оо
00
сг: со
11386902
Изобретение относится к способам определения биологически активных соединений и может быть использовано
в гематологии, физиологии, биохимии, кардиологии.
Целью изoбpeteния является повьппе- ние универсальности и точности способа при определении у животных.
плазминогена соответствует среднему значения диапазона. К О,1 мл разве- д енной плазмы добавляют 0,05 мл (200 ME) стрептокиназы и 0,05 мл 50%-ной эуглобулиновой фракции, инку бируют 7 мин при комнатной температу ре, добавляют 4%-ный раствор казеина смесь инкубируют 2 ч при 37°С, реакц
К плазме крысы, разведенной физио-jo останавливают хлорной кислотой,цент20
25
30
логическим раствором в соотношении 1:7-1:24, добавляют одинаковое количество взятых в равных соотношениях растворов эуглобулиновой фракции, которую вьделяют из плазмы крови человека известным способом и разводят боратным буфером до 25-75%-ной концентрации, и стрептокиназы в концентрации 150-400 ME,
Пример 1, Плазму крысы разводят физиологическим раствором в соотношении 1:7, т,е, концентрация плазминогена соответствует верхней границе допустимого диапазона. К 0,1 мл разведенной плазмы добавляют 0,05 мл (400 НЕ) стрептокиназы и 0,05 мл 75%-ной эуглобулиновой фракции из плазмы человека, инкубируют 10 мин при комнатной температуре, добавляют 5%-ный раствор казеина, смесь инкубируют 3 ч , реакцию останавливают хлорной кислотой, центрифугируют при 12 тыс, об/мин и спектрофо- тометрически определяют продукты расщепления казеина плазмином,Уровень .плаэминогена в плазме крыс получают равным 26 КЕ,
Пример 2, Плазмы крысы разводят физиологическим раствором в со- . отношении 1:24, т,е, концентрация : плазминогена соответствует нижней границе допустимого диапазона. К 0,1 мл разведенной плазмы добавляют 0,05 мл (150 ME) стрептокиназы и 0,05 мл 25%-ной эуглобулиновой фракции из плазмы человека, инкубируют 6 мин при комнатном температуре, добавляют 3%-ный раствор казеина, смесь инкубируют 1 ч при 36°С, реакцию останавливают хлорной кислотой, центрифугируют 50 при 8 тыс,об/мин и определяют продукты расщепления казеина на спектрофотометре. Уровень плазминогена получают равным 22 КЕ.
55
Пример 3, Плазму крысы разводят физиологическим раствором в сем- отношении 1:19, т.е. концентрация плачрифугируют при 10 тыс,об/мин и спект рофотометрически определяют продукты расщепления казеина плазмином. Уровень плазминогена получают равным 5 27 КЕ, что соответствует, максимальному значению концентрации плазминогена в плазме крыс.
35
45
Повьшение точности способа дости гается тем, что добавление в пробу, содержащую стандартные количества стрептокиназы, такой же конструкции эуглобулиновой фракции человека приводит к образованию постоянных количеств активатора, а также подбором соответствующего разведения исследуе мой плазмы. Это дает возможность пол чать точные и хорошо воспроизводимые результаты с высокой статистической достоверностью, которые отражают истинное содержание плазминогенав крови
Повьш1ение универсальности достига ется тем, что использование эуглобулиновой фракции человека устраняет видовую специфичность стрептокиназы и позволяет определять содержание плаз миногена не только в крови человека, но и в крови целого ряда животных. Это особенно важно для тех видов,.у которых резко выражена видовая специ фичность и определение содержания плазминогена со стрептокиназой практ чески невозможно.
Результаты определения содержания плазминогена в крови человека и живо ных предложенным способом: человек - 17 КЕ ± 0,5; кролик - 19 КЕ+0,3; со бака - 20 КЕ t 0,3; крыса- 24,5 КЕ t .}-0,3; бык - 11 КЕ ± 0,К Формула изобретения
Способ определения содержания плаз миногена в плазме крови, заключающийся в обработке разведенной физиологическим раствором плазмы крови растворами стрептокиназы и добавлении казеи ка, инкубации, добавлении хлорной кис лоты с последующим спектрофотометплазминогена соответствует среднему значения диапазона. К О,1 мл разве- д енной плазмы добавляют 0,05 мл (200 ME) стрептокиназы и 0,05 мл 50%-ной эуглобулиновой фракции, инкубируют 7 мин при комнатной температуре, добавляют 4%-ный раствор казеина, смесь инкубируют 2 ч при 37°С, реакцию
останавливают хлорной кислотой,центрифугируют при 10 тыс,об/мин и спект- рофотометрически определяют продукты расщепления казеина плазмином. Уровень плазминогена получают равным 27 КЕ, что соответствует, максимальному значению концентрации плазминогена в плазме крыс.
