(21)4072368/28-14
(22)26.05.86
(46) 15.04.88. Бюл. № 14
(71)Иркутский государственный медицинский институт
(72)В. Г. Савватеева и А. В. Кочкин (53) 616.002.524(088.8)
(56) Рыковская Г. И. Проблемы туберкулеза, 1983, № 9, с. 30-32.
(54) СПОСОБ ДИАГПОСТИКИ АКТИВНОСТИ ТУБЕРКУЛЕЗА У ДЕТЕЙ (57) Для снижения травматичности и ускорении диагностики ставят реакцию восстановления нитросинего тетразолия в присутствии туберкулина. При снижении показателя на 10% и более по сравнению со спонтанным вариантом диагностируют активность туберкулеза.
00 00 -VI
СО
со
Изобретение относится к медицине, преимущественно к фтизиопедиатрии, и может быть использовано для диагностики скрытой активности туберкулеза у детей и оценки эффективности проводимого лечения.
Целью изобретения является снижение травматичности и ускорение времени исследования.
Способ осуществляют следующим обра- зом.
После клинико-рентгенологического обследования ребенка проводят динамическое исследование крови in vitro путем постановки реакции восстановления нитросинего тетразолия по общепринятой методике и по предлагаемому способу. Для этого одновременно в две лунки полистеролового планшета для иммунологических реакций вносят по 0,02 гепарина (20 ед/мл крови), затем по 0,1 мл капиллярной крови; в одну лунку добавляют 0,1 мл 0,1%-ного раствора ИСТ, приготовленного ех tempore (смесь равных объемов 0,2% нет на 0,15 М фосфатном буфере рН 7,2 и изотонического раствора, спонтанный вариант, в другую лунку добавляют предварительно растворенный в физиологическом растворе NaCl туберкулин, из расчета 1 ампула ППД-Л (500 тыс. ТЕ) на 1 мл 0,9% NaCl (стимулированная реакция). Инкубируют 30 мин при 37°С. Перемешивание воздухом после каждого этапа. После инкубации готовят мазки, вы- сущивают на воздухе и фиксируют метанолом. Окрашивание 0,1°/о-ным нейтральным красным на физиологическом растворе 40 мин. Подсчет под иммерсией 100-200 нейтрофилов. Процент клеток, содержащих в цитоплазме отложения темно-синего фор- мазана, определяет величину НСТ-теста в спонтанном варианте и в стимулированном. К HGT-тест-положительным относят ней- трофилы с ясно определяемым отложением формазана в виде гранул и глыбок темно- синего цвета.
Реакцию считают положительной при разнице между спонтанным вариантом и с добавлением туберкулина 10% и более. Этот показатель является критерием активного туберкулезного процесса.
Предлагаемый способ малотравматичен, недлителен (занимает около 4 ч).
Формула изобретения
Способ диагностики активности туберкулеза у детей путем цитохимического исследования крови по НСТ-тесту с применением туберкулина, отличающийся тем, что, с целью снижения травматичности и ускорения времени исследования, реакцию НСТ-теста ставят in vitro в присутствии туберкулина и по снижению показателя восстановления нитросинего тетразолия грану- лицитами периферической крови на 10% и более по сравнению со спонтанным вариантом диагностируют активность туберкулеза.
