Способ защиты бактериальных культур от бактериофагов Советский патент 1979 года по МПК C12K1/00 

(54) СПОСОБ ЗАЩИТЫ БАКТЕРИАЛЬНЫХ КУЛЬТУР ОТ БАКТЕРИОФАГОВ руют при помощи оптического микроскопа. Титр фагов в момент внесения в колбы и в конце ферментации определяют- двуслойным методом на аг ризованной среде Хоттингера с последующей инкубацией чашек при 28с в течение 18 ч. Определение биологической активности выросших культур проводят на гусеницах пчелиной огневки семидневного возраста в те чение 6 дней при 28°С. 0,1% ГМДЦ не оказывает ингибирую щего действия на культуру и инакти вирует внеклеточный фаг. Пример 2. Исходную культур штамма Brevibacterium sp. 22Л выра щивают на среде № 3 в течение 24 ч при 28С. петлей переносят колбы, емкостью 250 мл, содержащие 10-30 мл посевной среды № 3. Соста среды 3 следующий: Меласса . 3,0 г Кукурузный экстракт 30,0 г NaCI4,0 г Вода водопроводная1,0 л Культуру инкубируют на качалке 240 об/мин в течение 18 ч при 28 Посевной материал в количестве 10 об/% .переносят в колбы вышеука занной емкости, содержащие 10 мл ф ментационной среды № 4; Меласса .160 г Кукурузный экстракт 30 г Аммоний хлористый 25 г Калий фосфорнокислый двузамещенный10 г Мел20 г Вода1л Одновременно с посевным материалом вносят препарат фага в конечной концентрации, не менее I-IO фаг. част/мл и ГМДЦ в концентрации 0,1 об/% Ферментацию проводят на качалке при 28°С в течение 72 ч. Количество образовавшегося лизина определяют методом хроматографии. Уровень накопления .биомассы определяют по изменению оптической плотности на ФЭК-56.. Титр фага в момент внесения и по окончании ферментации определяют аналогично примеру 1, 0,1% ГМДЦ инактивирует внеклеточный фаг, несколько снижая рост биомассы и выход продукта. В процессе ферментации ГМДЦ гидролизуется на гексаметилендиамин, который менее токсичен и вовлекается в метаболизм бактерий. Использование предлагаемого способа поз-волит ликвидировать фаголизис при промышленном синтезе биологически активных веществ. Формула изобретения Способ защиты бактериальных культур от бактериофагов, путем введения в питательную среду фагоинактивирующего агента, отличающийся тем, что, с целью повышения зффективности способа, в качестве фагоинактивирующего агента используют гексаметилендиизоцианат. Источники информации, принятые .во внимание при зкспертизе 1. Патент Франции № 2242462, кл. С 12 В 1/24, 1976.