Способ дифференциальной диагностики сепсиса и локализованной гнойной инфекции у новорожденных Советский патент 1989 года по МПК G01N33/66 

Изобретение о;гносится к области медицины, в частности, к педиатрии.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Способ осуществляют следующим образом.

К 0,1 мл.сыворотки крови добав - ляют 10 мл абсолютного этанола, перемешивают и ерез 10 мин центрифугируют при 3000 об/мин в течение 10 мин. Надосадочную жидкость сливают, а осадок растворяют в 0,5 мл 01 н. раствора едкого натрия, перемешивают, добавляют 5 мл антронового реактива. Пробы осторожно перемешивают и помещают в кипящую водяную баню на 5 мин

точно по секундомеру, затем охлаждают. Оптическую плотность измеряют на ФЭК при красном светофильтре (№ 8):в кювете толщиной 10 мм против контроля (0,5 мл 0,1 н.едкого натрия и 5 мл антронового реактива, ралее та же обработка, что и опытных проб). Количество гексоз, связанных с белками, определяют по каблировоч- ной кривой, построенной по стандартному реактиву галактозы (или маннозы, 10 - 100 мкг в пробе)..

При снижении содержания гексоз у новорожденных первой недели жизни от 57 до 65 мг%, а у новорожденных вто- . рой недели - от 66до77мг% диагностисл

о

СЛ

руют локализованную гнойную инфекцию а при снижении их содержания у детей первой недели жизни от 45 до 51 мг%, у детей второй недели от 52 до 59 мг% - сепсис.

Предлагаемый способ диагностики применим при обследовании новорожденных первых двух недель жизни, поскольку при сравнении показателей гексоз у здоровых и больных разными формами гнойно-воспалительных заболеваний выявлены четкие различия диапазона колебаний содержания гексоз: у здоровых новорожденнь х первой недели жизни он в пределах 77.67 - 99.33 мг%. у новорожденных с локализованными формами гнойно-воспалительных заболеваний - 57.32 - 64,42 мг%; еще более резкое снижение содержания гексоз в пределах 45,83 - 51,99 мг% отмечено у детей, страдантщих сепсисом.

Аналогичные результаты выявлены при обследовании детей второй недели жизни. Пределы колебаний содержания гексоз у здоровых детей 88,57 - 112,09 мг%, у больных локализованными формами гнойной инфекции - 66,97- 77.13 мг%, у больных сепсисом -51,02 59,06 мг%.

Пример 1. Новорожденная Ж. была отправлена в отделение новорожденных и недоношенных детей по поводу ателектатической пневмонии, сероз но-гнойного омфлита, гипоксической энцефалопатии. Девочка от пожилой (43 года много рожавшей матери, от XV беременности, XV родов. Мать страдает хроническим пиелонефритом, кариесом зубов, анемией, кольпитом. Девочка из двойни, масса тела 1200 г, рост 39 см, оценка по шкапе Алгар - 6 баллов, через 5 мин - 7 баллов. Осуществлялась реанимационная терапия. Во время наблюдения в роддоме состояние ее оставалось тяжелым за счет пневмопатии внутриутробной гипотрофии, гипоксической энцефалопатии. На 5-й день жизни девочка была переведена в отделение новорожденных.

При поступлении выявлена следующая симтоматика: общее состояние тяжелое. Головка запрокинута, крик слабый, тонус мьш1ц резко снижен, физиологические рефлексы не вызываются большой родничок 3 X 2 см, не напряжен; цианоз носогубного треугольника дыхание аритмичное, в дыхании участвует вспомагательная мускулатура меж

0

5

0

5

0

5

0

5

реберий, над легкими выслушиваются рассеянные влажные хрипы и крепити- рующие; тоны сердца приглушены, нерезкая тахикардия, пульс 150 в 1 мин; живот умеренно вздут, пальпируется тонкий эластичный край печени; пуповина толстая, мокнет, пупочное кольцо гиперемировано; стул со слизью, зеленоватый. Периферическая кровь: красная кровь без особенностей, лейкопения - 5,0 10 /л, незначительный относительный нейтрофилез - 53 (палочкоядерные - 5%, сегментоядер- ные - 48%), лимфоциты - 42%, моноциты - 5%, СОЭ нормальная - 3 мм/ч. Общий анализ мочи:-, единичные лейкоциты и клетки плоского эпителия, много бактерий - +++. Копрограмма: слизь +, жиры ++, лейкоциты - 1-2 в поле зрения. Бактериологический посев кала отрицательный. На рентгено- грамме легких отмечено некоторое усиление сосудистого рисунка.

