, поставлен диагноз: рпнмлтитм определенный.

Предлагаемый способ диагмостики ревматизма повысит диагностическую точность до 99-100%. Высокая на- « дежность метода определяется генетическими факторами, которые трактуются однозначно и не зависят от формы, активности, характера течения заболевания. Способ позволяет выявлять ранние доклинические сталии ревматизма.

Формула изобретения

Способ диагностики ревматизма, путем выявления ревматического анам- иеза, отличающийся тем, что, с целью выявления рашпгх доклинических стадий ревматизма и повышения точности способа, определяют ассоциации антигенов 1 клас:-а HLA комплекса и при наличии по крайней мере одного из комплексов А2,В7, А10,,10; B7,8v A1,P.8,A2,3i АЗВ17 у людей до 13 лет и Л9,10, А10,В4 и В5,35 у людей после 15 лет прогнозируют ревматизм.

Изобретение относится к меди1у1- не, а именно к иммунологическим способам прогнозирования и диагностики заболеваний, в частности ревматизма. Целью изобретения является выявление ранних доклинических стадий ревматизма и повышения точности способа. Способ осуществляют следующим образом. У обследуемых лиц из крови выделяют мононуклеарные клетки (МНК), ресус- пендируют их в 1 мл среды 199 и считают в камере Горяева, концентрацию МНК доводят до 2-4 тыс. 1 мкл и определяют HLA-фенотип и при наличии определенной ассоциации антигенов 1 класса комплекса диагностируют ревматизм.