Способ определения активности жирорастворимых антиокислителей Советский патент 1988 года по МПК G01N7/18 

4

ел

Изобретение относится к биотехнологии и касается способов определения. Целью изобретения является повьшение точности определения и уменьшение трудоемкости способа. Это достигается тем, что жирорастворимые антиокислители растворяют в субстрате, содержащем производные высших жирных кислот, окисляют : субстрат с исследуемым веществом и без него барботированием воздухом с отводом последнего, измеряют содержание продуктов окисления, строят кинетическую кривую, находят по ней период индукции и устанавливают по значению последнего активности анти- оксиданта, причем измерение содержания продуктов окисления проводят в отводимом воздухе, а в качестве продуктов окисления исследуют углеводородный газ, причем, если образуется несколько газов,определяют тот, содержание которого вьше. 1 з.п, ф-лы, 1 табл. о (О W с:

ел

с

Изобретение относится к биотехнологии и касается способов определения: .

Цель изобретения - повьппение точности определения и уменьшение трудоемкости способа.

Способ осуществляют следукхцим образом.

Раствор исследуемого вещества в субстрате и чистьй субстрат, служащий контролем, помещают в герметичные камеры, сделанные из тефлона или другого инертного материала. Камеры подключают к обогатительному устрой- ству. Обогатительное устройство включает в себя коммутирующие вентили и обогатительные колонки. Коммутирующие, вентили имеют два положнения: Сорбция и Десорбция. Воздух от компрессора поступает в камеры, бар- ботирует образцы и поступает на со- ответствукяцее коммутирующее устрой- 1 ство, В положении коммутирующего I устройства Сорбция воздух попада- Г ет в обогатительную колонку, а в : положении Десорбция через соответ- : ствующий ротаметр выходит в атмос- i феру, В положении Десорбция соот- I ветствукяцего коммутирующего устройст I ва через обогатительную колонку бу- I дет проходить азот, являющийся газом носителем газового хроматографа. Для определения содержания углеводо- 1 родных газов в воздухе, прошедшем через камеру, соответствующее коммутирующее устройство переводят в положение Сорбция, одновременно соответствующую обогатительную колонку погружают в сосуд с жидким азотом. При этом углеводородные газы, содержащиеся в воздухе, барботирующем окисляемые образцы, будут сорбиро ваться в соответствукяцей обогатительной колонке. Сорбция углеводород ных газов в обогатительных колонках, погруженных в жидкий азот, происходи рследствие того, что температура кипения углеводородньпс газов значительно вьше температуры кипения азо

та, следовательно, углеводородные газы должны конденсироваться в обогатительной колонке. Продолжительность периода сорбции углеводородных газов выбирают произвольно в пределах 5-30 мин. Нижний предел длительности периода сорбции обусловлен временем, необходимым для установления равномерного тока воздуха

ю 5 20 25 30 35 0

0

5

в обогатительной колонке после ее погружения в жидкий азот, По окончании периода сорбции соответствующую обогатительную колонку вынимают из сосуда с жидким азотом и переносят в специальную печку, придаваемую к обогатительному устройству. Одновременно, соответствукяций коммуТирукщий вентиль переводят в положение Десорбция. При нагреве обогатительных колонок углеводородные газы де- сорбируются и с током азота увлекаются в газовьй хроматограф. Полученная при этом хроматограмма фиксируется на самописце, на ленте самописца отмечают время проведения сорбции и десорбции. По высоте пиков углеводородных газов можно судить о их содержании в воздухе, прошедшем через окисляемые образцы, в течение периода сорбции. Для упрощения построения кинетической кривой окисления длительность периода сорбции выбирают одну и ту же для всех образцов и используют в течение всего анализа. Для построения кинетической кривой окисления данного образца по оси ординат откладывают высоту пика углеводородного газа, а по оси абсцисс - время, соответствующее сег;- редине периода сорбции, для которой была получена соответствующая хроматограмма. Определение периода индукции окисления и расчет значения активности антиокислителя проводят аналогично известному.

Пример. Для проверки адекватности предлагаемого способа определения АОА жирорастворимого вещества проводят параллельное измер ение ;. АОА синтетического антиокснданта ионо ла по предлагаемого способу и по известному. В качестве субстрата используют линетол, температ фа субстрата . Скорость тока воздуха барботи- рующегоокисляемые образцы, 100 мл/мин. Определение АОА проводят для трех концентраций раствора ионола в лине- толе; , 10 М и , В образцах, где определение АОА провот дят по известному способу, начальный объем раствора составляет 5 мп, пробы для определения содержания гидроперекисей в субстрате отбирают два раза в час по Oj2 мл. В образцах, анализируемых по предлагаемому способу, объем раствора составляет 1 мл, продолжительность периода сорбции 5 мин, частота проведения измерений один раз в 10 мин. Строят кинетические кривые окисления, полученные обоими с пособами. Кинетические кривые окисления, полученные для растворов ионола различной концентрации по предлагаемому способу практически совпадают с кривыми, полученными по известному. Совпадение кинетических кривьк окисления свидетельствует об адекватности предлагаемого способа определения АОА. Значения периодов индукции для растворов ионола в различной концентрации и расчетные значение. АОА ионола приведены в таблице.

