Способ диагностики стабильной стенокардии напряжения Советский патент 1988 года по МПК G01N33/50 

со со

со

ф

00 00

Изобретение относится к медицине, S частности к кардиологии, и может Фыть использовано для диагностики Стабильной стенокардии напряжения.

Целью изобретения является упроще- №& и ускорение способа за счет определения в гемолизате очищенной фрак- №и эритроцитов капиллярной крови Активности НАД.Н-феррицианид-редукта- ы (ФЦР) и расчета коэффициента коле- |5аний активности фермента в ходе ве- лоэргометрической нагрузки.

Способ осуществляют следующим об- :)азом.

У обследуемых до и во время ве лоэргометрии (нагрузки 50 и 100 Вт) Hts пальца берут 0,1 мл крови с гепарином и разводят в 3,0 мл 0,9% ох- ггажденного раствора хлористого нат- ия. Центрифугируют при 1850 g в течение 5 мин. Надосадочную жидкость удаляют. В осадок эритроцитов добав- |пяют 0,2 мл 0,25%-ного раствора са- Ьонина, оставляют на 5 мин для пол- «ого гемолиза, доводят дистиллированной водой до 2,0 мл.

Для спектрофотометрии при 340 нм в кюветах с длиной оптического пути ;10 мм готовят реакционную смесь, со- держащую: 0,3 мл 0,1 М трис-НС1 бу- . |ферного раствора с ЭДТА (на 100 мл I буферного раствора - 1,21 г трис- (оксиметил)-аминометана и 2,92 мг ЭДТА, рН доводят 0,1 н. НС1 до 8,0)j |0,2 мл 2 мМ раствора красной кровя- iной соли (на 100 мл раствора 6,58 мг Iжелезосинеродистого калия); 0,1 мл ;2 мМ НАД.Н (на 1 мл раствора 1,3 мг никотинамид-аденин-динуклеотида вое- становленного); 2,0 мл дистиллированной воды.

Реакцию запускают добавлением 20 мкл гемолизата. Оптическую плотность определяют до реакции и после пятиминутной инкубации при комнатной температуре. Контролем служит реакционная смесь без гемолизата. Активность фермента в ME на 1 г гемоглобина в 1 мин рассчитывают по формул

А

дЕ 2д 62-1000

б:22-С о702 5

- активность фермента в ME на

1 г Нв в 1 мин;

- изменение оптической плотности на время инкубации; - количество реакдаонной смеси, мл,

коэффициент перевода в литры; коэффициент молярной экстинк- ции НАД.Н;

концентрация гемоглобина в г на 1 л гемолизата; количество гемолизата в пробе, МЛ}

время инкубации, мин. высчитывают коэффициент, хающий колебания активности по формуле

X

H22lAjo)t. 100

(100-А,оо )

,

0

5

где Ajo и А,оо - значения активности фермента в % к значению до нагрузок соответственно при уровне нагрузки ;В 50 и 100 Вт.

По увеличению коэффициента X в 1,8 раза и более ставят диагноз стабильной стенокардии напряжения.

Пример 1. У пациента А., 42 лет, обследованного по поводу подозрения на стенокардию, на ЭКГ в покое изменение не обнаружено. При исследовании эритроцитов, взятых до и в ходе велоэргометрической пробы на уровнях в 50 и 100 Вт, получены результаты по активности ФЦР в 86,52, 17,30; 28,84 ME, что дало коэффициент Х О,733. Это составило отклонение от нормы (О,176± 0,019) в 4,16 раза. Был поставлен диагноз ИБС, ССН. Диагноз верифицирован электрокардиографическими признаками ишемии миокарда на ступенях нагрузки в 100 и 125 Вт,

П.р и м е р 2. Обследован пациент Д., 48 лет, по поводу подозрения на стенокардию. При электрокардиографическом анализе изменений ЭКГ не обнаружено. До и в ходе велоэргометрии на уровнях 50 и 100 Вт были получены результаты по активности ФЦР в 40,90; 29,21; 29,60 ME, что соответствовало ,281. Отклонение от нормы в 1,59 раза. Клинические и ЭКГ признаки ишемии миокарда в ходе пробы также отсутствовали. Диагноз стенокардии снят,

Пример 3. Больной Ч., 43 года. Обследован 21,02.84 г. с подозрением на стенокардию. На ЭКГ в покое изменений не обнаружено. При иследо- вании эритроцитов, взятых до и в ходе велоэргометрической пробы на уровнях 50 и 100 Вт, были получены результаты по активности ФЦР соответственно в 31,910; 30,724; 51,206 МБ.

