Способ получения стабилизированной формы папаина Советский патент 1988 года по МПК C12N11/08 

4ib

ю ч

vj

П р и м е р 4. Процесс осуществляется так же, как в примере 1, за исключением того, что на 100 мг АД добавляется 240 мг цистеина, молярное соотношение АД:Ц 1:1000, С носителем связьшается 90% белка, сохраняемая эстеразная активность 5%, содержание белка 25%, количество SH-групп на

Изобретение относится к медицине, а именно к биомедицинской химии, и касается способа получения стабилизированной формы папаина, . ,

Цель изобретения - повьппение специфичной активности.

Пример 1. 100 мг альдегид, - дбкстраиа (АД) растворяют в 3 мл .0,02 М фосфатного буфера рН 6,0 и до-ю моль фермента 33,

бавляют 24 мг цистеина (Ц) в 1 мл то- Предлагаемый способ получения мо- го же буфера. Молярное соотношение АД:Ц 1:100, Через 10 мин перемешивания добавляют 20 мг очищенного папаина в 1 мл 0,02 М фосфатного буфера 15 водорастворимый иммобилизованный пре- (рН 6,0), Смесь инкубируется при пе- парат молекулярной массы 55-85 .тыс, с ремешивании в течение 20 ч при , в. затем проводят восстановление продукта боргидридом натрия,После этого

дифицированных апьдегиддекстраном . производных папаина с защитным цистеи- новым окружением позволяет получать

остаточной катсшитической активно- стью 30-80% от первоначальной, когда с носителем связьшается до 90% белка.

модифицированное прои зводное фермен - 20 содержание SH-rpynn 2,0-30,0, и

П р и м е р 4. Процесс осуществляется так же, как в примере 1, за исключением того, что на 100 мг АД добавляется 240 мг цистеина, молярное соотношение АД:Ц 1:1000, С носителем связьшается 90% белка, сохраняемая эстеразная активность 5%, содержание белка 25%, количество SH-групп на

моль фермента 33,

Предлагаемый способ получения мо- водорастворимый иммобилизованный пре- парат молекулярной массы 55-85 .тыс, с

дифицированных апьдегиддекстраном . производных папаина с защитным цистеи- новым окружением позволяет получать

Предлагаемый способ получения мо- водорастворимый иммобилизованный пре- парат молекулярной массы 55-85 .тыс, с

остаточной катсшитической активно- стью 30-80% от первоначальной, когда с носителем связьшается до 90% белка.

Изобретение относится к медицине, точнее к биомедицинской химии, касается способа получения стабилизированной формы папаина. Цель изобретения - повышение специфической активности. Для этого порцию альдегиддекст- рана (АД) растворяют в 0,02 М фосфатного буфера рН 6,0 и добавляют цис- теин (Ц) в 1 мл того же буфера. Молярное соотношение АД:Ц 1:100. Через 10 мин перемешивания добавляют очищен- ньш папайи в 1 мл 0,02 М фосфатного буфера рН 6,0. Смесь инкубируют при перемешивании 20 ч при 4°С, затем восстанавливают продукт боргидратом натрия. Затем модифицированное производное фермента вьщеляют на системе ульт- рафипьтрации и мофйльно высушивают, С носителем связывается 90% белка от исходного количества, сохраняемая препаратом эстеразная активность 30%. Содержание белка 25%, кол-во SH- групп на моль фермента 2,16, (Л с

та выделяется на системе ультрафильтрации Amicen с фильтром УМ-20 и пио- фильно высушивается, В результате эксперимента с носителем связывается 90% белка от исходного количества, 25 Сохраняемая препаратом эстеразная активность 30%, Содержание белка 25%, количество SH-rpynn на моль фермента 2,16.

Пример 2, Процесс осуществля-зо Рат по известному способу обладает ется так же, как в примере 1, за иск- менее выраженным литическим эффектом лючением того, что на 100 мг АД добавляется 72 мг цистеина, молярное соотношение АД:Ц 1:300. С носителем связьшается 90% белка, сохраняемая эстеразная активность 70%, содержание белка 25%, количество SH-rpynn н моль фермента 4,32, Полученный

при исходном соотношении альдегиддек.- стран:цистеин от 1:100 до 1:1000,

При местном применении для лечения поражения глаз папаина,полученного по предлагаемому способу, уже к концу 3-х суток констатируется практически полное исчезновение крови в передней камере глаза, в то время как препаи его воздействие на поражение глаз менее эффективно (тотальная гефема залечивается в срок не менее 1.0 сут je при этом наблюдаются побочные явления : гиперемия коньюнктивы, начальные явленй кератита и т.д.

препарат является оптимальным по своим свойствам в ряду предлагаемых мо- дифицированных производных папаина.

П .р и М е р 3, Процесс осуществляется так же, как в примере 1, за исключением того, что на 100 мг АД допри исходном соотношении альдегиддек.- стран:цистеин от 1:100 до 1:1000,

При местном применении для лечения поражения глаз папаина,полученного по предлагаемому способу, уже к концу 3-х суток констатируется практически полное исчезновение крови в передней камере глаза, в то время как препаРат по известному способу обладает менее выраженным литическим эффектом

и его воздействие на поражение глаз менее эффективно (тотальная гефема залечивается в срок не менее 1.0 сут), при этом наблюдаются побочные явления : гиперемия коньюнктивы, начальные явленй кератита и т.д.

Формула изобре Т-ег)н и я

Способ получения стабилизированной формы папаина путем его присоединения к носителю, отличающийся тем, что, с целью повьш1е