Штамм 47/S вируса гриппа А(НЗ N2) для получения живой гриппозной интраназальной вакцины для детей Советский патент 1991 года по МПК C12N7/00 

Изобретение относится к медицинской вирусологии и может быть использовано для профилактики эпидемического вируса.

Целью изобретения является получение вакцинного штамма актуальной разновидности на основе эпидемического вируса А/Сичуань/2/87 (НЗ №2).

Вакцинный штамм 47/S получен методом рекомбинации эпидемического вируса А/Сичуань/2/87 (НЗ №2) с холодоадаптированным температурочувстительным штаммом А/Ленинград/134/47/57 (Н2 №2) - донором аттенуации (разность титров при 32 и 40°С - 7,75 Ig ЭЙД 50/0,2 мл с последующей селекцией в присутствии антисыворотки А/Ленинград/134/47/57 (Н2 №2). Штамм депонирован в Государстенной коллекции вирусов под №2185.

Штамм 47/S (НЗ №2) унаследовал от донора аттенуации гены 1,2,5, 7,8, кодирующие белки РВ2, РВ1, NP, М, МЗсоответст- венно и2 гена, кодирующие поверхностные антигены (гемагглютинин и нейраминидазу) от эпидемического вируса.

Температурочувствительный холодоа- даптированный рекомбинант 47/S унасле- довал 5 ts-му таций в генах 1, 2, 5, 7, 8 от донора аттенуации, которые обеспечивают высокую степень ареактогенности и генетической стабильности (разность титров репродукции штамма 47/S при 32 и 40°С - 7,75 Ig ЭЙД 50/0,2 мл).

Таким образом, представленный вакцинный штамм 47/5 характеризуется сочетанием полезных признаков родительских вирусов, необходимых вакцинному штамму - антигенной специфичностью поверхностных белков актуального эпидемического вируса А/Сичуань/2/87 (НЗ №2) и температурочувствительностью и холодоа- даптированностью, коррелирующей с атте- нуацией для человека.

Морфология штамма 47/S (НЗ №2) - полиморфная, типичная для вируса гриппа.

Характеристика штамма 47/S (НЗ №2). Состав генома: гены 4 и бот эпидемического вируса, гены 1, 2, 3, 5, 7, 8 от донора аттенуации. Инфекционная активность при репродукции в развивающихся кур.иных эмбрионах 8,0 - 8,5 Ig ЭЙД 50/0,2 мл в течение 48 ч при 32 - 34°С. Гемагглютини- рующая активность 1:256. ВСТад - признак 7,75 Ig ЭЙД 50/0,2 мл. Проявляет стабильность биологических признаков после 5- кратного пассирования в развивающихся куриных эмбрионах. Обладает ареактоген- ностью и выраженной иммуногенной активностью при интраназальном введении детям 3-15 лет.

П р и м е р 1. Группе из 20 серонегатив- ных детей 3-15 лет водят интраназально в объеме 0,5 мл вакцинный штамм 47/S (НЗ №2) с инфекционным титром 7,5 Ig ЭЙД 50/0,2 мл. Среди привитых не регистрируется ни одной температурной реакции выше 37,5°С (показатель реактогенности 0). При обследовании 5 сывороток от детей с исходным титром 1:8, вакцинированных двукратно, 4 имеют 4-кратный и более прирост антител (80%). В группе из б человек с исходным титром антител 1:16 также обнаруживают 4-кратное увеличение антител у 5 детей (83,3%).

П р и м е р 2. Группе из 100 серонегатив- ных детей 3- 15 лет (титр 1:8) интраназально вводят вакцинный штамм 47/S (НЗ №2). После первой вакцинации у всех привитых детей, ответивших температурной реакцией в поствакциналъном периоде, лихорадка не превышает субфебрильных цифр (до 37,3°С), появляется преимущественно на 2- или 3-й день после введения препарата и сохраняется, как правило, не более суток и лишь в единичных случаях до 2 сут. Среди детей контрольной группы (получивших плацебо) также имеет место одна субфебрильная температурная реакция у одного ребенка. На повторное введение вакцины с интервалом в 3 недели ни в одном случае не зарегистрировано развития сильных и средних температурных реакций как на группу в целом, так и на группу серонегативных детей. Таким образом, клиническое наблюдение за детьми, получившими препарат, показывает ареактогенность вакцины.

По данным РТГА достоверные серокон- версиии регистрируют в сыворотках серонегативных детей (0 - 1:8) в 100,0; 64,9 и 70,5% к антигенам А/Ленинград/289; A/47/S и А/СССР/2/85 соответственно. После двухкратной вакцинации защищенными оказываются 51,4% детей на группу с исходным титром 1:8.

Формула изобретения

Штамм 47/S вируса гриппа А (НЗ №2) ГКВ № 2185 для получения живой интрана- зальной гриппозной вакцины для детей.

Изобретение относится к медицинской вирусологии и может быть использовано для профилактики эпидемического вируса. Цель изобретения - получение вакцинного штамма актуальной разнородности на основе эпидемического вируса А/Сичуань/2/87 (НЗ №2). Вакцинный штамм 47/S (НЗ №2) - рекомбинант, полученный скрещиванием эпидемического вируса А/Сичуань/2/87 (НЗ №2) с холодоадаптированным темпера- турочувствительным вирусом А/Ленинг- рад/134/47/57 (Н2 ) - донором аттенуации, безвредным для взрослых и детей, свойства которого дают возможность гарантированно получать рекомбинантные вакцинные штаммы из вновь появляющихся эпидемических вирусов. Штамм 47/S активно репродуцируется в развивающихся куриных эмбрионах при оптимальной температуре (32 - 34°С), разность в показателях инфекционной активности при 32 и 40оС 7,75 Ig ЭЙД 50/0,2 мл. Рекомбинант унаследовал от эпидемического вируса 2 гена, кодирующих поверхностные белки (ге- магглютинин и нейраминидазу), и 6 генов, кодирующих негликозилированные белки от донора аттенуации. По данным рекомби- национного анализа в геноме штамма 47/S имеется 5 ts-мутаций, характерных для донора аттенуации вируса А/Ленинг- рад/134/47/57, наличие которых коррелирует с аттенуацией вируса для человека. Штамм 47/S ареактогенен для детей 3 - 15 лет при интраназальном введении и вызывает сероконверсии у 70,5% привитых с исходным титром 1:8. О ел ел ю оо ел