Был выставлен клинический диагноз: гнойный омфалит, гипоксическая энцефа лопатия, внутриутробная гипотрофия. Этот диагноз бьш подтвержден при исследовании содержания углеводных компонентов в сьшоротке крови, мг %; гек- созы 60,5; гексозамины - 51,5 ; нейра- миновая кислота 22,8,-т.е. было выявлено нерезкое снижение содержания гексоз (в норме 88,7 ± 3,0 мг%), гексоза- минов ( в норме 73,1 + 4,0 мг%) и повышение содержания нейроминовой кислоты (в норме 16,3 + 1,0 мг%).

На протяжении первой недели наблюдения и лечения состояние девочки несколько ухудшилось: после отпадения пуповины появилось гнойное отделяемое из пупочной ранки, стул оставался слизистым, с непереваренными комочками пищи, ухудшилась периферическая кровь: число лейкоцитов оставалось низким - 6,7 10 /л, но возросло количество клеток нейтрофильного рода до 57%, из них палочкоядерных - 10%, сегментоядерных - 47%, т.е. появился нерезкий относительный нейтрофилез, СОЭ оставалась низкой-2 мм/ч . Общий анализ мочи: клетки плоского эпителия - 10-15 в поле зрения, лейкоциты - 3-4 в поле зрения. Копрограмма: жиры +++,

Был заподозрен сепсис, сделан бактериологический посев крови, исследованы углеводные компоненты гликопро- теидов в сыворотке крови, при этом

(Отмечено, что содержание гексоз сни- зило(ь до А5мг% (в норме 102+3,0 мг%) содержание гексозаминов составляло 75,5 мг%(норма), почти прежним оста- вался уровень нейраминовой кислоты - 20.8 мг%.

По совокупности клинических данных был выставлен клинический диагноз: сепсис, септикопиемическая форма, подострое течение.

В последующем этот диагноз был подтверяоден торпидным течением гнойного омфалита, присоединением стафи

пупочная ранка влажна я. Периферическая кровь: красная кровь - без особенностей, лекопения - 5,0-10 /л, , нерезкий нейтрофилез относительный - 53% ( палочкоядерные - 6%. сегменто- ядерные - 47%), лимфоциты - 39%, моноциты - 3%, Эозинофилы - 5%, СОЭ - нормальна,. 2 мм/ч. Общем анализ мочи 5-6 лейкоцитов в поле зрения, бактерии ++.

При поступлении кроме гипоксичес- кой знцефалопатии диагностирована локализованная гнойная инфекция: гной

Изобретение относится к области медицины , в частности, к педиатрии. Целью изобретения является повышение точности способа. Для этого в сыворотке крови больного определяют содержание гексоз, связанных с белками, путем добавления абсолютного этанола, перемешивают и через 10 мин центрифугируют. Надосадочную жидкость сливают, а осадок растворяют в растворе едкого натрия, перемешивают и добавляют антроновый реактив. Пробу помещают в кипящую водяную баню и после охлаждения измеряют оптическую плотность на ФЭК при красном светофильтре. При уровне содержания гексоз в сыворотке крови у детей первой недели жизни 45-51 мг %, у детей второй недели жизни 52-59 мг % диагностируют сепсис, а при значении соответственно 57-65 и 66-77 мг % - локализованную гнойную инфекцию. При обследовании 198 детей в динамике получены статистически высокодостоверные данные (P*980,001) точности способа, а также подтверждена возможность диагностики той или иной патологии в первые 2 недели жизни новорожденного.

