Антимикробный состав для подавления посторонней микрофлоры при выращивании микроорганизмов и культур тканей Советский патент 1991 года по МПК A61K45/06 A61K31/522 A61P31/00 

Изобретение относится к биотехнологии и.касается антимикробного состава, используемого в лабораторной практике и производстве при культивировании микроорганизмов и культур тканей.

Целью изобретения является усиление действия антибиотика-.

Пример 1. Предотвращение контаминации посторонней микрофлорой при культивировании антибиотикоустой чивых бактер|ий.

К 0,02 г рифампнцина (1 мае.ч.) добавляют 0,2 г кофеина (10 мае.ч). Смесь растворяют в 10,0 мл стерильной дистиллированной воды. Полученный раствор стерилизуют, пропуская через миллипоровые фильтры. Стерильный мясопептонный агар (400,0 мл)

v

-растапливают на водяной бане, охлаждают до 45 С, добавляют в него 2,0 мл раствора, содержащего антибиотик и кофеин, перемешивают и разливают по чашкам Петри. Испытуемый материал (гнойное отделяемое), полученный от животных, зараженных рифампицинустой- чивым штаммом E.coli, разводят стерильным изотоническим раствором хлорида натрия 1:5 и высевают на агар в чашки Петри. Посевм инкубируют 24 ч при 37°С, после чего на чашках наблюдается рост только бактерий ан- тибиотикоустойчивого штамма, первоначально внесенного п организм животного. Рост посторонней бактериальной флоры отсутствует.

Пример 2. Вцпеление чистых культур гриба ро я Candida.

СЛ Ч

ск

&0

К 0,01 г ампицичлина (1 мае.ч.) добавляют 0,04 г кофеина (4 мае.ч.). Смесь растворяют в 10,0 мл стерильной дистиллированной воды. Полученны раствор стерилизуют, пропуская через миллипоровые фильтры. Стерильный ага Сабуро (400,0 мл) с 4% глюкозы растапливают на водяной бане, охлажда- Ют до 45 С, добавляют к нему 5,0 мл раствора смеси антибиотика и кофеина, перемешивают и разливают по чашкам Петри. Патологический материал - соскоб со слизистой больной сульво- вагинитом - засевают штрихом на агар и чашки Петри и инкубируют 48 ч при 37°С. После инкубации при просмотре чашки отмечается рост колоний гриба белого цвета, приподнятых, блестящих, гладких, с ровным краем. При микроскопии гриб имеет типичные для рода Candida морфологические свойст- ва. Рост микробной флоры на агаре отсутствует.

Пример 3. Предотвращение микробных контаминации при выращивании культур клеток.

К 0,,0t г пенициллина (1 мае.ч.) и 0S01 г стрептомицина (1 мае„ч.) добавляют 0;013 г кофеина (1,3 мае.ч) смесь раств,оряют з 10,0 мл дистиллированной воды. Полученный раствор В количестве 5,0 мл добавляют к 400,0 мл среды № 199, содержащей 10% бычьей сыворотки, и стерилизуют Пропусканием через миллипоровые фильтры. Среду, содержащую смесь антибиотиков и кофеин, ра ливают по Культуральиым матрацпм, добавляют Клетки Hela и инкубирует при 48 ч. После инкубации на ДНР матрацев регистрируется нормальный рост кпеток Hela. Микробные проросты отсутствуют.

Способ испытан в лабораторных условиях для приготовления антимикробной смеси, использованной с целью предотвращения микробного контами- нирования культур клеток при выргщи- вании на них вирусов. Tak, в питательную среду Р 199 для культивирования клеток Hela добавляют 100 мкг/мл пенициллина 100 мкг/мл стрептомицина а в качестве микробной нагрузки - E.coli (2«10 микробных тел на 1 мл) Через 20 ч инкубации при 37°С рост микробов не регистрировался. При использовании 50 мкг/мл пенициллина и 50 мкг/мл стрептомицина в этих же условиях проведения эксперимента через 20 ч в среде размножались микробы. Если к 50 мкг/мл пенициллина и 40 мкг/мл стрептомицина добавить 200 мкг/мл кофеина, то полученная смесь защиплет среду от размножения бактерий.

Предложенный состав обеспечивает усиление действия антибиотика по сравнению с известным.

Формула изобретения

Антимикробный состав для подавления посторонней микрофлоры при выращивании микроорганизмов и культур тканей, содержащий антибиотик, отличающийся тем, что, с целью усиления действия антибиотика, он дополнительно содержит кофеин при соотношении антибиотика и кофеина 1 : (1,3 - 10).

Изобретение относится к биотехнологии и касается антимикробного состава,используемого в лабораторной практике и производстве при культивировании микроорганизмов и культур тканей. Цель изобретения - усиление действия антибиотика. Антимикробный состав- для подавления посторонней микрофлоры при выращивании микроорганизмов и культур тканей содержит антибитэтик и кофеин при определенном содержаний. § / С