Способ дифференциальной диагностики туберкулеза и хронических неспецифических заболеваний легких Советский патент 1989 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине., в частности фтизиатрии, и может быть использовано в целях дифференциальной диагностики туберкулеза и хрони-. ческих неспецифических заболеваний легких у детей и подростков.

Целью изобретения является повышение точности дифференциальной диагностики и возможности применения диагностики у детей и подростков.

Способ осуществляют следующим образом,

У больного с патологией легких неясного генеза в пробирку с О,1 мл гепарина и 0,9 мл среды 199 берут 3 мл крови из локтевой вены. Затем добавляют 1 мл 10%-ного раствора желатина и помещают в термостат при 37бС на 30-40 мин для осаждения эрит- ооцитов.

3

Плазму отсасывают и центрифугируют 10 мин при 1000 об/мин, к осадку доавляют 5 мл среды 199, ресуспен- ируют и подсчитывают количество выеленных лейкоцитов в камере Горяе- а.

В центрифужные пробирки разливают леточную суспензию таким образом, тобы в каждой пробирке было по 2x10 ейкоцитов.

Для проведения спонтанной реакции осстановления НСТ пробирки с клеточной взвесью центрифугируют 5 мин ри 1000 об/мин, надосадочную жидость сливают, а к осадку добавляют 0,2 мл 0,2% НСТ. Клетки инкубируют при 37°С 1 ч. После инкубации прог бирки вновь центрифугируют 1-2 мин при 1000 об/мин, к осадку добавляют 0,2 мл 1 н. HCf, после чего их тщательно встряхивают и еще раз центрифугируют. Надосадочную жидкость сливают, а для растворения осадка добавляют 0,2 мл диметилсульфоксида. После полного растворения осадка объем жидкости доводят фосфатно-солевым буфером до 3 мл.

Для проведения индуцированного теста вначале осуществляют 1-часовую экспозицию лейкоцитов с туберкулином (ППД-Л) при соотношении нейтрофилов с туберкулином 5000 ТЕ в 1 мл при 37°С.

Оптическую плотность формазана в образцах определяют на спектрофотометре при длине волны 492 нм против 2,8 мл фосфатного буфера с 0,2 мл диметилсульфоксида. После инкубации с туберкулином клетки обрабатываются как описано выше,

Рассчитывают отношение оптической плотности опытной и контрольной проб и при отношении 0,9 и менее диагностируют туберкулез, а при 1,1 и более - хроническое неспецифическое заболевание легких.

Пример 1. Больной В., 12 лет, поступил для уточнения диагноза, Заболевание выявлено методом флюорографии. Контакт с туберкулезным больным отрицает. Вакцинация БЦЖ в родильном доме, поствакцинальный рубчик 5 мм. Туберкулиновые пробы с 2 ТЕ положительные в течение последних двух лет. При поступлении жалоб нет„ В легких с притупление перкуторного звука с обеих сторон, хрипов нет о На рентгенограмме грудной клетки обнаруживают

с 833654

ся инфильтративные изменения в верхних отделах легких с обеих сторон.

Общий анализ крови: лейкоциты 4600, эозинофилы 1, нейтрофилы 51, лимфоциты 38, моноциты 10, п/я 4, ге моглобин 66, эритроциты 4, ц.п. 0,8, СОЭ 5 мм, НСТ-тест-спонтанная реакция 301 ЕД, индуцированная реакция

JQ на туберкулин 210 ЕД, отношение оптической плотности опытной и контрольной проб равно 0,7, В результате полученных данных и на основании НСТ- теста заподозрен инфильтративный ту-

15 беркулез легких. Тест-терапия и динамическое наблюдение за рентгенограммами грудной клетки подтвердили клинический диагноз

Пример 2„.Больной С,, 14 лет,

20 поступил в институт для уточнения диагноза. Контакт с туберкулезным больным отрицает„ Вакцинация БЦЖ в родильном доме, ревакцинация в первом классе имеет два поствакцинальных

25 рубчика. Туберкулиновые пробы поло жительные с 2 ТЕ. Заболевание выявлено 25/1-84 года, когда обнаружены изменения в легких и внутригрудных лимфатических узлах с обеих сторон

30 При поступлении жалобы на кашель с мокротой, одышка при физической нагрузке. В легких при аускультации жесткое дыхание и сухие хрипы с обеих сторон На рентгенограмме грудной

,с клетки обнаруживаются усиление легочного рисунка и расширение корней легких с обеих сторон Общий анализ крови: лейкоциты 6300, нейтрофилы 52, лимфоциты 36, моноциты 11, п/я 3,

4Q гемоглобин 78, эритроциты 5,0, ц.п. 0,8, СОЭ 15 мм. НСТ-тест-спонтанная j реакция 242 ЕД, индуцированная реакция на туберкулин 310 ЕД. Отношение оптической плотности опытной и конт-с рольной проб равно 1,3. На основании анамнеза, клинико-рентгенологической картины и данных НСТ-теста был заподозрен хронический бронхит Неспецифическая тест-терапия и клинико-рент- генологические данные в динамике подтвердили диагноз хронического бронхита.

