Способ определения кардиотропной активности веществ Советский патент 1990 года по МПК G01N33/48 A61B10/00 

(21)4221327/28-14

(22)01.04.87

(46) 07.03.90. Бюп. № 9

(71)Научно-производственное объединение Биолар, Латвийский научно- исследовательский институт кардиологии и Рижский медицинский институт

(72)Э.А.Пуле, В.Д.Микажан, А.А.Ауце, И.И.Брод, М.Я.Мелзобс и А.П.Скутелис

(53)61бт0.89.9 (088.8)

(56)Непомнящих Л.М. Патологическая анатомия и ультраструктура сердца. Новосибирск: Наука, 1981, с. 84-108.

(54)СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КАРДИОТРОПНОЙ АКТИВНОСТИ ВЕЩЕСТВА

(57)Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии. Целью

является повышение точности способа. Цель достигается тем, что готовят гистологические препараты сердца, далее на них определяют наличие ядер кардиомиоцитов с двойным лучепреломлением. Затем рассчитывают процентное отношение этих ядер к общему их содержанию на препарате. При снижении процентного содержания ядер с двойным лучепреломлением по отношению к норме определяют отсутствие кардио- тропной активности у вещества, а при увеличении указанных ядер по отношению к норме определяют выраженную кардиотропную активность у вещества. Способ позволяет испытывать вещества на наличие кардиотропного действия у химических агентов.

с (S

(Л

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии. Целью является повышение точности способа. Цель достигается тем, что готовят гистологические препараты сердца, далее на них определяют наличие ядер кардиомиоцитов с двойным лучепреломлением. Затем рассчитывают процентное отношение этих ядер к общему их содержанию на препарате. При снижении процентного содержания ядер с двойным лучепреломлением по отношению к норме определяют отсутствие кардиотропной активности у вещества, а при увеличении указанных ядер по отношению к норме определяют выраженную кардиотропную активность у вещества. Способ позволяет испытывать вещества на наличие кардиотропного действия у химических агентов.

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Способ осуществляют следующим образом.

Для тестирования веществ на предполагаемый лечебный эффект животным вводят вещества, вызывающие экспериментальный инфаркт в дозе 3 мг/кг и через 30 мин вводят испытуемое вещество на кардиотропную активность.

Введение повторяли три раза через 24 ч. Крысам контрольной группы вводят физиологический раствор

Через 48 ч после введения исследуемого вещества животных декантируют и извлекают сердечно-легочный

комплекс, который помещают в 10%- ный раствор нейтрального формалина на 48 ч. Далее участки сердца обезвоживают в спиртах возрастающих концентраций, помещают в хлороформ, смесь хлороформа с парафином и в частный парафин. Затем готовят срезы и окрашивают 0,1%-ным толуиди- новым синим на буфере макильвей- на при рН 4,2.

Срезы микроскопируют в поляризационном микроскопе. В миокарде определяют ядра с двойным лучепреломлением, а активность исследуемого вещества оценивают по процентному отношению ядер с двойным лучепреломлением к общему содержанию ядер на Препарате. В каждом срезе исследуют десять полей зрения.

сд

Јь

00 О5

со ел

Пример 1. Крысам вводят 3 раза физиологический раствор. В группе 6 крыс. Из сердца после фиксации в 10%-ном растворе нейтрального формалина на уровне желудочков вырезан тотальный - поперечный фрагмент миокарда толщиной 3-4 мм. Вырезанный фрагмент залит в парафин,, Из парафиновых блоков на микротоме сделаны серийные срезы толщиной 5-6 мкм.

После окраски в каждом срезе с помощью поляризационного микроскопа при увеличении 500 просматривается 10 полей зрений.

В каждом поле зрения подсчитывается общее количество ядер кардио миоцитов и количество светящихся яд с двойным лучепреломлением - анизотропных.

Подсчитывают процент светящихся ядер с двойным лучепреломлением. Полученные результаты: процентное содержание ядер с двойным лучепреломлением по группе животных 2,1% (от 1,6 до 2,6% по каждому отдельному животному).

Пример 2. Крысам вводят и следуемый препарат. В качестве препарата используют адреналин. Адреналин вводят однократно в дозе 3 мг/ подкожно. Для исследования миокарда животных забивают через 48 ч после введения препарата. Подготовку и исследование проводят аналогично примеру 1.

Полученные результаты: среднее процентное содержание ядер с двойным лучепреломлением по группе жиСоставитель Л.Стебаева Редактор В.Данко Техред л. Сердюкова Корректор Л.Бескид

Заказ 137

Тираж 508

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

5

0

5

0

5

0

вотных равно 0. Следовательно, сни- жение процента содержания ядер, обладающих эффектом двойного лучепреломления, позволяет подтвердить отсутствие тропного действия у адреналина (выражен кардиотоксический эффект).

Пример 3. Крысам, в дозе 50 мл/кг однократно внутрь вводят инозин (рибоксин). Животных забивают через 48 ч после введения пре- парата. При просчете ядер с двойным лучепреломлением выявлено, что их процент по отношению ко всем ядрам на препарате равен 43,6%. Следовательно, данное вещество обладает выраженной кардиотропной активностью.

Способ позволяет более точно (до 90%) выявить кардиотропиую активность у испытуемого вещества. Может быть использован при изыскании активных в этом направлении фармакологических средств.

Формула изобретения Способ определения кардиотропной активности вещества путем воздействия исследуемого соединения на организм с последующим исследованием препарата миокарда, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, исследование проводят в поляризованном свете, при этом в миокарде определяют ядра с двойным лучепреломлением, а активность вещества оценивают по процентному отношению ядер с двойным лучепреломлением к общему содержаний ядер на препарате.

Подписное