Способ выбора донорской крови для иммунокоррекции невынашивания беременности Советский патент 1989 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к иммунологии, преимущественно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано при лечении невынашивания беременности.

Цель изобретения - повышение точности способа.

Способ осуществляют следукхдйм образом..

При заборе крови 1-2 мл ее с консервантом отливШот в отдельную пробирку. Эту пробирку и флакон с кровью помещают в термостат на 1-2 ч при 37tl°C, после чего флакон переносят в холодильник, а кровь из пробирки исследуют на наличие гемолизинов и блокирующих свойств. Для этого надосадочную плазму наливают в- 2 пробирки по 0,03 мл и проводят исследование по схеме: в пробирке № 1 к О,.03 мл плазмы добавляют 3 мл 2,5-3%- ной взвеси эритроцитов барана и инкубируют 30-45 мин при 37 С; в пробирке № 2 к 0,03 мл плаз1 1 добавляют 0,03 мл сыворотки с заведомо высоким содержанием гемолизинов (вы- ще 0,6 ед, опт. пл.) и после инкубации при 37 С в течение 15 мин добавляют 3 мл 2,5-3%-ной взвеси эритроцитов барана, после чего смесь инкубируют еще 30 мин

В пробирку № 3 вносят 0,03 мл ге- молитически активной сыворотки, которая быпа добавлена в пробирку №2.

После инкубации с эритроцитами барана пробы центрифугируют 10 мин при 2000. об/мин, определяют на фото- электроколориметре оптическую плотность |Надосадочной жидкости при .длине волны 400-450 ммк в кювете толщиной 5 мм.

Донорская кровь пригодна для иммунотерапии при угрожающем аборту, если: в пробе № 1 интенсивность гс- молиз-а не превышает 0,35 ед. опт.пл;

(Л

4 СО

ю to

00

интенсивность гемолиза в пробе № 3 выше, чем в пробе № 2.

П р и м е р 1. Беременная Д., 32 лет поступила в родильное отделение больницы с признаками угрозы самопроизвольного прерывания беременности: боли в области поясницы и внизу живота, кровомазание. Срок беременности 12 недель. Показатели иммунного статуса при обследовании: уровень гемолизинов 1,2 ед.опт.пп,, т.е. повышен; сыворотка не только не блокирует, но даже усиливает реакцию Е-розеткообразования на 28,27. На основании этого была произведена гемотрансфузия крови, полученной предлагаемым способом. Уровень гемолизинов в плазме равен 0,2 1 ед.опт.пп при добавлении к гемолитически активной сыворотке плазма снижала интенсивность гемолиза.

В ближайшие часы после перелива- кия наблюдалось значительное улучшение клинического состояния женщины: исчезли боли в пояснице, уменьшились кровянистые выделения. При иммунологическом обследовании, проведенном через сутки, было констатировано снижение уровня гемолизинов до 0,56 ед опт.пл., сыворотка блокировала реакцию Е-розеткообразования на 12%. Женщина выписана с прогрессирующей беременностью.

В табл. 1 представлены суммарные данные, показывающие, что при инкубировании донорской крови происходит уменьшение гемолитической активности тгпазмы и повьш1ение ее иммуносуп- рессивного воздействия на реакцию имьтунного гемолиза.

Однако указанные изменения после инкубации отмечаются в плазме крови не у всех доноров и не в равной степени, что может быть обусловлено различиями в функциональной активности лимфоцитов-супрессоров, выделяющих при инкубировании медиаторы с блокирующими свойствами. В связи с этим после инкубирования кровь необходимо исследовать по указанной методике.

При оценке допустимого уровня гемолизинов в переливаемой крови установлена величина, равная 0,35 ед.опт.п Она определена ни основании кпи нических наблюдений и экспериментальных исследований. При добавлении к гемолитически активным сывороткам

.

.