Коэффициент X 0,321. Отклонение от нормы в 1,82 раза. Был поставлен диагноз ИБС, сен. Диагноз верифицирован электрокардиографическими призна- ками ишемии миокарда на ступени нагрузки 150 Вт. Диагностика стабильной стенокардии напряжения по увеличению коэффициента, характеризующего колебания активности ФЦР в хо- де физич - ской нагрузки, возможна и для людей возрастной группы 51-60 лет (Примеры 4 и 5 табл.).

Пример 4. Больной М., 56 лет обследован 11.10.83 г с подозрением на стенокардию. На ЭКГ в покое изменение не обнаружено. При исследовании активности ФЦР в ходе физической нагрузки (до 50 и 100 Вт) бьши получены следующие результаты: 96,425; 46,551,- 59,977 ME. Коэффициент флюктуации X 0,447. Отклонение от нормы в 2,02 раза. Был поставлен диагноз

Способ диагностики стабильной сте нокардии напряжения путем биохимического анализа фермента крови больного до- и после физической нйгрузки отличающийся тем, что, с целью упрощения и ускорения способа, определяют в гемолизате очищенной фракции эритроцитов капиллярной крови активность НАД.Н-феррнцийнид- редуктазы, рассчитьгоают коэффициент, характеризующий колебания активности

(100-А so) + (100-Ajoj, ) -.колебания активности фермента;

ИБС ССН. Диагноз верифицирован признаками ишемии на ЭКГ на уровне нагруз-25 фермента в.ходе велоэргометрической ки 100 Вт. ,нагрузки по формуле

Пример 5, БОЛЬНОЙ Ш,, 53 года, обследован 13.06.83 г с подозрением на стенокардию, В покое изменение на ЭКГ обнаружено не было. При 30 г-Д X - коэффициент, характеризующий исследовании эритроцитов до- и в ходе физической нагрузки на уровнях 50 и 100 Вт бьти получены результаты акгд тивности ФЦР: 73,355; 63,574; 64,987 ME, Коэффицинет ,124, Диаг- ноз ССН был снят. Клинически и по ЭКГ признаки ишемии в ходе пробы от- .сутствовали.

Коэффициент, характеризующий колебания активности НАД.Н-феррицианид- редуктазы эритроцитов практически

100

- значения активности фермента в % к значению до нагрузки соответственно при уровне нагрузки в 50 и 100 Вт, и по увеличению коэффициента в 1,8 раза и более по сравнению с нормой 40 диагностируют стабильную стенокардию напряжения.

а- с ю ет.

1399688

здоровых людей и велоэргометричесведен в таблице.

Предлагаемый способ прост, так как не требует взятия венозной крови и электрофоретических исследований и сокращает время диагностики до 1,5-2 ч.

Формула изобретения

Способ диагностики стабильной стенокардии напряжения путем биохимического анализа фермента крови больного до- и после физической нйгрузки, отличающийся тем, что, с целью упрощения и ускорения способа, определяют в гемолизате очищенной фракции эритроцитов капиллярной крови активность НАД.Н-феррнцийнид- редуктазы, рассчитьгоают коэффициент, характеризующий колебания активности

фермента в.ходе велоэргометрической нагрузки по формуле

(100-А so) + (100-Ajoj, ) -. коэффициент, характери

колебания активности фермента;

коэффициент, характеризующий

г-Д X - коэффициент, характеризующий

100

- значения активности фермента в % к значению до нагрузки соответственно при уровне нагрузки в 50 и 100 Вт, и по увеличению коэффициента в 1,8 раза и более по сравнению с нормой иагностируют стабильную стенокардию напряжения.

Изобретение относится к медицине, точнее к кардиологии, предназначено для диагностики стабильной стенокардии напряжения. Цель изобретения - упрощение и ускорение способа путем определения в гемолизате очищенной фракции эритроцитов капиллярной крови активности НАД.Н-феррициа- нид-редуктазы (ФЦР). Рассчитывают коэффициент колебаний активности фермента в ходе велоэргометрической нагрузки. По увеличению значения коэф- . фициента в 1,8 раза и более от нормы делают вывод о наличии стабильной стенокардии напряжения. 1 табл. (Л