лококкового энтереколита, положитель- 5 ный-конъюктивит, пиодермия. Сделан

ным результатом высева из крови золотистого стафилококка.

За время пребьшания в стационаре проведено 4 курса антибиотикотерапии (2 курса лечения пенициллином, мети- ЦШ1ЛИНОМ, гентамицином,) курс лечения фуразолидоном. Была перепита плазма , в том числе антистафипококковая, кров заменители плазмы. Была проведена де- зинтоксикационная и симптоматическая терапия.

Девочка завершила свое лечейие уже в грудном отделении и была выписана через 50 дней стационарного лечения. В периоде новорожденности уровень гексоз и гексозаминов оставался ниже нормального.

П р и м е р 2. Новорожденный К. поступил в отделение новорожденных на 7-день жизни из роддома с диагнозом: гипоксическая травматическая энцефалопатия с расстройством гемоликворо- динамики II ст. Мальчик от V беременности, протекающей с длительным токсикозом, преэклампсией. В родах было наложение щипцов, роды стремительные, безводный период 1,5 ч. Масса тела при рождении 3,2 кг, рост 51 см. В роддоме находился на режиме травмированного, некоторое улучшение началось с 5-го дня.

При поступлении отмечалось тяжелое состояние за счет неврологической симптоматики, серость кожи, субикте- ричность, элементы пиодермии на грудной клетке, гнойное отделяемое из глаз. Большой родничок 3,5 х 3,5 см, расхождение сагиттального шва. Умеренное повьш1ение мышечного тонуса, тремор конечностей при плаче, опущение угла рта справа. Физиологические рефлексы новорожденного снижены, быстро истощаются. Тонны сердца приглушены. Пальпируются пупочные сосуды.

0

5

посев материала из пупочной ранки на флору, бактериологический посев кала. При исследовании содержания углеводных компонентов в сьторотки крови обнаружено резкое снижение содержания гексоз-до 45 мг%, снижение содержания гексозаминов - 43 мгТ, (в норме 86,7+3 и 73.1+.4,0 мг% соответственно) ,, повьш1ение содержания нейра- 5 миновой кислоты до 22,2 мг%.

Был получен отрицательный результат бактериологических посевов материала из пупочной ранки и кала.

При повторном исследовании содер- Q жания углеводных компонентов в сыворотке крови отмечено низкое содержание гексоз-49,5 мг%, некоторое снижение содержания нейраминовой кислоты- до 15,25 мг%, нормализация гехсоза- минов.

На третьей неделе наступила смерть. Патанатомический диагноз - внутриутробный сепсис, катарально - фибринозный энтерит, начинающийся перитонит, септическая инфарктоподобная пневмония на фоне атрофии вилочковой железы и всей лимфоидной ткани, что свидетельствует об иммунодефицитном синдроме и объясняет неэффективность лечения (в клинике сепсис заподозрен на 5-й день поступления в отделение), хотя ввиду тяжести состояния ребенок получал терапию, как при сепсисе.

Таким образом, анализ приведенных клинических примеров с самого начала наблюдения,показывает, что содержание углеводных компонентов при сепсисе снижается рано, тогда как показатели периферической крови часто на протяжение всего времени наблюдения не отражают течения тяжелого заболевания, а бактериологические посевы материала не всегда оказываются положительными, требуют боль0

5

0

5

ших затрат времени и трактуются клиницистами только в совокупности с другими клиническими симптомами.

П р и м е р 3. Новорожденная А., поступила в отделение патологии новорожденных в день рождения из роддома по поводу врожденной пиодермии.