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

беременных плазмы, содержащей более 0,35 ед. опт.пл. гемолизинов, в 21 из 32 случаев иммунокорригирующий эффект отсутствовал, тогда как плазма, содержащая менее 0,35 ед снизила уровень гемолизинов в 105 из 120 исследованных сывороток. Тетрахори- ческий показатель связи между содержанием гемолизинов в донорской крови и ее антигемолитическим действием имеет максимальную величину при граничном значении, равном 0,35, и составляет 0,51. Изменение граничного показателя в ту или иную сторону приводит к уменьшению етрахоричес- кого показателя.связи. Так, при 0,3 ед, опт.пл. он равен 0,39, а при 0,4 ед. опт.пл. -0,46.

В указанных исследованиях образование иммуносупрессивных факторов в донорской крови наиболее интенсивно происходило Б первые 1-2 ч инкубирования, В дальнейшем отмечалось лишь небольшое нарастание их количества.

В табл. 2 содержатся суммарные данные иммунологического обследования и клинического наблюдения женщин после г емотрансфузии крови, полученной известным и предлагаемым способами, при лечении угрожающего аборта (через 1-3 суток).

Как показал ретроспективный анализ, в группе женщин, при лечении которых гемотрансфузия была произведена невзирая на наличие в донорской крови высокого уровня гемолизинов и низкую блокирующую активность плазмы, улучшения клиническох о состояния в ближайшие несколько суток не наблюдалось. Их лечение было дополнено инфузиями плазмозаменителей, которые обладают иммуномодулирующими свойствами, а также симптоматической терапией. В более отдаленные сроки после гемотрансфузии (согласно данным литературы и результатам собственных исследований через 2-3 недели) включаются механизмы, обусловливающие иммунологический и терапевтический эффект, - антигенная стимуляция собственных супрессоров беременной и снижение Т-хелперов и цитотоксичес- ких лимфоцитов.

Из 53 наблюдавшихся женщин с привычным .невынашиванием только у 3 произошел выкидыш,У остальных беременных родились в срок здоровые ;киз- неспособные дети.

Формула изобретениякровь инкубируют при в течение Способ выбора донорской крови для1-2 ч, определяют уровень гетеро- иммунокоррекции невынашивания бере-фильных гемолизинов и антигемолити- менности путем определения ее совме-ческую блокирующую активность и при стимости с реципиентом по группе кро низком уровне гемолизинов и при нави и резус-фактору, отличаю-личии антигемолитической блокирующей щ и и с я тем, что, с целью повыше-активности выбирают донорскую кровь ния точности способа, дополнительнодля иммунокоррекции.

Таблица 1

Способ УровеньБлокирующая активность в реакции

получе- гемолизинов иммунного гемолиза ния до- в плазме

норскойУровень ге- Урсгвень ге-% подавлекровимолизинов молизиновния гемолиов сыворот- после до-тической

ке беремен- бавления до-активности

нойнорскойсыворотки

плазмы

Известный0,9510,161,210,17l,OtOJ816,6,

Предлагаемый0,6510,12l,2tO,090,710,0541,6

I

2

Иммунокорригирующий эффект

СпособГетерофильные Блокирующая активностьКпиничесполуче- сывороткикий эфния до-т-1факт (%

норскойДо После До Послеженщин с

крови - улучшением

клиничес- гемотрансфузии

тояния)

I 11 .. - .I..I«. -. - - . -

Предлагаемый I,16t0,16 0,64tO,15 -10,812,4 23,8t4,l 83,4

Известный 1,2910,16 l,39tO,17 -14,2t2,l -9,ltl,9 25,2

л,т, ,«,i. ,.. .« ....i..« .. «..K« -.«e

Составитель. П.Бонарцев Редактор И.Горная Техред- Л.ОлийныкКорректор В.Гирняк

-- ----- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -.- - « - -« -.

Заказ 3871/47 Тираж 789Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат Патент, г.Ужгород, ул. Гагарина,101

Изобретение относится к иммунологии, преимущественно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано при лечении невынашивания беременности. Целью изобретения является повышение точности способа. Цель достигается за счет инкубации донорской крови при 37±1°С в течение 1-2 ч с последующим установлением характерного для нормы уровня гетерофильных гемолизинов и наличия антигемолитической блокирующей активности в плазме крови. Выход крови доноров при отборе повышается с 66,3 до 91,4%. 2 табл.