Питательная среда для культивирования тканей Советский патент 1961 года по МПК C12N5/06 

Известны синтетические питательные среды для культивирование тканей при диагностике вирусных заболеваний, содержащие отдельные аминокислоты или гидролизаты белков (например, гидролизаты лактальбумина, казеина) и различные солевые и витаминные компоненты (например, раствор Хенкса, производные нуклеиновых кислот витамины В, Вг, С, D2, Е, К и другие).

Эти среды сложны в изготовлении (например, американская среда № 199 содержит до 60 ингредиентов), дороги и не могут быть использованы в небольших вирусологических лабораториях.

Предлагаемая питательная среда для культивирования тканей не содержит дефицитного сырья, что позволяет упростить и удешевить ее изготовление. Отличительной особенностью описываемой среды является применение в качестве основного.ее компонента легко доступного препарата аминопентида-2 (ферментативный гидролизат сывороткя крупного рогатого скота), содержащего все незаменимые аминокислоты и доступного любой лаборатории.

Питательная среда для культивирования тканей состоит из аминопептида-2, солевого раствора Хенкса, витаминного раствора (рибофлавин, аскорбиновая кислота, витамины До, Е, К, Вь адениловая кислота) и аденозинтрифосфорнои кислоты (АТФ).

Среду готовят стерильно, добавляя к раствору Хенкса последовательно аминопептид-2, витаминный раствор, антибиотики и аденозинтрифосфорную кислоту.

Солевой раствор Хенкса готовят в соответствии с инструкцией Института по изучению полиомиелита АМН СССР. Аминопептид-2 употребляют в стандартном растворе, применяемом обычно в клинике для парэнтерального питания больных и выпускаемом промышленностью и стерильных запаянных ампулах и флаконах. Витамины в указанных в таблице количествах растворяют при помешивании в 1 л трижды дистиллированной воды, полученной в день приготовления раствора.

Раствор фильтруют через стерильный фильтр и добавляют к нему пенициллин и стрептомицин в количестве 100 ИЕ на 1 см раствора. Хранят витаминный раствор при температуре 4°.

Аденозинтрифосфорную кислоту берут в стерильном 1%-ном растворе.

По количественному составу ингредиентов питательная среда для культивирования тканей может быть изготовлена в следующих вариантах:

Аминопептид-2 10 или 5%; Раствор Хенкса 89 94%; Витаминный раствор 0,5 или 0,5%; АТФ 0,2 - 0,5 %.

Описанные варианты среды не являются исчерпывающими. Среду, включающую аминопептид-2, можно употреблять для выращивания многих клеток и тканей, использующихся в вирусологии. Для получения хорошего роста следует изменять концентрации аминопептида-2 и витаминов, доводя их до оптимума в экспериментах с каждой отдельной разновидностью клеток.

Предмет изобретения

Питательная среда для культивирования тканей при диагностике вирусных заболеваний, содержащая раствор Хенкса, рибофлавин, аскарбиновую кислоту, витамины Дг, Е, К, Bi, адениловую кислоту и аденозинтрифосфорную кислоту, отличающаяся тем, что, в целях упрощения и удешевления среды, вводят в нее вместо дефицитных аминокислот аминопептид-2.