Левочка.от матери 19 лет, от первой нормально протекающей беременности, от первых срочных благополучных родов. Масса тела при рождении 3350 г, рост 52 см. У матери накану- ре родов отмечалось пиодермия кожи лица. Девочка закричала сразу после рождения. Обращало внимание при рождении наличие элементов врожденной пиодермии, преимущественно на левом предплечье. По внутренним органам патологии не выявлено. Неврологически - небольшой тремор подбородка при плаче, оживления всех физиологических рефлексов, рефлексы шаговый и опоры несколько вялые. Периферическа кровь при поступлении в отделение: красная кровь без особенностей, небольшой лейкоцитоз на грани с физиологическим - 20,0 10 /л, клетки не трофильного ряда - 74% (палочкоядер- ные - 32%, сегментоядерные - 42), лимфоциты - 20%, моноциты - 6%, СОЭ 3 мм/ч. Выполненные в день Постуления бактериологические посевы кров и кала дали в последующем отрицатель ньм результат, посев кала на кишечную флору также оказался отрицательным. Общий анализ мочи: большое количество клеток плоского зпителия и единичные лейкоциты. Копрограмма в норме. При исследовании содержания в сыворотке крови гексоз, гексозами- нов и нейроминовой кислоты обнаружено некоторое снижение содержания гексоз - до 69 мг% (норма 86,7±3,0 мг%) снижение содержания гексозаминов до 54,5 мг% (норма 73,1+4,0 мг%), нормальное содержание нейраминовой кислоты 11,3 мг%. По поводу диагностированной локализованной гнойной инфеции было проведено лечение антибиотиками (ампициллин), парентерально переливали 3 раза антистафилококковую плазму, вводили антистафилококковый гаммаглобулин (2 раза через день по 40 ME в/м), был проведен курс лечения антистафилококковым бактериофагом.

При повторном исследовании через неделю периферическая кровь с явным

5

0

5

улучшением показателей: лейкоцитоз снизился до 10,010 /л, клетки ней- трофильного ряда - 39% (палочкоядер- ные - 2%, сегментоядерные - 37%), лимфоциты - 48%, моноциты - 13%. СОЭ - 3 мм/ч. Содержание гексоз в сыворотке крови немного повысилось (до 72 мг%), содержание гексозаминов повысилось до 67 мг%.. содержание нейраминовой кислоты - до 16,6 мг%. Через 13 дней стационарного лечения девочка выписана под наблюдение участкового педиатра в связи с выздоровлением.

Нерезкое снижение содержания гексоз и гексозаминов и возрастание показателей в динамике наблюдения позволили исключить генерализованную инфекцию (сепсис), а течение заболевания и быстрое выздоровление подтвердили правильность диагноза.

П р и м е р 4. Новорожденная Д., в двухнедельном возрасте была направлена в отделение патологии новорожденных на лечение по поводу локализованной гнойной инфекции (ката- ральньй омфалит и острый катараль- н ый отит ) , развивавшейся на фоне гигюксической энцефалопатии.

Девочка от V беременности, протекающей на фоне гриппа (при сроке 25-26 недель), во II половине - с токсикозом (нефропатия) и на фоне анемии. В анамнезе матери - выкидыши. Девочка родилась с проявлениями внутриутробной гипотрофии (масса тела при рождении 2800 г, рост - 51 см).

После отделения пуповины появились серозно-геморрагические вьщеле- ния из пупочной ранки, амбулаторное лечение оказалось безрезультатным и девочку направили в стационар. При стационарном обследовании был выявлен отит.

при поступлении отмечено пониженное питание, шелушение кожи на ручках и боковых поверхностях грудной клетки, сукровичные выделения из пупочной ранки. По внутренним орга- 0 нам без патологии. Отит установлен лор-осмотром. Периферическая кровь: красная кровь без особенностей, лейкопения - 5,710 /л, эозинофилы -2%, клетки нейтрофильного ряда - 22%, 5 т.е. норма (палочкоядерные - 6%, сегментоядерные - 16%), лимфоцитьг- 70%; моноциты - 6%. Общий анализ мочи: 5-8 клеток плоского эпителия.

0

5

0

5

10-15 лейкоцитов в поле зрения,Коп- рограмма - нормальная. Два бактери- логических посева кала на флору дали отрицательный результат. Содержание гексоз в сыворотке крови при поступлении 62.0 мг%,(норма 102,0i3,0 мг%), гексозаминов 63,5мг (норма 78,9+5.4 мг%), нейраминовой кислоты 13,85 мг% (норма),

На основании имеющихся клинических данных, включая умеренное снижение в сыворотке крови гексоз и гексозаминов, был подтвержден диагноз локализованной (малой) гнойной инфекции, проведен курс соответств то- щей терапии.

