Способ определения локализации ионов кальция в нервных клетках Советский патент 1991 года по МПК G01N1/28 A61B10/00 

Изобретение относится к медицине, а именно к цитохимическим методам исследования.

Цель изобретения - повышение точности способа за счет учета функциональной активности клеток.

Способ осуществляют следующим образом.

Изолированный нервный ганглий помещают в физиологический раствор. В область нейрона Ретциуса вводят электрод., регистрирующий спонтанно возникающие потенциалы действия. На этом фоне, не прерывая записи биоэлектрической активности, производят фиксацию нейрона с помощью прикосновения охлажденйбго жидким азотом до - 190°С

бруска. Момент соприкосновения отражается на осциллограмме резким смещением луча, что маркирует момент фиксации.

Далее ганглий замораживают и готовят срезы на ультрамикротоме. Срезы окрашивают 2%-ным раствором пироанти- моната калия. На срезах выпадение осадка определяют в клетках с наибольшей биоэлектрической активностью.

Одновременная фиксация позволяет точно определить, в какой биоэлектрической активности находилась клетка, что дает возможность получать достоверные результаты о динамике распределения кальция в период работы нервОЭОЭ

00 Ј

31631347

ной клетки в разные фазы потенциалазамораживания ткани жидким азотом,

действия.обезвоживания в ацетоне, охлажденном

Пример. Нервный ганглий, поме-твердой углекислотой, пропитывания в

щенный в физиологический раствор и ссмолах под вакуумом и окрашивания

подключенный к электроду, фиксируетклеток 2%-ным раствором пироантимонав момент замораживания потенциал дей-та калия с последующим определением

ствия. При окраске пироантимонатом ка-локализации ионов кальция по выпаделия выявлено выпадение осадка на мем-нию электронно-плотного осадка, о тбранах эндоплазматического ретикулу- юлнчающийся тем, что, с

ма. Много осадка в гиалоплазме. В пе-целью повьппения точности способа за

риод покоя гранулы осадка лежат вдольсчет учета функциональной активности

плазматической мембраны.клеток, до момента замораживания ткаСпособ позволяет точно связать ло-ни определяют биоэлектрическую активкализацию кальция в клетке с ее физи- $ность клеток, а локализацию ионов

ологическим состоянием.кальция устанавливают в точках наиФормула изобретениябольшей биоэлектрической активности.

Способ определения локализации ионов кальция в нервных клетках путем

Изобретение относится к области медицины, в частности к фтизиатрии, и может быть использовано для определения наличия или отсутствия распада тьани в нервных клетках. Целью изобретения является повышение точности способа за счет учета функциональной активности клеток. С этой целью проводят замораживание ткани жидким азотом, обезвоживание в ацетоне, охлажденном твердой углекислотой, пропитывают под вакуумом, окрашивают 2%-ным раствором калия и определяют локализацию ионов кальция по выпадению электронно-плотного осадка. При этом до момента замораживания ткани определяют биоэлектрическую активность клеток, а локализацию ионов кальция устанавливают в точках наибольшей биоэлектрической е активности. tf