Способ диагностики заболеваний толстого кишечника Советский патент 1990 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, касается вопросов диагностики заболеваний толстого кишечника, в частности дифференциальной диагностики неспецифического язвенного колита (НЯК) и рака толстой кишки„

Целью изобретения является повышение точности способа

Способ осуществляют следующим образом о

Из локтевой вены пациента берут венозную кровь без гепарина и с хге- парином (25 ед0 активности на 1 мл крови) по 5 мло

Из гепаринизированной крови выделяют градиентным центрифугированием с помощью верофиккока лимфоциты Промывают из забуференным физиологическим раствором хлористого натрия Доводят концентрацию до 1-10 - 2-106 кл/мл лимфоцитов (в 1 мл физиологической среды)„

Негепаринизированную кровь центрифугируют в течение 3 мин при „ 3000 об/мин, отделяют сыворотку крови от форменных элементов. Полученную, аутосыворотку инактивируют путем инкубации в водяной бане при 56°С в течение 30 минс

В центрифужной пробирке соединяют 0,1 мл лимЛоцитарной взвеси,

содержащей 1 -10 - 2-10 лимфоцитов

СЛ

У1 1

и 0,1 мл инактивированной аутосыво- ротки, инкубируют при С в течение 30-35 мин, к смеси добавлйют комплемент морской свинки 0,1 мл, т.е. в соотношении 2:1, инкубируют при 1 -16°С в течение 3-3,5 ч добавляют к ней 1%-ный раствор трипаново- го синего 0,1 мл, т„е. в соотношении 1:2. Определяют с помощью микроскопии витальных препаратов лимфоцитоток- сичность, подсчитывая процент нежиз неспособных лимфоцитов по синей окраске, в которую они прокрасились. При выявлении содержания нежизнеспо- собных лимфоцитов в пределах 20- 56% диагносцируют рак толстой чишки, а при показателях 6-10% - неспецифи- ческий язвенный колит-.

Способ поясняется следующими при- мерами.

Пример 1„ Больной Б. поступил с жалобами на слабость, неустой™ чявый стул, болезненность по ходу толстой кишки В копрограмме: полное поле зрения лейкоцитов и слизи. На ректоскопии: диффузная гиперемия, ломкость сосудов, участок сужения с отеком в области сигмы„

Предварительный диагноз: новообра зование толстой кишки катаральный колит неясной этиологии

Использовали предлагаемый способ диагностики. Поставили иммунологическую реакцию с 0,1 мл взвеси кле- ток, содержащей 2-10 лимфоцитов, путем добавления 0,1 мл инактивированой аутосывороткио Инкубирование проводили при 16 С в течение 30 мин. Добавили 2:1 комплемента морской свинки, инкубировали при 16°С в течение 3 ч, добавили 1%-ный трипановый синий 1:2 При определении лимфоците токсичности, выявили 6% нежизнеспособных лимфоцитов, что указало на диаг- ноз: неспецифический язвенный колит.

При повторном иммунологическом обследовании через 30 дней определил 7% нежизнеспособных лимфоцитов, что также указывало на диагноз: неспецифический язвенный колит

К этому времени при повторной ректрманоскопии не установлено сужения и новообразований, но выявлена группа эрозий, был также готов резул тат морфологического исследования слизистой толстой кишки, который подтвердил диагноз неспецифического язвенного колита

Q 5

c

0

П р и- м е р 2 Больная Б„ При поступлении жалобы на общее недомогание, периодические боли внизу живота {слева, расстройства стула по времени и характеру, чередование запоров и поносов Копрограмма: примесь слизи и крови в кале. Ректоманоскопия: явления воспаления в ректосигмоид- ном отделе толстой кишки, сосудистый рисунок смазан, стенка местами ригидная легкоранимая, контактное кровотечение, в верхнем ампулярном отделе прямой кишки выявлено опухолевидное образование. Биопсия ire. позволила выявить рак. Заключение: ворсинчатая опухоль, неспецифичес- кое воспаление о

При использовании 0,1 мл взвеси с. 1-105 лимфоцитов, соединенных с 0}1 мл инактивированной аутосыворот- кой, инкубации при 16°С в течение 35 мин с добавлением комплемента морской свинки 2:1, инкубации при 16°С в течение 3,5 ч с добавлением 1%-ного трипанового синего 1:2, определении лимфотоксичности выявлено 56% нежизнеспособных лимфоцитов, что указывало на диагноз: рак толстой кишки.

Общеукрепляющая терапия улучшила состояние больной

Через 14 дней сделана повторная биопсия„ Морфологическое заключение ворсинчатая опухоль, тубулярная аденома (доброкачественная опухоль).

На 30-й день повторно применен новый иммунологический способ диагностики, поставленный в тех же условиях, что и первый раз. Найдено 54% нежизнеспособных лимфоцитов, что указывало на диагноз: рак толстой кишки 0

На 36-й день была сделана третья биопсия. Морфологическое заключение; аденокарцинома (рак) толстой кишки.

Сделана операция: брюшно-анальная резекция ретросигмоидного отдела с низведением сигмы в анальный канал с несохраненкем сфинктера Больная проконсультирована через год, состояние хорошее до настоящего времени благодаря радикальной и своевременно проведенной операции

Итак, с помощью нового способа диагностики, в отличие от прототипа, правильный диагноз выставлен на раннем этапе заболевания, в результате

51

чего проведено успешное хирургическое лечение.

Таким образом, использование предлагаемого способа дает ряд преимуществ по сравнению с прототипом:

1. Повышается достоверность дифференциальной диагностики неспецифического язвенного колита и рака толстого кишечника (новым способом в начале заболевания и через 30 дней соответственно в 94 и 100% случаев, в то время как с помощью прототипа - только в 48 и 65% случаев).

2 „ Позволяет на 30 дней раньше выявить неспецифический язвенный колит и рак толстого кишечника.

1507

Формула

изобретения

5

Способ диагностики заболеваний толстого кишечника, включающий забор крови, выделение лимфоцитов и их инкубацию, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, из крови дополнительно выделя- ют аутологичную сыворотку, лимфоциты инкубируют с ней в присутствии . комплемента с последующим выявлением количества нежизнеспособных клеток и при количестве клеток в пределах 20-т56% диагностируют рак толстого кишечника, а в пределах 6-10% - неспецифический язвенный колит.

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике болезней толстого кишечника. Цель изобретения - повышение точности способа из локтевой вены больного берут кровь в две пробы. Из крови одной пробы выделяют лимфроциты, а из другой - аутологичную сыворотку. Затем лимфоциты инкубируют в присутствии аутологичной сыворотки и комплемента с последующим выявлением количества нежизнеспособных клеток. При количестве этих клеток в пределах 20 - 56% диагностируют рак толстого кишечника, а в пределах 6 - 10% - неспецифический язвенный колит. В сравнении с прототипом точность диагностики этих заболеваний повышается для неспецифического язвенного колита в 1,9 раза, для рака толстого кишечника 1,5 раза.