Среда для предотвращения ишемического повреждения тканей при трансплантации органов Советский патент 1991 года по МПК A61K9/08 

Изобретение относится к медицине и касается сред для уменьшения ишемическо- го повреждения тканей.

Цель изобретения - повышение жизнеспособности тканей.

Пример1.В сбалансированную солевую смесь Хенкса без глюкозы, содержащую, мас.%: феноловый красный 0,002; NaCI 0,8; KCI 0,04; CaCl2 2НзО 0,019; MgS04 7Н20 0,02; NaaHPO-i НаО 0,006; КН2Р04 0, 006; NaHCOa 0, 035, добавляют 0,200 мас.% глюкозы и перемешивают на магнитной мешалке. Затем добавляют 0,037 мас.% глутаминовой кислоты, 0,028 мас. % пирувата натрия, 0,089 мас.% изоцитрата натрия, тщательно перемешивая среду после добавления каждого компонента. При этом доводят рН среды до 7,4 (1-2 каплями 0,1 н. КОН). Готовую среду фильтруют через стеклянный фильтр и насыщают кислородом воздуха.

П р и м е р 2. Готовят состав как указано в примере 1, но добавляют 0,015 мас.% глутаминовой кислоты, 0,011 мас.% пирувата натрия, 0,036 мас.% изоцитрата натрия.

П р и м е р 3. После декапитац ии крыс линии Вистар 12-месячного возраста сердце быстро извлекают и помещают в холодную среду Хенкса на 3 мин. Остановленное и охлажденное сердце взвешивают, каню- лируют аорту и помещают в установку для перфузии, термостатируемую при 37°С. В течение первых 3 мин сердце перфузируют средой Хенкса без глюкозы (контроль) или средой, включающей указанные метаболиты. Среду перфузии насыщают кислородом воздуха, а скорость перфузии с помощью перистальтического насоса устанавливают равной 5 мл в 1 мин на 1 г ткани сердца. После указанной 3-минутной перфузии сердце, периодически подвергают ишемии по схеме: 19 мин тотальной ишемии - 1 мин реперфузии аэрированной средой.

С целью испытания предлагаемой среды на каждой 20-й мин в течение 3 ч ишемии отбирают минутный перфузат и определяют в нем лактатдегидрогеназную активность.

Результаты отражены в табл. 1, при этом глутаминовую кислоту, пируват, изоцитрат в вариантах 1-3 добавляют в концентрации 0,074, 0,055, 0,179 мас.% соответственUCLJB

ю

о

Сд N3 -N Ю

вариантах 4-6 - 0,037, 0,028, 0.089 мас;% соответственно. Глюкозу во всех случаях добавляют в концентрации 0,200 мас.% в соответствии с известной средой. Число опытов 5-22.

П р и м е р 4. Известно, что при ишемии увеличивается интенсивность перекисного окисления липидов и накопление его конечных продуктов. При этом степень уменьшения накопления продуктов перекисного окисления липидов, обусловливаемая действием испытываемых веществ, может быть показателем их противоишемических свойств,

С этой целью измеряют содержание одного из конечных продуктов перекисного окисления липидов (малонового диальдеги- да) в гомогенатах миокарда крыс после 3 ч ишемии. В течение 3 ч ишемии ткань миокарда снабжают сбалансированной солевой средой Хенкса без глюкозы (контроль), средой Хенкса, содержащей 0,200 мас.% глюкозы (известная среда), и предлагаемой средой. Содержание малонового диальде- гида определяют с 2-тиобарбитуровой кислотой.

Как видно из данного примера (табл.2), известная среда снижает накопление малонового диальдегида при ишемии только на 26% по сравнению с контролем, а предлагаемая на 47%.

П р и м е р 5. Влияние на сохранение сократительной активности сердца после 20, 40, 60 и 80 мин прерывистой ишемии.

С этой целью крыс линии Вистар 12-месячного возраста декапитируют, сердце быстро извлекают и помещают в охлажденную среду Хенкса на 3 мин. Остановленное и охлажденное сердце взвешивают, канюлируют аорту и помещают в установку для перфузии, термостатируемую при 37°С. В течение первых 5 мин сердце перфузируют средой Хенкса, включающей указанные ме- таболиты, или средой, включающей только глюкозу (известная среда). Среду перфузии насыщают кислородом воздуха, а скорость перфузии с помощью перистальтического насоса устанавливают равной 5 мл в 1 мин на 1 г ткани сердца. После 5-минутной перфузии сердце периодически подвергают ишемии по схеме: 19 мин тотальной ишемии - 1 мин реперфузии аэрированной средой. После 20, 40, .60 или 80 мин прерыви- стой ишемии начинают реперфузию с целью регистрации возобновления сократительной активности сердца. Для выравнивания условий испытания сердец, подвергнутых прерывистой ишемии с предлагаемой сре- дои и известной, постишемическую перфузию проводят одной средой - известной. Результаты отражены в табл.3. Предлагаемая среда позволяет увеличить степень защитного противоишемиче- ского действия.

Формула изобретения Среда для предотвращения ишемиче- ского повреждения тканей при трансплантации органов, содержащая состав Хенкса, отличающаяся тем, что, с целью повышения жизнеспособности тканей, она дополнительно содержит глутаминовую кислоту, пируват натрия, изоцитрат натрия при следующем соотношении компонентов, мае. %:

Глутаминовая кислота0,015 -0,074

Пируват натрия0,011-0,055

Изоцитрат натрия0,036-0,179

Состав ХенксаОстальное

,Q5 Относительно контроля. Относительно прототипа Относительно вариантов 1-5.

Таблица 2

Изобретение относится к медицине и касается сред для предотвращения ише- мического повреждения, тканей при трансплантации органов. Цель - повышение жизнеспособности тканей. Среда содержит глутаминовую кислоту, пируеат натрия, изоцитрат натрия, состав Хенкса при определенном соотношении компонентов .Зтабл.

Таблица 3