Содержание отдельных углеводных компонентов в сьшоротке крови через неделю, мг%: гексозы 69,5; гексоза- мины 66; нейраминов кислота 15.5.

Через 9 дней в связи с выздоровлением девочка была выписана под наблюдение участкового педиатра.

Таким образом, снижение содержа- ния гексоз (главным образом) и гексозаминов при локализованной гнойной инфекции менее выражено и позволяет тем самым исключить сепсис, тогда как резкое снижение содержания гексоз, наблюдающееся при сепсисе, уже в доклинической стадии заболевания позволяет своевременно распознать это тяжелое заболевание и начать своевременное лечение.

Основанием для разработки данного способа диагностики гнойно-воспалительных заболеваний новорожденных послужили результаты обследования 19 новорожденных, из которых 106 - зДо- ровые дети, обследованные с целью изучения нормального содержания углеводных компонентов гликопротеидов с учетом быстрого изменения их уровня в течение периода новорожденности (27 детей первой недели жизни, 21 ребенок 2-й недели жизни,21 ребенок 3 и недели жизни, 27 детей А-й недели жизни) и 92 ребенка первых двух недель жизни, поступившие на лечение в отделение патологии новорожденных и недоношенных детей по поводу разных гнойно-воспалительных заболеваний: 46 детей с локализованными формами (25 детей первой недели жизни, 21 ребенок второй недели жизни), 46 детей, страдающих сепсисом (26 детей первой недели жизни, 20 - второй).

0

5

0

5

0

5

0

5

0

5

У больных детей определение содержания углейодньк компонентов гликопротеидов производил ось еженедельно на протяжении всего времени наблюдения в рамках периода новорожденности.

Дети (198) распределены на 3 подгруппы: 1 - здоровые дети , II - больные локализованными гнойно-воспалительными заболеваниями, III - больные сепсисом.

Результаты динамического опреде-. ления содержания углеводных компонен- тов-гликопротеидов у новорожденных с раз1Л1ми формами гнойно-воспалительных заболеваний в сопоставлении с показателя у здоровых детей соответствующего возраста представлены в таблице.

На основании обследования 198 детей в динамике и получения статически высоко достоверных (р 0,001) данных предложен способ диагностики сепсиса путем исследования содержания гексоз в сьшоротке крови, показаны изменения содержания гексоз при разнообразной гнойно-воспалительной патологии, установлены пределы колебаний содержания гексоз, позволяющие при выявлении определенного их уровня в рамках названных пределов диагностировать как локализованную, так и генерализованную инфекцию/сепсис/. Сепсис у новорожденных развивается внутриутробно или в первые дни жизни, поэтому своевременная лабораторная диагностика его у детей первых двух недель жизни - один из путей снижения высокой смертности детей периода новорожденности,

I

Формула изобретения

Способ дифференциальной диагностики сепсиса и локализованной гнойной инфекции у новорожденных путем биохимического исследования сыворотки крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа,у детей первых двух недель жизни определяют содержание гексоз и при их уровне у детей первой, недели жизни 45-51 мг %, а у детей второй недели жизни.- 52-59 мг % диагностируют сепсис, а при значении соответственно 57-65 мг % и 66-77 мг % диагностируют локализованную гнойную инфекцию.

Гексозы, мг Z

88,5+3,6161.37±:|,35 0,001

(77,67-99,33)(57,32-65,42)

100,3313,9272,05i1,71 0,001

(88,57-112,09)(66,92-77,18)

92,413,5679,65f2,02 0,001

(81,72-103,08)(73,59-85,71)

89,,85 (83,46-94,56)

48,96±1,01 ,001 (45,83-51,99)

55,04i1,34 :.0,001

(51,02-59,06)

62,,42 0,001 (52,34-72,86)

,48 (49,76-70,64)