Способ получения основы питательных сред для культивирования микроорганизмов Советский патент 1988 года по МПК C12N1/20 

4 О ts9

Изобретение относится к ветеринарной и медицинской микробиологии и : может быть использовано для получения основных питательных сред для биотехнологии.

Цель изобретения - повышение ростовых свойств, стандартизация среды и упрощение способа,

В способе получения основы пита- сред гидролизу подвергают органы и мышечные ткани ластоногих, преимущественно молодняка тмленей, имеющих утробный или вторичный воло- ;сякой покров, Источниками ферментов при гидролизе являются ферментосо- iдержащие органы того же вида живот- |ных, В качестве сырья используют орга ;ны и мьщгечные ткани зеленца, белька, |хохлаченка, серки, сиваря или взрос- :лых особей, например нерпы, J Кроме того, при использовании для ;гидролнза мышечных тканей ластоно- тих их предварительно измельчают умеете .с костями, что упрощает способ

Пример, Тушку беломорского тюленя с утробным волосяным покровом (белька), освобожденную от щкуры, фчшцают от жира, удаляют внутренние фрганы, голову и заднюю ласту, Мышеч1| ую ткань измельчают в мясорубке вместе с костями, 1 кг полученного мя 4о-костного фарша заливают 2 л водо- г|роводной воды, подогретой до 50 С, т|станавливают рН 8,0, добавляют 100 г (}1арша поджелудочной железы белька и п|роводят гидролиз в течение 24 ч, Гид ррлизат отделяют от осадка фильтрованием, подкисляют уксусной кислотой до рН 5,4, кипятят и фильтруют. Фильтрат высушивают на распылительной сушилке. Содержание аминного азота в полученной основе составляет 7,7%,

В отличие от телят, ластоногие не подвергаются ветеринарной обработке, поэтому предлагаемое сырье не содержит антибиотиков и других средств, подавляющих рост микробов, что положи тйльно влияет на качество получаемых из этого сырья питательных сред для культивирования микроорганизмов, Су- щвственное улучшение качества сред до1стигается также за счет повышения стандартности сырья путем использования преимущественно молодых животных, ИМЕЮЩИХ утробный или вторичный волося HOJH покров. Это объясняется тем, что в силу биологических особенностей организма смена меховых стадий разви- t

тия модуляции молодых тюленей происходит синхронно .и в сжатые сроки. Например, возраст всей популяции новорожденных тюленей, находящихся в меховой стадии белька (утробный волосяной покров), не превьш1ает 10-12 дней после чего синхронно наступает стадия линьки, заканчивающаяся к сороковому дню жизни меховой стадией серки (вторичный волосяной покров), На этих ранних стадиях развития тюлени питаются только материнским«молоком.

Таким образом, предлагаемое сырье стандартно по возрасту и факторам питания, что повьщ1ает стандартность получаемых из него питательных сред. Молодых животных легко отличить по качеству и цвету меха.

Основные питательные среды, полученные по предлагаемому способу, содержат до 8% аминного азота, т,е, почти в 2 раза больше, чем в прототипе, что выражается в усилении роста микроорганизмов и в снижении расхода основы при приготовлении питательных сред.

Например, для приготовления л питательного бульона, содержащего 100 мг% аминного азота, необходимо израсходовать 12,5 г сухой основной среды, полученной по предлагаемому способу и содержащей 8% аминного азота, В- то же время пептического гид- ролизата, полученного по способу-прототипу и содержащего 2,6% аминного азота, для приготовления 1 л бульона потребуется израсходовать 38 г, что примерно в 3 раза больше.

Повышенное содержание аминного азота (до 8%J в основных средах, получаемых по предлагаемому способу, достигается оптимизацией условий гидролиза за счет испольования ферменто- содержащих органов ластоногих того же вида, например поджелудочной железы тюленя, что способствует более высокому сродству между ферментами и субстратом.

Повышение качества основных питательных сред, полученных по предлагаемому способу, выражающееся в существенном улучшении их ростовых свойств, иллюстрируются данными, приведенными в табл. 1 и 2,

Результаты оценки качества образцов основных питательных сред, полученных по предлагаемому способу, в сравнении с производственной серией

3U

среды на основе триптического пептона, полученного по способу-прототипу приведены в таблице.

