Способ выделения опаковой формы кукурузы Советский патент 1989 года по МПК A01H1/04 

1

Изобретение относится к сельскому хозяйству, к генетическим исследованиям зерновых культур и может быть использовано для селекционной оценки зерна с целью выявления опаковых форм кукурузы.

Цель изобретения - упрощение и ускорение процесса выделения.

На чертеже представлены спектры исходной 1 и опаковой 2 форм кукурузы.

Способ осуществляют следующим образом.

Образец размолотого зерна кукурузы обрабатывают водой при 0-25°С 15-60 мин с получением белковой фракции, которую очищают от механических примесей центрифугированием и фильтрованием. Анализ раствора образца в оптической кювете ведут по спектру кругового дихроизма в области 205-240 нм. По полученным данным определяют опаковую форму кукурузы по возрастанию оптической плотности при 221-230 нм по сравнению с оптической плотностью при 208-215 нм. Определение проводят параллельно, используя спектры кругового дихроизма водорастворимой вытяжки исходной (кривая 1) и опаковой

(кривая 2) форм кукурузы. В качестве исходного материала для испытания использовано зерно обычной и высоколизиновой кукурузы (линии W 155; Wf 9; А 204; W 64A).

Пример 1. К 2,5 г муки кукурузы линий А 204+/ + и А 204о2/о2 прибавляют 10 мл воды, выдерживают 60 мин. при 4°С, центрифугируют 20 мин при 3000 об/мин, фильтруют, раствор белковой фракции помещают в 0,1 см кювету и получают спектр кругового дихроизма в области 205-240 нм.

Результаты определения соотношения оптических плотностей линий кукурузы приведены в таблице.

Приведенные в таблице результаты свидетельствуют, что для опаковой формы наиболее существенные отличия наблюдаются в возрастании оптической плотности при 221-230 нм по сравнению с оптической плотностью при 208-215 нм. Анализ с использованием значений оптической плотности ниже 208 нм не дает достоверных различий между исходной и опаковой формами кукурузы, а при определении опти(Л

Ј J

СО

о ю

00

ческой плотности выше 230 нм приходится анализировать незначительные изменения определяемых величин, что снижает достоверность оценки.

Пример 2. К 2,5 г муки кукурузы линии W 155+/+ и W 155о2/о2 прибавляют 10 мл воды, выдерживают 15 мин при 5°С, центрифугируют 20 мин при 3000 об/мин, фильтруют, раствор белковой фракции помещают в 0,1 см кювету, получают спектр кругового дихроизма в области 205-240 нм и определяют отношение оптических плотностей при 223 и 210 нм.

. W 155+/+.W 155o2/o2

3,38± 1,40012,47±0,871

Пример 3. К 2,5 г муки кукурузы линии W 64А+/ + и W 64Ao2/o2 прибавляют 10 мл воды, выдерживают 30 мин при 0°С, центрифугируют 20 мин при 3000 об/мин, фильтруют, раствор белковой фракции помещают в 0,1 см кювету, получают спектр кругового дихроизма в области 205-240 нм и определяют отношение оптических плотностей при 222 и 208 нм.

W 64А+/ +W 64Ao2/o2

6,71 ±0,27313,55±0,497

Пример 4. К 2,5 г муки кукурузы линии Wf 9+/+ и Wf 9o2/o2 прибавляют 10 мл воды, выдерживают 45 мин при 25°С, центрифугируют 20 мин при 3000 об/мин,

фильтруют, раствор белковой фракции помещают в 0,1 см кювету, получают спектр кругового дихроизма в области 205-240 нм и определяют отношение оптических плотностей при 221 и 208 нм.

Wf 9+/+Wf 9o2/o2

11,15±0,60913,81 ±0,362

Использование предлагаемого способа в сравнении с известным позволяет ускорить и упростить способ, так как выявление опаковой формы проводят сразу после выделения белковой фракции без предварительной подготовки образца.

Формула изобретения

Способ выделения опаковой формы кукурузы, включающий получение из образца размолотого зерна водорастворимой белковой фракции, ее анализ и выявление опаковой формы по результатам анализа, отличающийся тем, что, с целью упрощения и ускорения процесса выделения, анализ осуществляют путем получения спектра кругового дихроизма и измерения оптической плотности в области 205-240 нм, а опаковую форму выявляют по возрастанию отношения оптической плотности при 221-230 нм к оптической плотности при 208-215 нм.

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к генетическим исследованиям зерновых культур, и может быть использовано для селекционной оценки зерна и выделения опаковых форм кукурузы. Цель изобретения - упрощение и ускорение процесса выделения. Образец размолотого зерна кукурузы обрабатывают водой в течение 15-60 мин с получением белковой фракции. Очищенную белковую фракцию помещают в оптическую кювету и анализируют по спектру кругового дихроизма в области 205-240 нм. Опаковую форму выявляют по возрастанию отношения оптической плотности при 221-230 нм к оптической плотности при 208-215 нм. 1 ил., 1 табл.

Соотношение оптических плотностей

А 204 +/+

А 204о2/о2

w

220

-2.0

23ff

A, HM

240250