Изобретение относится к способу получения новых химических биологически активных соединений, в частности к новым полициклическим ароматическим производным алканола или его моноалкилового простого эфира или его соли кислоты, обладающих биоцидной активностью, в частности противоопухолевой активностью.
Указанное свойство предполагает возможность применения этих соединений в медицине.
Цель изобретения - получение новых полициклических ароматических производных алканола, проявляющих новый вид биологической активности в ряду производных 1,3-пропандиола - биоцидной.
сн
10
15
20
25
31466648
Пример 1. 2-f(6-Хризенил- метил)амино -2-метил-1,3-пропандиол- метансульфонат.
В круглодонную колбу, снабженную холодильником, барботером для пропускания азота и магнитной мешалкой, вводят 6-хлорметилхризен (13,3 г, 48 ммоль), 2-амино-2-метил-1,3-про- пандиол (10,5 г, 0,1 моль), (13,8 г, 0,1 моль) и абсолютный этиловый спирт (500 мл). Смесь нагревают с обратным холодильником со стеканием флегмы в течение 6 ч, охаждают и концентрируют, в результате получают белое твердое вещество, которое взбалтывают вместе с горячей водой (500 мл) и фильтруют. вердое вещество дополнительно проывают теплой водой (2 х 500 мл), затем отсасывают в полутвердом состоянии через фритту. Твердое вещество ра створяют в смеси абсолютного этилового спирта (400 мп) и CHjSO H (4 мл), фильтруют через среду порис- то-й спекшейся стекломассы (фритту) и разбавляют до 2 л простым диэти- овым эфиром (). Полученное твердое вещество далее два раза ристаллизуют из смеси абсолютный этиловый спирт/диэтиловый эфир (1:1), ильтруют и оставляют в вакууме в ечение ночи. Получают 2- (6-хризе- илметил)аминоЗ -2-метил-1,3-пропан- иолметансульфонат с выходом 6,87 г (32,4%), т. пл. 226-227°С (с разложе- ием).
Примеры 2-27. Используя етодику примера 1, получают соединения, указанные в табл. 1.
При испытаниях биологической акивности новых соединений использо-. али известные методы оценки противопухолевой активности. Некоторые изенения в количестве соединения в дной дозе и в графике приема бьши деланы с целью увеличения эффективости испытания.
Испытание против лимфоцитной лейемии Р388/0,
В этом испытании-использовали мы- шей СД2-Р одного и того
30
45
50
i и и ч ui D же пола, вес которых составлял 20,3 г. Контрольным и испытываемым животным в день О внутрибрюшинным способом вводят 10 живых клеток опухоли Р388/0. В каждом испыта.нии используют несколько уровней доз с тем, чтобы можно было оценить также величину для
55
кa до ва ли во Тв /де ня со оп мг ка ги де гр вр ко
зн
в
та по че им 10 шт те ну
шь им то че по хо со ль 10 ос ре бр До же Фи пр ют в
в
до шт
0
5
0
5
Q
0
5
0
5
кaж l;oгo соединения, группа для каждой дозы.состоит из 6 животных. Испытываемые соединения приготавливают либо в физиологическом соляном растворе, содержащем 0,05% соединения Твин 80, либо в дистиллированной во- /де, содержащей 5% декстрозы,и применяют к животным внутрибрюшинным способом на 1,5 и 9 день имплантации опухоли. Дозы определяют на основе мг/кг, в зависимости от веса тела каждого животного. Фиксируют день гибели для каждого животного, определяют среднее значение для каждой группы и вычисляют отношение, среднее время жизни для обработанной (Т) и контрольной (с) групп.
Критерием активности является значение Т/С х 100 120%.
Результаты испытаний приведены . 2.
Лимфоцитная лейкемия 1210. Процедура проведения этого испытания идентична той, что бьша использована для Р388/0 за тем исключением, что число клеток L 1210, имплантированных в день О, составило 10 /мышь. В испытании использованы штаммы мыши Cb2-F, а в качестве критерия активности использовали величину Т/С х 100 125%.
Результаты сведены в табл. 3. Меланотическая меланома В16. В этом испытании используют мышьи B6C3-F одного и того же пола, имеющие вес 20 + 3 г. Суспензию клеток В16 приготавливают из ненекротической части твердой ткани опухоли, полученной из мьшщ донора. 1 г опухоли подвергают гомогенизации в 9 мл соляного раствора Ирла, охлаждаемого льдом, и фильтруют через сито в 100 меш (0,149 мм) с целью удаления остатков ткани; 0,5 мл полученной в результате жидкости вводят внутри- брюшинным, методом каждому животному. Дозировку осуществляют в точности так же, как в испытаниях Р388/0 и L1210. Фиксируют день гибели животного на протяжении 60 дней, а затем вычисляют отношение Т/С, как это делалось в испытаниях Р388/0 и L1210.
Результаты испытаний В16 сведены в табл. 4.
