Способ определения атретических изменений в ооцитах из полостных фолликулов яичников крупного рогатого скота Советский патент 1988 года по МПК A61D7/02 

со

00 05

00 со

Изобретение относится к биологии размножения и может использоваться при изучении оогенеза, а также при разработке методов культивирования и оплодотворения in vitro ооцитов из п6лостнь1Х фолликулов яичника с целью получения эмбрионов ранних стадий.

Целью изобретения является ускорение и упрощение способа при сохранении ооцитов жизнеспособными.

Пример. Проводились опыты по определению атретических изменений в ооцитах из полостных фолликулов яичников коров чернопестрой породы. .

Ооциты, окруженные клетками яйценосного бугорка, вьщеляют из полостных фолликулов яичника путем разрезания их стенок. Затем под микро- скопом от каждого ооцита при помощи двух заточенных препаровальных игл отделяют фрагмент яйценосного бугорка, помещают его на 3 мин в 0,8%-ный гипотонический раствор цитрата натрия, затем переносят с минимсшьным количеством этого раствора на предметное стекло и диспергируют препаровальной иглой. Затем на клетки наносят каплю 1% ацетоорсеина, накрывают покровным стеклом и через 1 мин исследуют под микроскопом при увеличении 20x10 и 40x10. Кратковременная обработка фрагмента яйценосного бу- горка гипотоническим раствором приво

дит к набуханию клеток и ослаблению межклеточных контактов, что позволяет диспергировать клетки на предметном стекле. В клетках наблюдают наличие или отсутствие в их цитоплазме липид- ных гранул, которые являются существенным признаком атретических изменений в фолликулах.

Предлагаемый способ позволяет оценивать наличие или отсутствие атретических изменений по этому признаку и, таким образом, судить о функциональном состоянии ооцита, а также проводить отбор по этому признаку ооцитов для культивирования и оплодотворения вне организма.

Формула изобретения

Способ определения атретических изменений в ооцитах из полостных фолликулов яичников крупного рогатого скота, включающий приготовление микропрепарата и его анализ, отличающийся тем, что, с целью ускорения и упрощения способа при сохранении ооцитов жизнеспособными, приготовление микропре-парата осуществляют путем отделения части окружающего ооцит яйценосного бугорка, обработки этой части гипотоническим раствором цитрата натрия и окраски ацетоорсеином, а анализ осуществляют по наличию или отсутствию липидных гранул в цитоплазме клеток.

Изобретение относится к области биологии размножения и может использоваться при изучении процесса созревания женских половых клеток, а также при разработке методов культивирования и оплодотворения вне организма ооцитов из полостных фолликулов яичников с целью получения эмбрионов ранних стадий. Целью изобретения является ускорение и упрощение способа при сохранении ооцитов жизнеспособными. После вьщеления ооцита из фолликула отделяют часть окружающего его яйценосного бугорка, обрабатывают ее 0,8%-ным гипотоническим раствором цитрата натрия, затем помещают на предметное стекло, диспергируют, наносят на клетки каплю 1%-ного ацето- орсеина, накрывают покровным стеклом и исследуют под микроскопом. Наличие липидных гранул в цитоплазме клеток яйценосного бугорка свидетельствует об атретических изменениях в фолликуле и ооците. с ю ел