Способ определения индивидуальной чувствительности к альфа-1-адреноблокатору Советский патент 1991 года по МПК G01N33/15 

Изобретение относится к медицине, в частности к кардиологии, и может быть использовано для определения индивидуальной чувствительности больного к лекарственным средствам - блокаторам альфа-1-адренорецепторов.

Цель изобретения - предупреждение ортостатических и аллергических реакций.

При мер. Больная И, 15 лет Диагноз: бронхиальная астма, инфек- ционно-аллергическая форма I средней тяжести, эмфизема легких, хронический обструктивный бронхит.

Больная страдала бронхиальной астмой- в течение 14 лет, отмечала непереносимость гормональных препаратов, анальгина, наблюдались приступы бронхослазма в ответ на физическую нагрузку. На спирограмме - явления генерализованной бронхиальной обструкции, особенно выраженные на уровне мелких бронхов.

У больной осуществлен забор 18 мл крови из локтевой вены в пробирку, содержащую 3 мл АСД - антикоагулянта (состав антикоагулянта следующий: двуводный цитрат Na 6,25 г; лимонная кислота 3,5 г; декстроза 5 г; 250 мл). Центрифугированием (центрифуга Бекман - TG6, комнатная темпег ратура 1100 об/мин) было получено

7 мл плазмы, обогащенной тромбоцита ми центрифугированием (те же условия, 160 об/мин) получен осадок тромбоцитов, ресуспендированный в 5 мл буфера А (состав буфера А еле- дующий: NaCl 150 мМ; КС1 2,2 мМ; NaH2P04 0,37 мМ; СаС14 1 мМ; MgCl z мМ; Д-глюкоза 5 мМ; HEPKS 10 мМ; бычий сывороточный альбумин 0,35%; гепарин 1,55 мг; 4 ед. апираэы; ,55). К этой суспензии клеток добавляют зонд фура-2АМ из расчета 4 мкМ в конечной концентрации; проводят инкубацию клеток с зондом 30 мин при 30°С Затем центрифуги рованием (те же условия 1 100 об/мин) получают конечный осадок тромбоцитов, который ресуспепозируют в буфере В (состав буфера В: NaCl 150 мМ; КС1 2,7 мМ; NaH2.P04 0,37 мМ; СаС1г 2 мМ; MgCl2 1 мМ; Д-глюкоза 5 М; HEPES 10 мМ; рН 7,4 и бычий сывороточный альбумин 0,35%). Определение флуоресценции проводят на спектро- флуориметре Hitachi-850 в 1-см термостатируемой кювете при 30°С. Для изучения каждого отдельного образца в кювету помещают 100 мкл суспензии и 900 мкл буфера В. Длины волн возбуждающего света 340 нм, эмиссии 500 нм, ширина щелей 5 нм, прибор работает в режиме сканирования по времени. Определение концентрации СаЈ+ в клетках проводят знало- гично вышеизложенному Определяют концентрацию базального Са2+ в нестимулированных клетках и концентрацию в тромбоцитах на пике стимуляции, по разнице определяют величину ( i), представляющую величину кальциевого ответа Ca2f 1}стим - . Объемы добавок не превышают 3% объема среды

, 4

в не, Назальное содержание Са стимулированных клетках составляет 110 нМ, а на пике стимуляции клеток 1 мкМ везопрессина - 398 нМ Цсаг +i составляет соответственно 398-110 298 нМ СаЈ4 Одновременная стимуляция адренорецепторов (0,1 мкМ пропра нолола и 1 мкМ адреналина) и рецепто

to

15

-35

423854

ров к вазопрессину Јcai+ij составляет 336 нМ Следовательно, эффект лечения празозином будет удовлетворительным

Больной было проведено лечение празозином в дозе 3 мг/сут В течение 2 мес В течение этого периода состояние больной прогрессивно улучшилось, что выражалось уменьшением частоты приступов удушья в покое и в ответ на физическую нагрузку, уре- жением приема бронходилятаторов, уменьшением количества отделяемой мокроты Клиническое улучшение подтверждалось данными функционального обследования дыхательной системы: отмечался значительный прирост бронхиальной проходимости, составивший по данным спирографии 72% на уровне мелких бронхов Это показывает, что у больной с умеренной степенью повышения содержания кальция в ответ на насыщающие концентрации кальцийповы- шающих гормонов клинический эффект хронической терапии празозином был достаточно выраженным

В данном примере имело место совпадение прогноза эффективности лечения празозином, поставленного по определению индивидуальной чувствительности предлагаемым способом, с эмпирически выявленным эффектом лечения этим препаратом.

20

25

30

Формула изобретения

Способ определения индивидуальной чувствительности к альфа-1-адрено-

блокатору, отличающийся тем, что, с целью предупреждения ортостатических и аллергических реакций, определяют концентрацию ионов кальция в цитоплазме тромбоцитов кро-

ви in vitro, стимулируют тромбоциты кальций-повышающими гормонами и при повышении содержания ионов кальция в пределах 50-400 нМ на пике стимуляции клеток насыщающими концентра-

циями гормонов больного считают чувствительным к альфа-1-адреноблокато- РУ.

Изобретение относится к кардиологии и может быть использовано для определения индивидуальной чувствительности больного к лекарственным средствам - блокаторам альфа-1-адре норецепторов. Целью изобретения является предупреждение ортостатических и аллергических реакций. Способ осуществляется путем определения концентрации ионов кальция в цитоплазме тромбоцитов крови in vitro. Стимулируют тромбоциты кальций-повышающими гармонами и при повышении содержания ионов кальция в пределах 50-400 нМ на пике стимуляции клеток насыщающими концентрациями гормонов больного считают чувствительности к альфа-1-ад- реноблокатору. с «