Испытание против саркомы М5076. Этот тип саркомы имеет вид твердой опухоли, появляющейся у мышей штамма С57В 1/6 в яичниках, и в
дальнейшем ее перерабатывают в ас- цитную форму для внутрибрюшинного использования. Процедура этого испытания идентична той, что применялась для Р388/0, при этом использовали штамм мьш1ей ВбСЗ-F , а критерием активности служила величина Т/Сх X 100 7/125%.
Результаты сведены в табл. 5.
Испытание против карциномы колоа
38.
Эту опухоль выраш 1вают у мьшей штамма G 57В 1/6 химическим способом, а затем поддерживают в виде твердой опухоли. Выращенную твердую опухоль затем вырезают в асептических условиях у мьшш-донора и помещают в стерильный соляной раствор. Опухоль освобождают от некротических и соединительных тканей, затем разрезают на кубики размером 2-3 мм. Каждый кубик имплантируется подкожным способом в брюшную торакальную область в стерильных условиях в день .0. В каждом испытании применяют несколько доз с тем, чтобы можно бьшо оценить величину LDj для каждого соединения. В группе для каждой дозы использовали десять животных, а в необработанной контрольной группе было 30 животных. Испытываемью соединения готовили либо в физиологическом соляном растворе, содержащем 0,05% соединения Твин 80, либо в дистиллированной воде, содержащей 5% декстрозы, а затем их вводили внутрибрюшинным способом на 1, 5 и 9 день после имплантации опухоли. Дозы определяли на основе мг/кг в соответствии с весом каждого животного На 20 день животных усыпляли и при помощи мерной вилки Верниера измеряли наибольшие (L) и наименьшие (W) размеры каждой опухоли. Вес опухоли рассчитывали из формулы L(W) 2/2. критерием активности являлось значение Т/С. X 100 42%.
Результаты приведены в табл. 6 Испытание против карциномы легки
Льюиса.
Эта опухоль возникает спонтанно в легких мьшш С57В1/6 и ее поддерживают при помощи трансплантации под кожу в данном штамме. Твердую опухоль вьфезают в асептических условиях и помещают в стерильный соляной раствор. Кусочки живой ткани опухоли тонко измельчают при помош нож
5
0
5
0
5
0
5
0
5
ниц и продавливают через сито из нержавеющей стали в 200 меш (0,074 мм) с тем, чтобы можно было получить из клеток ткани опухоли суспензию. 10 живых клеток вводят внутривенным способом в хвостовую вену мьш1ам BD-FI одного и того же пола весом 20+3 г. В каждом испытании использовали несколько доз.с тем, чтобы можно было оценить величину ДЛЯ каждого соединения. В группу для каждой дозы входило 10 животных и 20 животных быпо в необработанной контрольной группе. Испытываемые соединения приготавливали и применяли в соответствии с процедурой, описанной в испытании для Р388/0. Фиксировали день гибели для каждого животного, определяли среднее значение для каждой группы и вычисляли отношение среднего времени жизни для обработанной (Т) и контрольной (с) групп. Критерием активности служило значение Т/С X 100 / 140%.
Результаты сведены в-табл. 7.
Испытание против Herpes simplex 1 /ve.ro.
Противовирусное испытание против Herpes simplex 1/vero было осуществлено с использованием известных методов ингибирования на пластинке и известных методов восстановления на пластинке. Оценка токсич- нось и зона ингибирования относятся к испытанию методом ингибирования на пластинке, а 1С5о относится к испытанию методом восстановления на пластинке .„
Результаты противовирусной активности против Herpes Simplex 1/vero приведены в табл. 8.
Испытание против Candida albicans. Противогрибковое испытание против Candida albicans (CN ) осуществляли с небольшими изменениями с использованием известной комбинации анализов с разбавлением бульона и агара.
Результаты испытания даны ниже: Соединение по Минимальная примеру ингибирующая концентрация МИК, мг/л
1100
1230
10
15
Среда: агар для испытания чувствительности Уэллкотеста плюс 7% лизи- рованной крови лошади.
Антибактериальное испытание против Mycoplasma smegmatis (S 3264) и Streptococcus pyogenes.
(CN 10) бьшо осуществлено с небольшими изменениями с использованием стандартных анализов, связанных с разбавлением агара.
Результаты антибактериального испытания против Streptococcus pyogenes (CN 10) для соединения примера 1 показали МИК (мг/л) 10.
Результаты испытания против Mycoplasma smegmatis даны ниже:
Соединение МИК, мг/л
по примеру
Испытание против Trichomonas vagi- nalis.
Испытание против простейших Tri- choraonas vaginalis было осуществлено с использованием известных в лабораторных условиях.
Результаты даны в табл. 9 (среда Стентона или модифицированная среда Диамонда).
Испытание против Nippostrongylus brasiliensis.-
Активность против червей Nippostrongylus brasiliensis (зрелые стадии
2 25
250 110
Формула изо б.
