Способ получения антителсодержащего реагента для тестирования эритроцитарных антигенов сельскохозяйственных животных Советский патент 1990 года по МПК A61K39/395 

(Л

с

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к изготовлению реагентов для определения групп крови сельскохозяйственных животных. Целью изобретения является упрощение способа получения реагентов для определения групп крови сельскохозяйственных животных. Для этого используют в качестве источника реагентов сперму хряка. Для этого на искусственную вагину получают эякулят, который затем центрифугируют, и освобожденную от сперматозоидов семенную плазму тестируют на специфическую активность с панелью эритроцитов.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к изготовлению реагентов для определения групп крови сельскохозяйственных животных.

Цель изобретения -упрощение способа получения реагентов для определения групп крови сельскохозяйственных животных.

Способ осуществляют следующим образом.

Сперму от хряка получают на искусственную вагину. Эякулят центрифугируют при 2500-3000 об/мин в течение 7-10 мин. Освобожденную от сперматозоидов семенную плазму инактивируют 30 мин при 56°С. После этого выявляют серологическую активность, специфичность и титр проинакти- вированной и охлажденной до комнатной температуры плазмы. Осуществляется это

постановкой серии реакций г магглютина- ции двухкратных разведений плазмы физиологическим раствором (NaCI - 0,9, рН 6,7-6,8) с панелью эритроцитов (2,5%-ная суспензия) того вида сельскохозяйственных животных, к эритроцитам которого /планируется изготовление реагентов. За рабочий титр принимают разведение, обеспечивающее четкие реакции гемагг- лютинации, оцениваемые на 3-4 плюса. Специфичность выявляют путем сопоставления результатов серологических реакций неабсорбированной семенной плазмы с панелью эритроцитов. Если неабсорбированная плазма дает четкие реакции только с эритроцитами крови животных, обладающих какой-либо определенной ан- тигенностью (по панели), то она условно считается монорецепторной. Окончательная оценка специфичности проводится посл

00 00

Jis

еле пробных абсорбэций эритроцитами крови, дававшими положительные реакции.

В тех случаях, когда специфичность семенной плазмы не идентифицируется по панели эритроцитов проводят ступенчатую абсорбацию с последующей проверкой на специфичность. Удаление нежелательных антител осуществляют известными методами.

Обеспечение монорецепторности семенной плазмы осуществляют и путем разбавления ее физиологическим раствором до концентрации, при которой обнаруживают

действие только одного самого сильного ан титела.

Использование семенной жидкости в качестве сырья для изготовления реагентов к эритроцитарным антигенам проще по сравнению с известными сырьевыми источниками и позволяет без особых затрат по- лучать в больших объемах специфический реагенте высоким титром гемагглютининов

; (от 1:50 до 1 ;500 и выше) к широкому спектру

0

5

0

антигенных факторов крови различных видов сельскохозяйственных животных.

Взятие спермы от хряка на искусственную вагину - технологически несложный процесс, не требующий особой квалификации специалистов и значительного времени на проведение операции. При нагрузке две садки в неделю в год получают от одного хряка 14,5-16,0 л семенной плазмы (при среднем объеме эякулята 250 мл за садку).

Форму л а и 3 о бретени я

Способ получения антителсодержащего реагента для тестирования эритроцитарных антигенов сельскохозяйственных животных, включающий взятие у свиньи антител- содержащей биологической жидкости с последующей ее обработкой и тестированием с панелью эритроцитов, о т- личающийся тем, что, с целью упрощения способа, в качестве биологической жидкости используют сперму хряков.