Способ предотвращения фаголизиса бактериальных культур Советский патент 1988 года по МПК C12N1/00 

4

СО

Изобретение относится к микроби- Ьлогической промьшленности, а именно к способам защиты бактериальных культур - продуцентов биологически активных соединений от фаголизиса.

Цель ю изобретения является снижение токсичности при выращивании культуры Ervinia carotovora.

Пример 1. В колбы объемом 300 мл вносят питательную среду - аминопептид с физиологическим раст- вором в соотношении 1;1 и посевную дозу опытной культуры Erwinia caroto vora, которзто предварительно синхронизируют, вьщерживая в течение 1 ч при 4°С. В опытные колбы вносят также 6 азацитидин в концентрациях 1 ,5 , 10, 50 мкг/мл. Колбы с материалом помещают на качалки и культивируют при 30°С. Через различные промежутки времени после начала культивирования для определения динамики роста бактерий и присутствия спонтанно продуцируемого культурой бактериофага отбирают пробы культуры. Динамику роста бактерий определяют по оптическо плотности бактериальной суспензии и по количеству жизнеспособных микроорганизмов (серийные разведения мик- роорганизмсв высевают на твердую питательную среду). Количество свободных фаговых частиц в этих пробах определяют методом двухслойньпс агаровых слоев с помощью индикаторной культуры для фага. Спонтанный выход фаговых частиц почти полностью подавляется в присутствии 6-азацитиди- на по сравнению с контролем при незначительном сш-отении плотности клеточной популяции. В то же время при использовании известного способа

5

0

5

5

0

предотвращение фаголизиса с помощью гексаметилендиизоцианата (внесенного 0,1% по объему) наблюдают почти полное подавление роста бактерий - продуцентов L-аспарагиназы.

Пример 2.В аппараты непрерывного культивирования микроорганизмов с рабочим объемом 1,5 л, стерипь- ной подачей воздуха 0,5 л/мин, скоростью вращения 200 об./мин вносят посевную дозу синхронизированной культуры Ervinia carotoirora (1/15 часть рабочего объема аппарата). и препарат - 6-азацитидин концентрации 50 мкг/мл. В качестве питательной среды используют смесь аминопептид и 0,15 М NaCl. Через различные промежутки времени отбирают пробы куль- туральной среды для определения динамики роста бактерий и спонтанно продуцируемого культурой бактериофага . Полученные результаты свидетельствуют, что, как и в случае выравнивания бактерий на качалках, данный препарат полностью подавляет спонтанный фаголнзис бактерий, В использования известного вещества отмечают почти полную инактивацию Ж1 чнеспособных бактерий.

Формула изобретения

Способ предотвращения фаголизиса бактериальных культур, включающий введение в культуральную жидкость протективного вещества, о т л и - чающий с я тем, что, с целью снижения токсичности при выращивании культуры Erwinia- carotovora, в качестве протективного вещества используют 6-азацитидин в концентрации: 1- 50 мкг/мл.

Изобретение относится к микробиологической промышленносуи, а именно к способам защиты бактериальных культур - продуцентов биологически активных соединений от фаголизи- са. Целью изобретения является снижение токсичности. Для предотвращения фаголизиса при выращивании культуры Ervinia carotovora в кулъту- ральную жидкость вводят б-азацитццин в концентрации 1-50 мкг/мл.