Изобретение относится к биотехнологии, в частности к биохимическим анализам белков растений, и может быть использовано в селекции на повышение качества зерна.
Рожь обладает наибольшей из всех зерновых культур склонностью к предуборочному прорастанию на корню. Прорастание зерна в колесе снижает не только технологические, но и посевные и урожайные свойства, приводя в отдельные годы в 50%-ной потере урожая озимой ржи.
Цель изобретения - повышение точности анализа и ускорение отбора.
Способ состоит в том, что отбор ведут, оценивая активность ингибиторов протеаз, участвующих в инактивировании группы амилазного комплекса, т.е. оценивая степень ингибирования амилазы прорастания, что позволяет вести целенаправленный отбор высокоустойчивых форм с генетически обусловленной устойчивостью к предуборочному прорастанию.
Способ включает экстракцию белков, их диск-электрофорез с получением белкового спектра, последующий анализ на содержание ингибиторов протеаз, оценку компонентов, участвующих в ингибировании амилаз прорастания и отбор форм, содержащих компоненты с максимальной выраженностью, шириной и минимальной подвижностью для данной популяции.
Пример 1. Зерновки каждого образца по 50 шт раздавливают, заливают трис-гли- циновым буфером рН 8,3, оставляют на холоде на 3 ч, перед электрофорезом добавляют сахарозу до 40%-ной концентрации, электрофорез проводят в пластинах ПААГ, 8,5%, 1,5-2 ч. Белки окрашивают ами- дошварцем в смеси с кумзси голубым.
Приготовление реактивов геля:
Ащ рН 8,9
о сл о о
4
ю
1п.НС148мл
трис 36,6 г
тэмэд 0,23 мл
Вода димирализованная До 200 мл
Бщ
АкЗОг
МБА 0,8 г
Вода димирализованная До 200 мл
Вщ
ПСА 0.56 г
Вода До 100 мл
Гщ
HCI 48 мл
трис 6 г
тэмэд 0,46 мл
Вода До 100мл
Дщ
АКЮг
МБА 2,5 г
Вода До 100мл
Ещ
Сахароза 40 г
Вода До 100 мл
РФ
Рибофлавин 4 мг
Вода До 100мл
Нижний гель: 2 объема Ащ; 4 объема Бщ,- 1 объем Вщ.
Верхний гель: 1 объем Гщ; 3 объемагДщ; 1 объем Ещ; 1 объем Рф.
Отбирают образцы с преобладанием генотипов с достаточной выраженностью, шириной и низкой подвижностью фракций верхней части спектра.
Изучены 32 образца озимой ржи по подвижности компонентов в верхней части спектра, их выраженности и ширины. Отобраны 2 образца (Ганна и Жодино) с подвижностью 14, 13, выраженностью 5 баллов, шириной 5 мм и высеяны в поле. Проведен трехкратный пересев и оценка потомства в сравнении с неотобранными образцами, данные приведены в таблице. Из таблицы видно, что образцы, выделенные по оценке показателей по предлагаемому способу, в провокационных условиях на 8-е сут проращивания не имеют проросших зерен (1985-1986 г) либо имеют самый низкий процент таких зерен (1987 г). При оценке образцов по известным способам точность недостаточная: активность компонентов амилазы прорастания непостоянная по годам или отсутствует, например у образца Таловская в 1985 г 5 мм. в 1986 г 3 мм, в
t987 r отсутствует.
Пример 2. Берут семьи сорта озимой пшеницы ржи Крупнозерная по 15 зерен каждой семьи. Электрофорез полученного материала и анализ электрофореграмм проводят аналогично примеру 1. Отобраны семьи с преобладанием генотипов с достаточной выраженностью, шириной и низкой подвижностью фракций ингибиторов проте- аэ в верхней части спектра.
Предлагаемый способ отбора форм озимой ржи устойчивых к предуборочному прорастанию, позволяет вести определение потенциальной устойчивости к предуборочному прорастанию свежеубранного и покоящегося зерна, целенаправленно отбирать высокоустойчивые к предуборочному прорастанию генотипов, повышает точность анализа, позволяет отбирать формы с генетически обусловленной устойчивостью.
Формула изобретения Способ отбора форм озимой ржи, устойчивых к предуборочному прорастанию, включающий экстракцию белков зерна с последующим диск-электрофорезом и отбор устойчивых форм на основании полученного белкового спектра, отличающийся тем, что, с целью повышения точности анализа и ускорения отбора, в полученном белковом спектре анализируют компоненты легкорастворимых белков в зоне, соответствующей амилазам прорастания, и отбор устойчивых форм проводят по максимальной выраженности, ширине и минимальной подвижности анализируемых компонентов.
Примечание. - обозначает отсутствие указанного признака..
название | год | авторы | номер документа |
---|---|---|---|
Способ отбора скороспелых форм озимых ржи и тритикале | 1989 |
|
SU1658927A1 |
Способ отбора константных короткостебельных форм озимой ржи | 1986 |
|
SU1360655A1 |
Способ оценки пшеницы на устойчивость к фузариозу | 1990 |
|
SU1779305A1 |
Способ отбора форм тритикале на выполненность зерна | 1987 |
|
SU1454324A1 |
Способ определения трипсинингибирующей активности семян бобовых и злаковых культур | 1980 |
|
SU967418A1 |
СПОСОБ АНАЛИЗА ПАНКРЕАТИТА И СОДЕРЖАЩИХ ЕГО КОМПОЗИЦИЙ | 2004 |
|
RU2359270C2 |
ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО И СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ НАРУШЕНИЙ ВРОЖДЕННОГО ИММУННОГО ОТВЕТА | 2014 |
|
RU2671832C1 |
Способ идентификации ингибиторов L-амилаз | 1981 |
|
SU969720A1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТРАНСГРЕССИВНЫХ РАСТЕНИЙ ОЗИМОЙ РЖИ | 2000 |
|
RU2197815C2 |
Высокоамилозная пшеница | 2011 |
|
RU2619636C2 |
Изобретение относится к биотехнологии и касается биохимического анализа белков растений. Возможно применение в сельском хозяйстве при селекции на повышение качества зерна. Целью изобретения является повышение точности анализа и ускорение отбора. Способ состоит в том, что анализируют спектр ингибиторов протеаз, полученный в результате диск-электрофореза белков ржи, при этом отбирают формы, содержащие компоненты с максимальной выраженностью, шириной и минимальной подвижностью для данной популяции. 1 табл.
Конарев В.Г | |||
Белки пшениц - М., Колос, 1980. |
Авторы
Даты
1991-05-23—Публикация
1988-03-30—Подача