Результаты оценки качества образцов основных питательных сред, полученных по предлагаемому способу, в сравнении с основной питательной средой фирмы Difco (США) следующие:

Основа среды Рост культуры

Китта-Тароцци clostridium по- vyi Coedematiens штамм 198

Ферментатив- Рост типичньш

ный гидроли-1 Спорообразование

зат мясоко- низкое

стиого фарша белька + 4печень белька

Ферментативный Рост типичный

гидролизат Спорообразование

сердца сива- . низкое

ря + печень

сиваря

Питательный Рост отсутствует

бульон Difco

из мяса крупного рогатого

скота (США) +

+ печень КРС

Из данных, приведенных в таблице, видно, что основные среды, приготовленные по предлагаемому способу, существенно превосходят по ростовым свойствам среду, приготовленную на основе триптического гидролизата мя са теленка. Например, количество микробных клеток на среде из мяса теленка через 48 ч примерно в 10 тыс. раз меньше, чем на среде из сердца бель- ка и почти в 10 раз меньше, чем на среде из мясокостного фарша серки.

Результаты, приведенные вьш1е, свидетельствуют о более высоком качестве основных сред, полученных по пред лагаемому способу, чем известньш питательный бульон фирмы Difco (США) изготовленный из мяса крупного рогатого скота и являющегося одиним из лучших зарубежных образцов. Указанные основы были использованы в среде Китта-Тароцци для требовательной культуры анаэроба clostridium novyi (ocdematiens), на импортной среде ро культуры отсутствовал.

Низкое спорообразование у бактериальных клеток на средах из сырья ластоногих свидетельствует об их выской питательной ценности.

,

,

io

15

25

.„

,т

о30

35

50

55

При использова)П1и в качестве сырья мышечных тканей ластоногих их можно измельчать и гидро.гп13овать вместе с костями, что обеспечивается особенностями костно-мышечнойсистемы молодых ластоногих. Это также способствует повышению питательной ценности целевого продукта. Кости являются источником, необходимых для роста микроорганизмов таких неорганических ионов, как Са , , а также продуктов гидролиза коллагена, составляющего 90-96% органического матрикса кости. Помимо повышения качества это исключает трудоемкую стадию отделения мяса от костей и повышает выход целевого продукта за счет безотходного использования мяса.

В отличие от используемых в прототипе телят, являющихся ценным пищевым продуктом, предлагаемые виды сырья ластоногих не являются пищевыми продуктами. Кроме того, используемые в предлагаемом способе такие ферменто- содержащие органы ластоногих, как кишечник, желудок, поджелудочная железа, являются неутилизируемыми отходами зверобойного промысла.

Поэтому предлагаемый способ высокоэкономичен. Он позволяет значительно расширить-сырьевую базу для промышленного получения высококачественных стандартных микробиологических сред за счет рационального и комплексного использования полноценного в . питательном отношении, но непищевого сырья ластоногих, в том числе отходов регулярного зверобойного промысла.

Наряду с повьш1ением качества, уменьшением расхода готового продукта и расширением сырьевой базы, предла- гаемое новое техническое решение позволяет также упростить способ получения сред и повысить выход целевого продукта.

Формула изобретения 1. Способ получения основы пита- тельных сред для культивирования микроорганизмов путем ферментативного. гидролиза животного сырья, отличающийся тем, что, с целью улучшения ростовых свойств среды, в качестве сырья используют органы и ткани ластоногих, а в качестве источника ферментов для гидролиза - фер- ментсодержащие органы животных того же вида ластоногих.

2, Способ по п. 1, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа, мышечные ткани ластоногих измельчают вместе с костями.

3. Способ по пп. I и 2, отличающийся тем, что, с целью стандартизации среды, в качестве сырья, используют органы и ткани тюленей, имеющих утробный или вторичный волосяной покров.

Изобретение относится к ветеринарной и медицинской микробиологии и может быть использовано для получения основных питательных сред для биотехнологии. Целью изобретения является повышение ростовых свойств, стандартизация среды и упрощение способа. Органы или мьшечные ткани ластоногих, преимущественно тюленей, имеющих утробный и вторичный волосяной покров, измельчают, заливают водой, подогревают и устанавливают рН 8,0, Добавляют источник ферментов, используя ферментосодержащие органы животного того же вида, после чего проводят гидролиз. Гидролизат фиксируют и высушивают. Для упрощения способа мьшечные ткани ластоногих измельчают вместе с костями. 2 з.п. ф-лы, I табл. а S (Л

Ферментативньш гидролизат

Ферментативный гидролизат

Триптический пептон (серия 76)

5,2-10 1,1 10

1,1-103 1,010

1,8-10 1,5.10