Способ оценки устойчивости сортов картофеля к бактериальной гнили ERWINIa саRотоVоRа VaR. атRоSертIса Советский патент 1991 года по МПК A01H1/04 

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в селекции растений.

Цель изобретения - ускорение и повышение точности оценки.

Способ осуществляют следующим образом,

Отбирают по пять внешне здоровых, средних по размеру клубней каждого образца, хорошо моют в проточной воде Затем клубни стерилизуют любым из известных способов - бактерицидной лампой, обработкой спиртом и др. Анализ на содержание фитоалексинов производят известным способом. После дезинфекции клубни разрезают вдоль пополам.

Половинки пяти клубней размещают на дно кристаллизатора На свежеразрезанную поверхность одной половинки каждого клубня ложечкой, обычно используемой для индексации, с диаметром 12 мм вырезают по 2 лунки.

На соответствующих других половинках клубней вырезают по 4 лунки на одинаковом расстоянии от перидермы и оставляют на залечивание в открытом кристализаторе на 15 мин.

Таким же образом подготавливают лунки второго образца в другом кристаллизаторе.

. Через 15 мин в каждую лунку пипеткой вводят по 0,5 мл бактериальной суспензии 1-2 суточной культуры возбудителя болезни в концентрации 100 мл бактериальных клеток в 1 мя,.Для инокуляции используют высоковирулентный штамм микроорганизмов

сь

00

о

СП

со

Кристаллизатор накрывают стеклом с влажной стерильной фильтровальной бумагой (8 слоев) и оставляют при 23-25°С, Через 20 ч после инокуляции содержимое лунок выгребают шпателем в мерный стаканчик, заме- ряют объем, который переносят в колбу с притертой пробкой, смывая остаток 2-3 мл дистиллированной воды.

Образцы следует брать в той же последовательности, в какой шло заражение, и с тем же интервалом времени, т.е. через каждые 15 мин.

Для определения ришитина используют содержимое 10 лунок из половинок 5-ти клубней, для любимина - 20 лунок из других половинок. Фитоалексины извлекают 4- кратной экстракцией гексаном.

Для ришитмиа первую экстракцию осуществляют 70 мл гексана, три последующие - по 35 мл, для любимица первая экстракция - по 140 мл, три остальные - по 70 мл. Гекса- новые экстракты выпаривают в чашках в вытяжном шкафу. Для определения риши- тина в чашки добавляют б мл концентрированной серной киелоты, после чего возникает красно-малиновое окрашивание.

Оптическую плотность растворов измеряют на ФЭКе с фильтром № 5.

Для определения любимина к сухому остатку приливают 6 мл реактива Эрлиха.

Через 90 мин пробы приобретают сине- зеленую окраску, оптическую плотность которой измеряют на ФЭКе с фильтром № 8. Количество фитоалексинов рассчитывают по калибровочным кривым, построенный по чистым ришмтину и любммину.

Сорта с содержанием фитоалексинов более 50 мкг/мл относят к высокоустойчивым, от 40 до 50 мкг/мл - к устойчивым, 20 мкг/мл и менее - к восприимчивым, а сред- нвустойчивые сорта занимают промежуточное положение.

Сравнительная оценка устойчивости районированных сортов картофеля к бактериальной гнили (штамм 662) по содержанию фитоалексинов и известным способом приведена в таблице.

Способ позволяет повысить точность и ускорить процесс оценки картофеля.

Формула изобретения

1.Способ оценки устойчивости сортов картофеля к бактериальной гнили Erwfnla carotovora var. atroseptlca, включающий создание лунок и искусственное заражение клубней высоковирулентным штаммом возбудителя инфекций в лунку, измерение биологического показателя, по значению которого оценивают устойчивость, отличающийся тем, что, с целью ускорения и повышения точности оценки, в качестве биологического показателя используют суммарное содержание фитоалексинов, измерение проводят, начиная с 20 ч после заражения, при этом сорта с суммарным содержанием фитоалексинов более 50 мкг/мл относят к высокоустойчивым, мкг/мл- к устойчивым, менее 20 мкг/мл - к восприимчивым, а среднеустойчивые сорта по данному показателю занимают промежуточное положение.

2.Способ поп. 1,отличающийся тем, что заражение проводят через 15 мин после создания лунок.

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в селекции растений. Цель изобретения ускорение и повышение точности оценки Для оценки устойчивости сортов картофеля к бактериальной гнили отбирают внешне здоровые клубни, дезинфицируют, разрезают пополам, делают лунки, в которые помещают 0 5 мл бактериальной суспензии 1-2 суточной культуры возбудителя болезни в концентрации 100 мл клеток в 1 мл Для инокуляции используют высоковирулентные штаммы Через 20 ч после инокуляции производят извлечение фитоалексинов четырехкратной экстракцией гексаном и подачей их суммарного количества Образцы, содержащие выше 50 мкг/мл фитоалексинов, относят к высокоустойчивым, 40- 50 мкг/мл - к восприимчивым, а среднеустойчивые сорта по данному показателю занимают промежуточное положение 1 з п. ф-лы, 1 табл. (Л С