Способ выявления чувствительности организма к антигенам Советский патент 1990 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине и ветеринарии, может найти применение в диагностике заболеваний, преимущественно предназначено для использования в педиатрии и, кроме того, может быть использовано в терапии.

Мелью изобретения является ускорение и упрощение способа.

Способ осуществляют следующим обра зом .

В пробирки с 0,02 мл 5%-ного трех- заметенного нитрата натрия добавляют 0,08 мл периферической крови, взятой из пальца обследуемого липа. В одну пробирку добавляют 0,02 мл раствора антигена, например туберкулина, или токсоплазменного антигена в концентрации 2 мкг/мл (опыт), а в другую - такое же количество физиологического

раствора (контроль). Пробирки помещают в термостат и инкубируют 6 ч при 37 С, после чего готовят мазки, окрашивают их раствором метиленового синего в концентрации 0,015% в течение 3 мин, вые ушивают на воздухе при комнатной температуре и подсчитывагат под микроскопом об. 90, ок. 7,масляная иммерсия процент лимфоцитов с зоной просветления. При превышении процента лимфоцитов с зоной просветления в опыте по сравнению с контролем на 16% и более выявляют чувствительность к данному антигену. При концентрации антигена менее 2 мкг/мл количество лимфоцитов с зоной просветления в опыте снижается, что не позволяет выявить чувствительность организма к антигенам. При концентрапии лнтигена более 2 мкг/мл, например 10 мкг/мл, отмечают повышение количества лимфоцитов с -;эной просветле- ния и у лип, не чувствительных к данному антигену.

Пример 1. Ребенок Т.,2 мес . ,

..

п

с диагнозом желтуха. Ничем не болел, вскармливался только грудным молоком, в весе прибавил за 2,5 мес 2,4 кг. RIW привит в родильном доме. В контроле 74% лимфоцитов с зоной просветления вокруг ядрышка (ядры- шек), в опыте с туберкулином 96%, а в опыте с токсоплазменным антигеном 76%, т,е, отмечается увеличение на туберкулин на Z9,7%, а на токсоплаз- менный антиген на 2,7%. Его мать, 23 г., практически здорова, количество лимфоцитов с зоной просветления 68% (контроль), а в опыте с токсоплазменным антигеном 70%, т.е. увеличение произошло всего на 2,9%, что не входит в установленные критерии положительных показателей.

Пример 2. Ребенок Т.,1,5 мес находился в отделении патологии новорожденных с диагнозом: врожденный токсоплазмоз, субкомпенсированная гидроцефалия. РСК с токсоплазменным антигеном 1:10 + +++, 1:20 ++. В контроле количество лимфоцитов с зоной просветления 74%, в опыте с токсоплазменным антигеном 94%, т.е. произошло увеличение па 27,0%. Его мать, 27 лет, личем не болела. Беременность протекала начиная с 12-14-й недели с субфебрильной температурой, на ток- соплаямоз во время беременности не обследована. РСК после родов положительная в титре 1:20++++. Количество лимфоцитов с зоной просветления в опыте с токсоплазменным антигеном увеличилось на 18,2% по сравнению с контролем.

Пример 3. Ребенок С. I мес и 3 нед. Находилась в отделении патологии новорожденных с диагнозом:

5

0

5

5

0

5

0

гр лдснп й гок г шлазмо ч , менингочн- пефалит, судорожный синдром, мтроче- фялия. РСК положительная в тиграх 1:10 ++ + +. Б11} ( не привита. Количес г- во лимфоцитов в опыте с туберк глином увеличилась на 10,7%, т.е. увеличение не достоверно (менее 16%). В опыте с токсоплазменным антигеном количество лимфоцитов с зоной просветления увеличилось на 32,1%. Ребенок погиб в возрасте 4 мес. На вскрытий был поставлен диагноз врожденный токсоплазмоз .

Таким образом, предлагаемый способ ускоряет до 6 ч и упрощает за счет снижения трудоемкости процесс выявления чувствительности организма к антигенам используя микрообъемы жидкости и, следовательно, применим в педиатрии, особенно в неонатоло- гии, что дает возможность проводить раннюю диагностику и своевременно начать лечение заболевания, чем достигается экономический и социальный эффект.

Формула изобретения

Способ выявления чувствительности

организма к антигенам путем культивирования гслеток крови в присутствии антигена с последующим определением в окрашенных мазках клеток изменения процентного содержания трансформированных лимфоцитов, отличающийся тем, что, с целью упрощения и ускорения способа, используют микрообъемы крови Из пальца, культивирование клеток крови проводят в течение 6 ч при 37°С, мазки клеток окрашивают 0,015%-ным раствором мети- ленового синего, процентное содержание трансформированных лимфоцитов определяют по количеству лимфоцитов с зоной просветления вокруг ядрышек и при его повышении на 16% и более выявляют чувствительность к данному антигену.

Изобретение относится к медицине и ветеринарии и решает вопросы, связанные с выявлением сенсибилизации организма к различным антигенам. Цель - ускорение и упрощение выявления. Определяют морфологические изменения нуклеолярного аппарата лимфоцитов периферической крови после воздействия антигеном и при превышении количества лимфоцитов с зоной просветления вокруг ядрышка (ядрышек) в опыте по сравнению с контролем на 16% и более выявляют чувствительность организма к данному антигену. Использование микрообъемов крови, взятой из пальца обследуемого лица, позволяет установить этиологический фактор инфекционно-воспалительного заболевания у новорожденных и детей раннего возраста.

Составитель А.Бонарпев Редактор В.Петраш Техред М.ДидыкКорректор С.Шекмар

Заказ 39

Тираж 501

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 111035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное