Способ определения активности вирусного цирроза печени Советский патент 1990 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, касается области гепатологии, в частности вопроса диагностики активной и неактивной формы цирроза печени.

Цель изобретения - повышение точности способа.

Способ осуществляют следующим образом.

Из крови больных в градиенте плотности фиколл-верографина выделяют лимфоциты. Наносят на ограниченную восковым мелком часть предметного стекла 0,01 мл лимфоцитов в концентрации 1,5 - 2,5 10 кл./мл, добавля- ютО,01 мл HBsAg в концентрации 8-12 мкг/мл по белку (в контроле - 0,01 физиологического раствора), инкубируют смесь 1,5 ч во влажной камере при 37°С, неприлипшие клетки удаляют переворачиванием стекла, созданием висячей капли (на 20 мин) с последующим отсасыванием ее и отмыванием, прилипшие клетки фиксируют, окрашивают,

подсчитывают число прилипших клеток в опыте и контроле, рассчитывают индекс торможения Ит прилипания по формуле

Ит

число клеток в контроле - - число клеток в опыте число клеток в контроле

X 100 %.

При Ит, равном или выше 30%, диагностируют активную стадию цирроза печени, при Ит меньше 30% - неактивную форму цирроза печени. Был использован стандартный HBsAg, полученный генно-инженерным способом кланирования в Е.соМ. Данный антиген выпускается Промышлен- но-экспериментальным заводом Института органического синтеза ЛатвССР и прилагается к иммуноферментному набору для определения антител 1дМ-класса к HBsAg. Важной для его применения в разработанном способе характеристикой является соо о

ел

00

f MwF

держание белка. Разведение антигена до рабочей концентрации производится с помощью физиологического раствора.

П р и м е р 1. Больная 4,56 лет. в 1979 г. перенесла ВГ-В. В дальнейшем - повышенная активность АлАТ (5-6 мкМ/л), гипер- глобулинемия, HBsAg-емия. В течение 3 лет проведена терапия преднизолоном; АлАТ снизился до 2 мкМ/л. однако HBs-антигене- мия продолжалась, появились признаки перестройки в цирроз. На основании способа-прототипа поставлен диагноз - неактивный цирроз печени. Предлагаемый способ был осуществлен в двух вариантах: А - концентрация лимфоцитов 1,5 10 кл,/мл, концентрация HBsAg 8 мкг/мл, индекс торможения 38%; Б - концентрация лимфоцитов 0,5 10 кл./мл, концентрация HBsAg 5мкг/мл, индекс торможения 17%.

Вариант А способа позволяет поставить диагноз активной формы цирроза печени; вариант Б - неактивной формы цирроза печени. В дальнейшем на пункционной биопсии найдена картина активного цирроза с интенсивной плазмоклеточной инфильтрацией перипортальных полей,

Только вариант А способа позволил правильно диагностировать активную форму цирроза печени, т.е. параметры варианта А являются оптимальными для правильного осуществления способа.

П р и м е р 2. Больной Ш., 47 лет, в 1984 г. перенес ВГ-В с последующим увеличением активности АлАТ и HBsAg-емией. В 1985 г. сохранялась гепатомегалия, повышение активности размеров. С посощью способа-прототипа найдена активность АлАТ 2,0 мкМ/л, что указывает на отсутствие активности процесса.

Предлагаемый способ осуществлен в двух вариантах: А- концентрация лимфоцитов 2,5 10 кл./мл, концентрация HBsAg 12 мкг/мл, индекс торможения 30% (диагноз-активная); Б-концентрация лимфоцитов 5 10 кл./мл, концентрация HBsAg 25 мкг/мл, индекс торможения 10% (диагноз - неактивная форма цирроза печени).

На пункционной биопсии печени найдена картина перипортального гепатита, подго- портальные септы (перестройка в цирроз), т.е. окончательный диагноз - активная форма цирроза печени.

С помощью предлагаемого способа правильный диагноз удалось поставить только при использовании параметров варианта А, т.е. лишь параметры варианта А

являются оптимальными.

П р и ме р 3. Больной Ч,, 32 года; болен с 1986 г., когда впервые появилась слабость, боли в суставах, повышение АлАТ и HBsAg- емия. Монотонные проявления болезни

наблюдались в течение 1,5 лет. При стационарном обследовании в 1988 г. (история болезни 1966) показатели активности АлАТ 0,65 мМ/л ч, что свидетельствует о неактивной форме цирроза печени.

Предлагаемый способ позволил выявить индекс торможения 12%, что также свидетельствует о неактивной форме цирроза печени.

На пункционной биопсии подтверждено отсутствие признаков активности патологического процесса, т.е. окончательный диагноз - неактивная форма цирроза печени, что совпало с данными нового способа. Точность способа составляет 100% (по

прототипу 50%).

Формула изобретения Способ определения активности вирусного цирроза печени путем исследования

крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, из исследуемой крови выделяют лимфоциты, наносят их на npe/weTHoe стекло в концентрации 1,5 - 2,5 10 кл./мл, добавляют к ним HBsAg в

концентрации 8-12 мкг/мл, учитывают количество прилипших к стеклу клеток в реак- ции торможения прилипания, далее определяют индекс торможения и при индексе торможения выше или равной 30%

диагностируют активную форму вирусного цирроза печени, а при индексе торможения ниже 30% - неактивную форму заболевания.

Изобретение относится к медицине, в частности гепатологии, и касается диагностики форм активности циррозов печени. Цель - повышение точности способа. Способ позволяет достоверно диагносцировать активную и неактивную стадии цирроза печени. Способ осуществляется путем определения индекса торможения /И_т/ прилипших к стеклу лимфоцитов крови, инкубированных с HB_CAG по сравнению с прилипшими лимфоцитами, неинкубированными с HB_CAG, и при И_т равном или выше 30% диагносцируют активную стадию циррозов печени, а при более низком И_т - неактивную форму болезни. Метод прост и имеет важное медико-социальное значение, так как позволяет своевременно диагносцировать форму активности циррозов печени и тем самым проводить более обоснованную эффективную терапию больных. Точность возрастает на 50%.