Штамм бактерий РSеUDомоNаS FLUoReSceNS используемый для биологической очистки сточных вод от ароматических нитросоединений Советский патент 1988 года по МПК C12N1/20 C02F3/34 C12N1/20 C12R1/39 C02F3/34 C02F101/30 

4

to

со сд

QG СП

Изобретение относится к биотехнологии и касается нового Н1там.ма бактерий, который может быть использоЕван для биологической очистки сточных вод от ароматических нит- росоединений на анаэробной стадии обработки.

Цель изобретения - нолучение нового штамма бактерий, способного в сообществе с микрофлорой денитрофицирующего активного ила осуществлять деструкцию при более низкой температуре, что, в свою очередь, позволяет снизить себестоимость процесса биологической очистки.

Штамм Pseudomonas 1цоге&сеп5 ВКПМ В-3468 (С 9) селекционирован из дикого типа, выделенного из очистных сооружений предприятия органического синтеза, и обладает следуюи ими свойствами.

Л орфолого-культуральные признаки. Колонии плоские, круглые, 3-6 мм в диа.метре; бесцветные, слизистой консистенции; край фестончатый. Палочки одиночные, подвижные, размерами 0,6-0,7; 2,0-2,6 мкм. Штамм продуцирует зеленый флуоресцирующий пигмент, диффундирующий в среду. Способен расти на среде с нитратами, вести денитрификацию. Растет при 25-30°С.

Физиолого-биохимические признаки. Ка- талазная и оксидазная реакции - положительны. В качестве единственного источника углерода и энергии использует: D-арабинозу, D-ксилозу, сахарозу, глюкозу, трегалозу, маннозу, ацетат, малонат, сукцинат, фума- рат, глутарат, малат, лактат, цитрат, сс-ке- тоглутарат, пируват, маннит, сорбит, инозит, этанол, D-L-аланин, лейцин, валин, лизин, аргинин, глутамат.

Штамм обладает высокой активностью при очистке сточных вод от 2,4,6-тринитро- толуола (ТНТ) и нитратов.

Активность (продуктивность) щтамма: за 72 ч роста на среде, содержащей 5 г/л NaNOa 0,18-0,2 г/л ТНТ, 6 мл/л метанола, щтамм восстанавливает 3-3,5 г/л NaNOs и 0,13-0,15 г/л ТНТ.

Концентрацию нитрат-ионов при работе итамма определяют с помощью нитрат- селективного электрода марки ЭМ-МОз-01; 2,4,6-тринитротолуол определяют стандартным методом, а также с помощью газово- жидкостной хроматографии на приборе Chrom 4 с пламенно-ионизационным детектором с использованием 10% SE-30 на Хро- мосорбе 100-120 мещ. Газ носитель - гелий. Скорость газовых потоков, мл/мин: водород 35; гелий 30. Температура термостата 200°С, испарителя 300°С.

Способ, условия и состав сред для длительного хранения штамма: пересев 1 раз в год на столбик МПА. Рост в течение 2 сут. Хранить под вазелиновым маслом.

Способ, условия и состав сред для размножения щтамма: культивирование в колбах на 100 мл и с 30 мл МНБ в течение 1 сут.

5

Изобретение заключается в том, что новый селекционированный щтамм С 9 в анаэробных условиях при 20-30°С, иммобилизованный на стекловолокне в количестве 80% от общего количества находящихся на нем микроорганизмов активного ила, развивается с одинаковой для них скоростью, что позволяет осуществлять процесс деструкции при более низкой температуре, чем 50- 55°С. При этом полученное сообщество мик- 0 роорганизмов состоит из следующего соотношения, входящих в него видов, %: Р. fluorescens80

Р. pubida7-8

Р. stutzeri2

Р. testosteroni3

Р. menolocina5

Вас. anthracoides Вас polymyxa1-2

Oidium lacbis

Примеры использования штамма для 0 очистки реальных сточных вод.

Пример . Сточные воды цеха по производству нитростирола (НС) содержат до 200 мг/л НС и до 80 мг/л нитратов (по азоту) Промыщленные сточ1 ые воды подают в модельную установку, состоящую из анаэроб- ной и аэробной колонок. В колонки погружен носитель в виде ершей из стекловолокна, на котором закреплено специально селекционированное сообщество микроорганизмов. Сообщество на 80% состоит из Р. fluo- ,- rescens В-3468. Обработку промышленных сточных вод в анаэробных условиях проводят с добавлением большого количества метанола или этанола или ацетона (НС: легкоусваиваемое вещество 1:10). Нагрузка на 1 г сухого вещества биомассы не пре- г вышает 30 мг в сутки. Температура в анаэробном сооружении 20-25°С.

Результаты по динамике процесса деструкции приведены в табл. 1.

Из данных табл. 1 видно, что при 20- 0 25°С и времени анаэробной обработки 12 ч достигается 95%-ное удаление НС и 96%- ное нитратов. П1ри минимальном времени обработки (6 ч) не достигается нужная степень очистки. При увеличении времени обработки эффективность очистки остается на том же уровне.

Прометок после анаэробной обработки направляется в аэротенк с адаптированной микрофлорой, где через 16-18 ч аэрации очищенная сточная жидкость имеет ВПК Г-. полное не более 25-20 мг/л. НС не обнаруживается.

Пример 2. Сточные воды цеха по производству 2,4,6-тринитротолуола (ТНТ) содержат до 160-200 мг/л ТНТ и до 100 мг/л нитратов (по азоту). Обработку стока ведут 5 как указано в примере 1.

Результаты приведены в табл. 2.

Как видно из данных, приведенных в табл. 2, при 20-25°С и времени анаэробной

5

обработки 18 ч достигается 100%-ное удаление ТНТ и 97%-ное нитратов. После анаэробной обработки прометок направляется в аэротенк с адаптированной микрофлорой и после 18 ч аэрации очищенная сточная жидкость имеет ВПК полное менее 15 мг/л, ТНТ не обнаруживается.

Формула изобретения

Штамм бактерий Pseudomonas fluores- cens ВКПМ В-3468, используемый для биологической очистки сточных вод от ароматических нитросоединений.

Таблица 1

Изобретение относится к биотехнологии и касается нового штамма бактерий. который может быть использован для биологической очистки сточных вод от ароматических нитросоединений на анаэробной стадии обработки. Целью изобретения является получение нового штамма бактерий, способного в сообш,естве с микрофлорой денитрофицирующего активного геля осу- шествлять деструкцию при более низкой температуре, что, в свою очередь, позволяет снизить себестоимость процесса биологической очистки. Штамм Pseudomonas fluores- cens ВКПМ В-3468 (Cg) селекционирован из такого типа, выделенного из очистных сооружений предприятий органического синтеза, и способен при 20-25°С в концентрации порядка 80% от количества общей микрофлоры осуществлять на 97% деструкцию нитростирола и до 95% - нитратов. 2 табл. с S

6 12 18

6

12 18 26

52 95 95

66 96 97

Таблица 2

66 92 97 97