Повьшение точности способа достигается тем, что добавление в пробу, содержащую стандартные количества стрептокиназы, такой же конструкции эуглобулиновой фракции человека приводит к образованию постоянных количеств активатора, а также подбором соответствующего разведения исследуемой плазмы. Это дает возможность получать точные и хорошо воспроизводимые результаты с высокой статистической достоверностью, которые отражают истинное содержание плазминогенав крови.
Повьш1ение универсальности достигается тем, что использование эуглобулиновой фракции человека устраняет видовую специфичность стрептокиназы и позволяет определять содержание плазминогена не только в крови человека, но и в крови целого ряда животных. Это особенно важно для тех видов,.у которых резко выражена видовая специфичность и определение содержания плазминогена со стрептокиназой практи- чески невозможно.
Результаты определения содержания плазминогена в крови человека и животных предложенным способом: человек - 17 КЕ ± 0,5; кролик - 19 КЕ+0,3; собака - 20 КЕ t 0,3; крыса- 24,5 КЕ t .}-0,3; бык - 11 КЕ ± 0,К Формула изобретения
Способ определения содержания плазминогена в плазме крови, заключающийся в обработке разведенной физиологическим раствором плазмы крови растворами стрептокиназы и добавлении казеи- ка, инкубации, добавлении хлорной кислоты с последующим спектрофотомет31386902
рированием надосадочной жидкости,о т-раствором в соотношении 1:7-1:24, доличающийся тем, что, сбавляют смесь равных количеств 25 целью повышения универсальности и точ-75%-ной эуглобулиновой фракции крови
ности способа при определении у животЧчелове1 а и 1 50-400 ME стрептокиных, плазму разводят физиологическимнаяы.
название | год | авторы | номер документа |
---|---|---|---|
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПЛАЗМИНОГЕНА | 2000 |
|
RU2189590C2 |
Способ определения плазминогена в эуглобулиновой фракции крови | 1986 |
|
SU1436073A1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОНЦЕНТРАТА ПЛАЗМИНА ЧЕЛОВЕКА И ПРОДУКТ ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В МЕДИЦИНЕ | 2004 |
|
RU2257224C1 |
ПРОЛОНГИРОВАННОЕ ТРОМБОЛИТИЧЕСКОЕ СРЕДСТВО И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ | 1995 |
|
RU2121362C1 |
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ ПРОДУКТОВ ПРОТЕОЛИЗА В ПЛАЗМЕ КРОВИ И ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ТЕСТ-СИСТЕМА ДЛЯ ЕГО ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ | 2015 |
|
RU2597782C1 |
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТКАНЕВОГО АКТИВАТОРА ПЛАЗМИНОГЕНА | 2003 |
|
RU2252421C1 |
Способ исследования свертывания крови | 1990 |
|
SU1777089A1 |
Способ определения содержания продуктов протеолиза MUC1 и диагностическая тест-система для его осуществления | 2016 |
|
RU2676258C2 |
СПОСОБ ОЦЕНКИ ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ ТЕРАПИИ ПРИ НЕЙРОБЛАСТОМАХ У ДЕТЕЙ | 2009 |
|
RU2417758C1 |
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОВЫШЕННОГО УРОВНЯ АУТОАНТИТЕЛ К ПЛАЗМИНОГЕНУ ЧЕЛОВЕКА И ПРОДУКТАМ ЕГО ДЕГРАДАЦИИ И ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ТЕСТ-СИСТЕМА ДЛЯ ЕГО ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ | 2014 |
|
RU2597783C2 |
Изобретение относится к способам определения биологически активных соединений (БАС), предназначено для гематологии, физиологии, биохимии кардиологии. Цель изобретения - повышение точности способа при определении БАС у животных. Для зтого к плаз- -ме крови крысы,.разведенной физиоло- ги ческим раствором в соотношении 1:7- 1:24, добавляют одинаковое количество взятых в равных соотношениях растворов эуглобулиновой фракции, которую выделяют из плазмы крови человека и разводят боратным буфером до 25-75%- ной концентрации, и стрептокиназы в концентрации 150-400 ME. Способ позволяет определить соединение плазминогена у человека и животны {. с S
Хватов В.В., Петренко О.А | |||
Получение специфического субстрата - плаз- миногена человека для количественного определения активатора плазминогена в плазме крови внезапно умерших | |||
- Проблемы гематологии и переливания крови, 1975, f 6, с | |||
Способ получения на волокне оливково-зеленой окраски путем образования никелевого лака азокрасителя | 1920 |
|
SU57A1 |
Авторы
Даты
1988-04-07—Публикация
1986-02-21—Подача