р е т е н
Способ получения полицикличес ароматических производных алканол общей формулы
RI ArCH qH-c-R2
R -C-RS он
где Аг выбран из групп
25
30
развития) анализировали с использова-, ЛИ С -С -алкокси, которые кием известных методов.. могут быть замещены атомом хлора
кием известных методов. Результаты даны ниже:
незамещенных или замещенных одним или двумя заместителями, которые, взятые вместе, содержат до 4 ато углерода и, которые метут быть ка одинаковыми, так и различными, вы раны КЗ группы, содержащей циано- группу, атом брома или хлора, С -алкил или С -С -алкокси, которые
Соединение по примеру
8
3
2
МИК, мг/л
50 50
50
оксигруппой, или группу
40
Испытание против Eimeria tenella.
Активность против простейших Eimeria tenella анализировали в лабора- 45 торных условиях с использованием известных методов.
Результаты даны в табл. 10.
Результаты испытания с целью определения для выбранных соеди- нений (IP, одной дозой - CD-I самец мьшш) приведены ниже:
Соединение LDjo, примера мг/кг
118255
1140
4100
3160
),R,
где п О или 1 i
5 С -Сг-алкил, незамещенный
или замещенные оксигруппой
RI - oкcимeтил
R, - водород или С -С -алкил
Rj водород или метил;
R ) - водород, или группа
-С
RI
он
представляет собой 2,6-циклогекс.ан диол, или его моноалкилового С -С простого эфира или его соли кислот
8
2 25
250 110
Формула изо б.
р е т е н и я
Способ получения полициклических ароматических производных алканола общей формулы
RI ArCH qH-c-R2
R -C-RS он
где Аг выбран из групп
ЛИ С -С -алкокси, которые могут быть замещены атомом хлора
незамещенных или замещенных одним или двумя заместителями, которые, взятые вместе, содержат до 4 атомов углерода и, которые метут быть как одинаковыми, так и различными, выбраны КЗ группы, содержащей циано- группу, атом брома или хлора, - -алкил или С -С -алкокси, которые
ЛИ С -С -алкокси могут быть замещены атом
оксигруппой, или группу
),R,
где п О или 1 i
5 С -Сг-алкил, незамещенный
или замещенные оксигруппой,
RI - oкcимeтил
R, - водород или С -С -алкил
Rj водород или метил;
R ) - водород, или группа
-С
RI
он
представляет собой 2,6-циклогекс.ан- диол, или его моноалкилового С -С простого эфира или его соли кислоты
An « антраценил, FI -- фторантенил; Et - этил Ch - хризения; М/ЁЕ - ивтанол/днэтиловый простой эфир, Е/ЕЕ f- ,этанол/диэтиловый простой эфир.
111466648
Таблица 2.
12 Таблица 5
Т а б л Pi и а 9
Таблица 10
Изобретение касается оксиами- нов, в частности способа получения полициклических ароматических производных алканола общей формулы Ar-CH -NH-CR.Rj-CR R -OH, где R , - R, - Н или С -Сг-алкил; И з - Н или СНз , R4 Н или группа: является 2,6-циклогексан- диолом Аг - 1-антрил, 9-антрил, 6- -хризенил или 7-флуорантенил, которые могут быть моно- или дизамещены равными или разными заместителями, содержащими до 4-х атомов углерода и выбранными из ряда: CN, Вг, С1, C -Cj-алкил или С -С -алкоксигруппа (они могут быть замещены С1, ОН), S(0)f,R5 при п 0-1 и R - С, -алкил (он может быть замещен ОН), или его простого моноалкилового С -С -эфира или его соли с кислотой. Синтез целевых соединений ведут реакцией соединений формул II и III, Ar-CHj-L (II) и NHj-CR R -CRjR -OH (III), где Аг, R,, R, R, R имеют указанные значения, L - галоген или производное сульфокислоты, в присутствии К-СО- в среде этанола и атмосфере NJ в течение 6 ч. Новые соединения обладают активностью в отношении лимфоцитной лейкемии, мелано- мы, саркомы, карциномы, герпеса, грибов, бактерий, простейших при токсичности ДЦ JQ 82-250 мг/кг. 10 табл. i СО а а О5 4 00
Оценка испытания О - ингибиро- вание не отмечено, -1 - ингиби- рование составляет 1-25%, -2 - ингибиро ание составило 26-50%, -3 ингибирование составило 51-75%, - 4 ингибирование составило 76-100%.
Оценка испытания О - ингибирование отсутствует, - 1 - ингибирование составляет 25%, -2 - ингибирование составляет 26-50%, -3 - ингибирование составляет 51-75%, -4 - ингибирование составляет 76-100%.
| Бюлер К., Пирсон Д | |||
| Органические синтезы | |||
| М | |||
| : Мир, 1973, ч | |||
| Печь для непрерывного получения сернистого натрия | 1921 |
|
SU1A1 |
| Способ получения целлюлозы из стеблей хлопчатника | 1912 |
|
SU504A1 |
