Изобретение относится к химии полимеров, а именно к полимерному реагенту для ковалентной иммобилизации биологически активных соединений, и может быть использовано в биоорганической химии и биотехнологии для получения препаратов ковалентно иммобилизированных аминов, аминокислот, пептидов, белков и ферментов.
Целью изобретения является создание полимерного реагента для высокоэффективной ковалентной иммобилизации биологически активных соединений.
Пример 1. Получение полимерного реагента.
Смесь 12 г N-винилпирролидона, 3,25 г диметакрилата тридекаэтиленгликоля (ТГМ-13) и 0,28 г п-натрофенилового эфира ε -аминокапроновой кислоты (НФА) растворяют в 100 мл смеси этилового спирта и этиленгликоля, взятых в объемном соотношении 3:7. К раствору добавляют 0,3 г динитрила азобисизомасляной кислоты, вакуумируют и полимеризуют смесь при 80oC в течение 4 ч. Образующийся сополимер измельчают на ситах диаметром отверстий 1-1,5 мм, промывают этиловым спиртом, перемешивая взвесь частиц в течение 15-20 мин, после чего промывают полимерный реагент водой, ацетоном и высушивают. Состав полимерного реагента устанавливают по количеству отщепляющегося при обработке аммиаком п-нитрофенола (молярная доля звеньев п-нитрофенильного остатка), по количественному анализу состава сополимеров на азот (содержание винилпирролидоновых звеньев) и количеству карбоксильных групп, определяемому титрованием щелочью после гидролиза полимера серной кислотой в пиридине (молярная доля сшивателя). Для данного примера эти назначения отвечают значениям x, y и k в составе полимерного реагента, равным 70, 28 и 2 мол. соответственно.
Иммобилизация биологически активного соединения. Навеску высушенного полимерного реагента (1 г) инкубируют при комнатной температуре в 20 мл раствора сывороточного альбумина (CA) в бикарбонатном буфере (pH 8,5) в течение 24 ч. Препарат иммобилизованного белка промывают до полного удаления п-нитрофенола, количество связанного белка определяют по связыванию конго красного. Исходное количество белка в растворе 97,5 мг, иммобилизованного 82,8 мг; эффективность иммобилизации 83,5%
Данные по примерам 2-10 приведены в таблице.
Как следует из приведенной таблицы, полимерные реагенты предлагаемой структуры позволяет проводить ковалентную иммобилизацию биологически активных соединений с высокой эффективностью и с сохранением их биологической активности (например, высокой ферментативной активности трипсина).
название | год | авторы | номер документа |
---|---|---|---|
СШИТЫЙ СОПОЛИМЕР ДЛЯ КОВАЛЕНТНОЙ ИММОБИЛИЗАЦИИ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ СОЕДИНЕНИЙ, СОДЕРЖАЩИХ СВОБОДНЫЕ АМИНОГРУППЫ | 1988 |
|
SU1550908A1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОВЕРХНОСТНО-МОДИФИЦИРОВАННЫХ НАНОЧАСТИЦ ДЛЯ ИММОБИЛИЗАЦИИ БИОЛОГИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ | 2010 |
|
RU2425879C1 |
БИОЧИП И СПОСОБ ЕГО ИЗГОТОВЛЕНИЯ | 2005 |
|
RU2298797C2 |
Тест-система на основе конъюгатов "полимерная микросфера-тиреоглобулин" для экспресс-диагностики аутоиммунных заболеваний щитовидной железы | 2017 |
|
RU2657834C1 |
СОРБЕНТ ДЛЯ УДАЛЕНИЯ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ | 2008 |
|
RU2389022C2 |
Способ получения полимерного реагента для ковалентной иммобилизации биологически активных соединений | 1989 |
|
SU1675304A1 |
Способ получения альфа-фетопротеина, иммобилизованного на ПЭТ-микрочастицах | 2018 |
|
RU2731415C2 |
НАНОСТРУКТУРИРОВАННАЯ ЙОДОСОДЕРЖАЩАЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНАЯ ДОБАВКА К ПИЩЕ И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ | 2013 |
|
RU2536699C1 |
Способ получения иммобилизованной целлюлозы | 1980 |
|
SU925108A1 |
Способ получения носителя для иммобилизации биологически активных веществ | 1977 |
|
SU749847A1 |
Изобретение относится к полимерному реагенту для ковалентной иммобилизации биологически активных соединений (БАС) и может быть использовано с биоорганической химии и биотехнологии для получения препаратов ковалентно иммобилизованных аминов, аминокислот, пептидов, белков и ферментов. Изобретение позволяет проводить ковалентную иммобилизацию БАС с эффективностью 70-90% при сохранении их функциональной активности до 90-100% за счет структуры полимерного реагента.
где
x=50-70 мол.%; y=28-46 мол.%; k=2-10 мол.%. 1 табл.
Полимерный реагент формулы
где х 50 70 мол.
y 28 46 мол.
k 2 10 мол.
для ковалентной иммобилизации биологически активных соединений, содержащих свободные аминогруппы.
Иммобилизированные ферменты./Под ред | |||
И.В | |||
Березина | |||
М.: МГУ, 1976, т.1, с | |||
Крутильный аппарат | 1922 |
|
SU234A1 |
N | |||
Dattagupta, H | |||
Buenemann | |||
A new type of polymeric carricaiiy for immobilization of biologically specific molecules, I | |||
Polym | |||
Sci | |||
Polym | |||
Приспособление для склейки фанер в стыках | 1924 |
|
SU1973A1 |
Походная разборная печь для варки пищи и печения хлеба | 1920 |
|
SU11A1 |
Питательный кран для вагонных резервуаров воздушных тормозов | 1921 |
|
SU189A1 |
Авторы
Даты
1998-01-10—Публикация
1986-06-13—Подача