Способ изготовления вакцины против инфекционной плевропневмонии коз Советский патент 1975 года по МПК C12K5/00 

Обычно гидроокись-алюминиевые вакцины зготовляют пз вирулентного материала и нримемяют против чумы кур, осны овец, ящура н др., но против инфекционной плевропневмоши коз онн оказывались недостаточно эффективными.

В описываемом способе для изготовления гидроокись-алюминиевой формол-вакцины в качестве исходного вирусосодержашего материала берут легочную ткань, нмеюн.ую характерные норажения. лимфатические узлы грудно/ и плевральной зксудат от коз, больных остреи формой инфекционной плевропневмонии с ярко выраженными клинически.ми признаками в среднем на 5-8 сутки болезни. У убитых коз снимают шкуру, удаляют пин;езарительиые органы, отделяют голову и заднюю часть туловиида в области пояеннчпых позвонков, а грудную часть туловища переносят в стерильную комнату. Вскрытие и извлечение легочной ткани и лимфатических желез производят через диафрагму или путем вскрьггия грудной клетки, но предварительно извлекают воспалнтельный экеудат из грудной полости. Вскрытие и извлечение органов про.изводптея ео строгим соблюденнем асептики.

Пригодной для изготовления вакцины считается ткань, имеющая поражения, характерные для острой формы заболевания, а именно, острую гипере,ию легочной ткани и стадию красной и серой генатизании. В межплевральном пространстве в больщинстве случаев имеется скопление эксудата и свернувшегося фибрина. Полученную легочную ткань н лимфатические железы подвергают размельчению в .мясорубке. Измельчение производят путем последовательного применения в мясорубке решеток с различным диаметром отверстий (уменьшая до I мм).

Эксудат из межнлеврального пространства получают путем введення через диафрагму етекляниой канюли или иглы, соединеиной с резиновым шлангом и еосудом.

Для изготовления вакцины берут воспалительный эксудат грудной полости, вирулентный измельченный материал, гидроокиеь алюмииия

№ 85755

и буферный раствор, которые смешивают в следующих пропорциях: 5 вес. ч. гидроокиси адюминия (6%); 4 ьес. ч. раствора фосфатного буфера; вес. ч. вирусной взвеси с иоследуюн1,ей ииактивацией формалином 38-40%-ным в колнчестве 0,1% ко всей смеси.

1 90 вес. ч. стеридьной смеси гидрата окнси алюминия и буферного раствора добавляют 10 вее. ч. 1 ируеиой взвеси, ноеле чего нроизводят тщательное взбалтываине (нгуттулнрованне) жидкости li течение 30 MIH-.

После 24 час. выдержки к холодном месте смесь формалиннзируется из расчета 0,1% формалина, содержап;е|-о 38-40% формальдегида, д количеству смеси.

Закончив формалниизацию, бутыль с вакниной закрывают и тут же нронзБОДят взбалтывание в течение 5--6 мин. и ставят в термостат или комнату для инактивации иа 48 час. при темнерату 1е 15-20°.

После 48-час. 15ыдержкн вйкнкну в бутылях ставят в темное ирохладное место, желательно с температурой 5-10°.

После расфасовки вакцина подвергается бактериолог1 ческому и биологичес1;ому контро.тю.

Бактериологический контроль ироводится иутем высева на питательные среды. Посевы выдерживаются в термостате при температуре 37-38° не менее 10 суток. При иаличии роста устанавли15аются вид и патогениость микроф торы. Наличие непатогенной микрофлоры в отдельны.х сериях вакцины не может препятствовать ее выпуску для практического применения.

Биологическая проверка на безвредность нроводится:

на двух кроликах в дозе2 слг

на морских свннках в дозе1 „

иа двух белых iMbiinax в дозе0,2 ,,

Вакцину вводят подкожно кроли1сам и морским свинкам в область живота, белым мышам-в область снины.

Безвредность вакцины ироверяют также на козах нутем нодкожного введения в дозе 10 см.

Испытание активности вакцины проводят на козах. Для этой цели берут четыре козы в возрасте 1,5-3 лет, которым вспрыскивают вакцину в дозе 5 см в области . Повториую вакцинацию проводят через 7 дней в тех же дозах. Па месте введения вакцины обычно образуются незначительные подкожные уплотнения вследст1зне медленного рассасывання гидрата окнси алюминия.

Контрольное заражение г,нрусом вакцинированных коз ироизводится через 13-15 дней после второй привнвкн вакцины. Вирус в виде свежевзятого эксудата нлеврального пли 1 ирусиой тканевой взвеси вводится четырем вакцинированньгм и трем контрольным козам интратрахеально в дозе 1-2 с.м. Для контрольного заражения допускается вирус не более 3-дневного хранения в помешепии при температуре 4-6°.

Вакцина считается активной, если в течение 20 дней срока наблюдения после контрольного заражеппя все четыре вакцииирова П1ые козы не заболева от, а три контро;1ьных должны иметь клинику инфекционной плевропневмонии с детальны:, неходом.

Если нз четырех вакцинированных коз о,ана заболевает, но выздоравливает, а все контрольные погнбают, вакцина также ечитаетея активной.

Вакцина также считается акт1-п ной нри условии заболевания всех трех контрольных, но гибели из них двух коз и одной оста1зшейся в ia-iвых.

Вакцина применяется с профилактической целью двухкратно путем подкожного введения в дозах 3-5 см, в зависимости от возраста коз.

Предмет изобретения

1. Способ изготовления вакцины иротив инфекционной плевроиневмонин коз, отличающийся тем, что в качестве исходного вирусосодержащего материала берут легочную ткань, имеющую характерные поражения, лимфатические узлы грудной полости и плевральной эксудат от коз, больных острой формой инфекционной плевропневмонии.

2. Прием выполнения способа по п. , отличающийся тем, что в рулентный материал после измельчания и фильтрации смещивают с 5 вес. ч. 6%-иой гидроокиси алюминия, 4 вес. ч. раствора фосфатного буфера и 1 вес. ч. вирулентного материала с последующей инактивацией вируса формалином, добавляемым в количестве 0,1% ко всей смеси.

- 3 -ЛЬ 85755