Пример 3. Больная К,, 7 лет, поступила в детско-подростковое отделение Ы1ИИТ КЗ РСФСР для уточнения диагноза. Заболевание выявлено при профосмотре. Контакт с туберкулезным больным не установлен. При поступлении жалобы на слабость, снижение аппе

50

55

тита и потливость. В легких хрипов нет. На рентгенограмме грудной клетки -корень правого легкого незначительно расширен, наружный контур его слегка волнистый Умеренно сужен просвет правого верхнедолевого бронха. Реакция Манту с 2 ТЕ 20 мм. НСТ-тест: спонтанная реакция (контроль) 220 ед.опт.пл., индуцированная реакция на туберкулин (опыт) - 198 ед.опт.гаь Отношение оптической плотности опытной и контрольной проб равно 0,9. / Клинический диагноз: туберкулез внут- ригрудных лимфатических узлов справа в фазе инфильтрации, БК(-).

После назначения противотуберкулезной терапии: стрептомицин 20 мг/кг, изониазид 15 мг/кг, ПАСК 200 мг/кг на фоне витамино-десенсибилизирующей терапии отмечена положительная кли- никорентгенологическая динамика.

Пример 4. Больной Г., 1 0 лет, поступил в детско-подростковое отделение МНИИТ МЗ РСФСР для уточнения диагноза. Заболевание выявлено по обращаемости в августе 1985 года. При поступлении жалобы на сухой кашель и одышку. В легких хрипов нет. На рентгенограмме легких с обеих сторон перибронхиальные и периваскулярные уплотнения, преимущественно в прикорневой зоне, расширение корней легких, усиление легочного рисунка за счет интерстициальньгх изменений, уплотнение медиастинальной и междолевой плевры.

Функция внешнего дыхания: нарушение легочной вентиляции III ст., рестриктивный тип III ст. Реакция Манту с 2 ТЕ - 5 мм. НСТ-тест: спонтанная реакция (контроль) 60 ед.опт0пло индуцированная реакция на туберкулин

(опыт) 66 ед.опт,,пл. Отношение оптической плотности опытной и контрольной проб равно 1,1. Клинический диагноз : идиопатический фиброзирующнй альвеолит s

Применение предложенного способа дифференциальной диагностики с помощью НСТ-теста с оценкой спонтанной и индуцированной реакцией на туберкулин позволяет с большей точностью исключить или подтвердить туберкулезную этиологию неясной патологии легких у детей.

5 Точность способа повышается на 17 и достигает 97%. Исключается субъективизм при оценке результатов анализа благодаря объективной количественной оценке результатов анализа с

о помощью спектрофотометра, метод становится доступным для выполнения без специалиста-цитолога, что расширяет сферу его применения.

5 Формула изобретения

Способ дифференциальной диагностики туберкулеза и хронических неспецифических заболеваний легких пу0 тем постановки реакции НСТ-теста, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа и возможности применения диагностики у детей и подростков, постановку реак5 ции НСТ-теста проводят с туберкули--. ном, затем добавляют в пробу диметил- сульфоксид, измеряют оптическую плотность полученного раствора, рассчитывают отношение опытной пробы к конт0 рольной и при его показателе 0,9 и менее диагностируют туберкулез, а при 1,1 и более - хроническое неспецифическое заболевание легких.

Изобретение относится к области медицины, в частности изиатрии. Целью изобретения является повышение точности способа и достижение возможности диагностики у детей и подростков. Для этого у больного с неясной патологией легких берут кровь из локтевой вены, выделяют из крови лейкоциты, подсчитывают их количество и проводят реакцию НСТ-теста путем добавления к 2 млн лейкоцитов 0,2% нитросиний тетразолий, инкубации их при 37°С в течение 1 ч, после чего клетки разрушают HCL и образовавшийся формазан осаждают центрифугированием. Осадок формазана затем растворяют в диметилсульфоксиде и определяют оптическую плотность пробы при длине волны 492 нм (контрольная проба). Опытная проба отличается от контрольной тем, что перед постановкой реакции НСТ-теста лейкоциты инкубируют с туберкулином (ППД-Л) при соотношении 2 млн. клеток: 5000 ТЕ в 1 мл при 37°С. Затем рассчитывают отношение оптической плотности опытной пробы к оптической плотности контрольной и при значении его, равном 0,9 и меньше, диагностируют туберкулез, а при отношении, равном 1,1 и больше,- неспецифические заболевания легких. Использование туберкулина и объективная количественная оценка реакции НСТ-теста с помощью спектрофотометра повышают точность способа 97% (против 80% в прототиве), появляется возможность более точной дифференциальной диагностики у детей и подростков при сохранении безопастности метода для больного.