СПОСОБ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ ОСПЫ КОЗ Советский патент 1962 года по МПК C12N7/00 A61K39/275 

предлагается способ изготовления вакцины против оспы коз путем адсорбции вируса на концентрированной взвеси гидроокиси алюминия, инактивации формалином и стабилизации глицерином. Это позволяет повысить иммуногенные свойства вакцин.

Для изготовления вакцины отбирают штаммы вируса осны коз высокой вирулентности и иассажируют на высокочувствительных к осне козах. Такой метод отбора и размножения вируса позволяет получать большое количество высококачественного в антл- и иммуногеином отношении вирусного отека, необходимого для изготовления высокоактивной вакцины.

Полученный от вирусных коз осненный отек предварительно отмывают от оспенной лимфы, для чего его смешивают с равным но весу количеством фосфатно-буферного раствора. Смесь встряхивают и затем отсасывают разведенную лимфу. Оставшиеся кусочки сспенной отечной ткани измельчают (например, на коллоидной мельнице) до частиц коллоидной диснерсности. После этого суспензию вирусного отека заливают 1 :30 фосфатно-буферным раствором и выдерживают при сутки для экстрагирования. За это время суспензию периодически встряхивают по 5-10 мин. Через сутки вирусный экстракт отсасывают через марлевый фильт, в стерильных условиях смешивают с ранее нолучениой разведеииой

лимфой и вновь фильтруют через ватно-марлевый фильтр. Этот фильтрат суспензии является исходным випусным материалом, используемым для изготовления вакцины в танкере.

Затем предварительно размешанная в шуттель-аппарате 6%-ная гндроокись алюминия посредством создания вакуума всасывается в танкер, где ее стерилизуют 3 - 3,5 час при 125°С пять-шесть раз но 3-5 мин, неремешчвая в танкере мешалкой. После охлаждения стерильной гидроокиси до 4 - 6°С в танкер всасывают ранее приготовленную вирусную взвесь и смешивают с гидроокисью в соотношении 1:1. Смесь вирусной суснензии и пгдроокиси перемешивают мешалкой 30 мин и оставляют в танкере на 24 час при нернодическок перемешивании (пять-шесть раз по 3- 5 мин) для адсорбции вируса на коллоидных частицах гидроокиси. По истечении указаниого срока в адсорбированный на гидроксале вирус добавляют посредством создания вакуума ранее приготовленный стерильный 5%ный раствор формалина до концентрации 0,05% его в вакцине.

После введения формалина вакцину в танкере перемешивают мешалкой 30 лшн и иодогревают паром, вводимым в рубашку танкера до 23-25°С в течение 12-15 час для инактивации вируса в вакцине. Далее в вакцину довакуума 5% по объему стерильного неразведенного глицерина и вновь перемешивают мешалкой 5-10 мин для полной нейтрализации и термостабилизации.

Готовую вакцину разливают из танкера по флаконам стерильным разливным шлангом с помощью положительного давления. Воздух в танкер подают насосом через стерильный ватный фильтр, при этом вакцина фильтруется через двухслойный марлевый фильтр, помещенный в металлическом цилиндре в системе разливного шланга.

На стерильность вакцину проверяют бактериологическим методом путем высева на питательные среды, а ее безвредность и авирулентность - на мелких лабораторных животных и не иммунных к оспе козах. При этом вакцинированные животные всегда остаются живы и признаков общего заболевания не проявляют.

Активность вакцины (напряженность иммунитета) устанавливают на четырех козах путем их вакцинации в дозах 3 и 5 мл последующего заражения вирусом оспы через 12- 14 дней после вакцинаций вместе с двумя контрольными невакцинированными козами, В результате заражения вакцинированные козы не реагируют на введение вируса ни местной, ни общей реакцией, в то время как у контрольных коз развивается типичный осненный процесс с образованием пустулы на месте введения вируса, общей температурой реакции и других признаков заболевания оспой.

Длительность поствакцинального -иммунитета установлена экспери.ментально: после введения 3 мл вакцины - 8 месяцев и после 5 мл-10 месяцев. Срок годности вакцины 8 .месяцев. Вакцина предназначена для применения как в благополучных, так и в неблагополучных по заболеванию оспой коз хозяйствах. Она вводится подкожно, однократно, для взрослых коз в дозе 3 мл и для молодняка--1,5 мл. Козы с введенной вакциной в благополучных хозяйствах карантину не подвергаю1ся.

Предмет изобретения

Способ изготовления вакцины против оспы коз путем адсорбция вируса на концентрированной взвеси гидроокиси алюминия, инактивации формалином и стаоилизации глицерином, отличающийся тем, что, с целью повышения иммуногенных свойств дслкцины, берут штамм вируса оспы, пассажированный на высокочувствительных к оспе козах, в виде оспенного отека, измельчают до часгиц коллоидной дисперсности, разводят в соотношении 1 :30 фосфатно-буферным раствором, фильтруют, адсорбируют вирус равным по объему количеством концентрированной гидроокиси

алюминия, инактивируют формалином 12- 15 час, после чего вакцину стабилизируют глицерином и применяют подкожно.