Как видно из таблицы значения АОА ионола, полученные обоими способами, практически совпадают. При этом средняя квадратичная ошибка определена АОА по предлагаемому способу меньше, а следовательно, точность определения больше. Большая точность достигается тем, что по предлагаемому способу при построении кинетической кривой окисления используется большее число точек. В данном примере частота определения продуктов окисления при измерении АОА по пред™ лагаемому способу в три раза выше, чем по известному способу. За счет увеличения частоты определения продуктов окисления уменьшается систематическая ошибка определения периода индукции, а следовательно, и ошибка определения АОА. Помимо этого, при определении продуктов окисления по содержанию углеводородных газов в воздухе, прошедшем через окисляемые образцы, происхбдит автоматическое усреднение результата определения. Это усреднение достигается за счет того, что измеренное содержание углеводородных газов соответствует целому периоду сорбции.

Кроме того, при определении А.ОА жирорастворимого вещества по предла - гаемому способу уменьшен, по сравне- никз с известным, объем образца. Сле- ,довательно, при равной концентрации исследуемого вещества в субстрате предлагаемый способ позволяет уменьшить количество необходимого для определения, вещества. Это особенно важно при определении АОА липидов, так как позволяет уменьшить объем биологического материала, из которого экстрагируются липиды. Очевидно, что уменьшение объема при определении АОА по предлагаемому способу

g достигается за счет того, что при определении содержания продуктов окисления по содержанию углеводородных газов в воздухе, прошедшем через окисляемые образцы, отпадает необ-

0 ходимость отбора проб из образца. Постоянный объем образца при определении АОА по предлагаемом способу уменьшает вероятность ошибки, возникающей при определении АОА по из-

5 вестному, за счет изменения парциального давления кислорода в уменьшенном, по сравнении с начальным, объеме образца.

Кроме того, предлагаемьй способ

0 определения АОА менее трудоемок, так как несмотря на необходимость большого числа измерений, сами процедуры по измерению содержания углеводородных газов в воздухЗу прошедшем

5 через окисляемые образцы, очень просты и сводятся к переключению комьг5, - тирующих вентилей. При опислен1т субстрата может выделяться или один, или несколько углеводородных газов«

0 В предлагаемом способе определение содержания углеводородов проводят с помощью газового хроматографа, поэто ry по хроматограмме можно сразу определить, каке газы выделяются при

окислении используемого субстрата В приведенном примере, в качестве субстрата использовали линетол (смесь этиловьк эфиров жирных кислот) . При окислении линетола вьще-

0 лились этан и этилен, причем содержание этана значительно превьшгапо содержание этилена, поэтому о содержании продуктов окисления в субс т- , рате судили по содержаник этана -При

д использовании другого субстрата могут вьщеляться другие газы, причем при выделении нескольких газов определяют тот, содержание которого вьпле.

Предлагаемый способ позволяет по- 0 высить т.очность определения в 45 раз и исключить операции многократного отбора аликвот, титрования гидропег екисей.

5 Формула изобретения

1 о Способ определения активности жирорастворимых антиокислителей, включающий растворение их в субстpare, ссгдержащем производные высших жирньк кислот, окисление субстрата с исследуемым веществом и без него барботированием воздухом с отводом последнего, измерение содержа ния продуктов окисления, построение кинетической кривой окисления, нахождение по ней периода индукции окисления и установление по значению пос- леднего активности антиоксиданта, отличающийся тем, что, с

10

,-4

0

г

. 0,00 0,11 0,22 0,44

37-1,8

81-1,6

128-1,4

216-1,4

400,0-18,2 413,6-12,4 406,8-8,2

целью повышения точности определения и уменьшения трудоемкости ба, измерение содержания продуктов окисления проводят в отводимом воздухе, а в качестве продуктов окий- ления исследуют углеводородный газ. 2. Способ по П.1, отличающийся тем, что при образовании в процессе окисления нескольких углеводородных газов определяют тот содержание которого выше.

400,0-5,1 404,5-4,4 404,5-2,1