Штамм вируса гриппа А/НШ/3/86/17 (HIN1) для получения живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и детей Советский патент 1990 года по МПК C12N7/00 

Изобретение относится к медицинской вирусологии и может быть использовано для профилактики эпидемического гриппа.

Целью изобретения является получение вакцинного штамма актуальной разновидности на основе эпидемического вируса А/Новошахтинск/3/86 (H1N1) (антигенно идентичный международному -эталону А/Сингапур/6/86), пригодного для иммунизации взрослых и детей.

Штамм депонирован в Государственной коллекции вирусов под номером 2148.

Вакцинный штамм А/НШ/3/86/17 получен в результате рекомбинации эпидемического вируса А/Новошахтинск/3/86 (Н1М)схолодоадаптированнымтемпературочувствительным штаммом А/Ленинг- рад/134/57/17(Н2М2) (разность титров при 32° и 40°С - 6,5 Ig ЭЙД 50/0,2 мл) с последующей селекции в присутствии антисыворотки. А/Ленин град/134/57/17 (Н2 N2).

Штамм А/НШ/3/86/17 (H1N1) унаследовал от донора А/Ленинград/134/57/17 (H2N2) гены 1, 2, 3, 5, 7 и 8, кодирующие белки РВ2, РВ1, PA, NPM и NS соответственно, и 2 гена от эпидемического вируса А/Новошахтинск/3/86(Н1М) кодирующие поверхностные (протективные) белки гемаг- глютинин и нейраминидазу, Штамм А/НШ/3/86/17 (H1N1) унаследовал также от холодоадаптированного штамма А/Ле- нинград/134/57/1/17(Н2)Згз-мутации в

СП

VI о

Os

VI

генах 1, 5, 7. Таким образом, указанный вакцинный штамм сочетает в себе полезные признаки родительских штаммов - антигенную специфичность гемагглютинина и нейраминидазы.эпидемического А/Новощах- тинск/3/86 (H1N1) и гены, несущие безвредность от холодоадаптированного штамма А/Ленинград/134/57/17 (H2N2). Особо следует отметить, что сам штамм А/Ленинград/134/57/17 (H2N2) донор генов аттенуации (безвредности) не вызывает поствакцинальных реакций даже у детей малюточного (1-2 лет) возраста. Безвредность указанного штамма обоснована путем иммунизации больших по численности кон- тингентов, насчитывающих более 100000 детей.

Морфология штамма А/НШ/3/86/17 (Н1N1) - полиморфная, типичная для вируса гриппа.

Штамм А/НШ/3/86/17 (H1N1) характеризуется следующим составом генома: гены 4 и 6 от эпидемического вируса, гены 1,2,3, 5, 7 и 8 от холодоадаптированного штамма. Штамм накапливается в куриных эмбрионах до 8,25-8,5 Ig ЭЙД 50/0,2 мл в течение 48 ч при 32°С. Агглютинирует эритроциты кур в разведении 1:256. Репродукционная активность при 40°С снижена на 6,25 Ig ЭЙД 50/0,2 мл по сравнению с показателями при 32°С. Штамм несет в 1,5 и 7 генах ts-мута- ции. Имеет коэффициент распределения (показатель гидрофобности) в системе фи- кол-400/декстран-40 (соотношение 25/20 вес. %)--0,8. Проявляет стабильность биологических признаков после 5-кратного пасси- рования в развивающихся куриных эмбрионах. Обладает ареактогенностью и необходимым уровнем иммуногениости при интраназальном введении восприимчивым взрослым людям и детям 3-15 лет.

П р и м е р 1. Группе из 16 серонегатив- ных лиц с титрами антител 0-1:16 (добровольцев) вводят интраназально в объеме 0,5 мл вакцинного штамма А/НШ/3/86/17 (Н 1N1) с инфекционным титром 7,25 Ig ЭЙД 50/0,2 мл. Среди привитых не регистрируют ни одной температурной реакции выше 37,5°С (показатель реактогенности - 0). При обследовании в РТГА 13 парных сывороток от привитых с исходными титрами антиге- магглютининов 0-1:8, 4-кратный и более

прирост регистрируют среди однократно вакцинированных в 10 случаях (77%), среди двукратно вакцинированных в 12 случаях (92,3%).

Пример 2. Группе из 90 серонегативных лиц с титром антител 0-1:16 вводят интраназально в обьеме 0,5 мл вакцинный штамма А/НШ/3/86/17 (H1N1) с инфекционным титром 7,25 Ig ЭЙД 50/0,2 мл. После

иммунизации регистрируют 1 среднюю кратковременную реакцию (повышение температуры до 37,6°С). Показатель реактогенности вакцины ниже предельно допустимого уровня в 2,0% (1.1%). 4- кратный

прирост антител отмечают в 57,3% случаев после однократного введения препарата (35 сероконверсий среди 61 обследованных парных сывороток).

П р и м е р 3. Иммунизируют интраназально 20 серонегативных деталей в возрасте 3-14 лет в объеме 0,5 мл вакцинного штамма А/НШ/3/86/17 (H1N1) с инфекционным титром 7,25 Ig ЭЙД 50/0,2 мл. После иммунизации отсутствуют реакции с повышением температуры выше 37,5°С (показатель реактогенности - 0). При обследовании 20 парных сывороток, полученных от привитых однократно, сероконверсий регистрируют в 16(80,0%). После двукратной в 94,1%

случаев (в 16 сыворотках из 17 обследованных).

П р и м е р 4. 123 серонегативным детям 3-14 лет вводят вакцинный штамм А/НШ/3/86/17 (H1N1) в объеме 0,5 мл с

инфекционным титром 7,25 Ig ЭЙД 50/0,2 мл. После иммунизации отмечают 1 поствакцинальную реакцию средней тяжести (повы- шение температуры до 37,7°С), что составляет 0,8%. Аналогичное повышение

температуры наблюдают в контрольной группе, включающей 114 детей (0,9%). Показатель реактогенности вакцинного штамма: 0,4-кратный и более прирост антител а парных сыворотках, взятых у детей привитых

однократно выявляют у 53 при обследовании 83 образцов (63,8%).

Формула изобретения Штамм вируса гриппа А/НШ/3/86/17 0 (H1N1) ГКВ N«2148 для получения живой

гриппозной интраназальной вакцины для

взрослых и детей.

Изобретение относится к медицинской вирусологии и может быть использовано для профилактики эпидемического гриппа. Цель изобретения - получение вакцинного штамма актуальной разновидности на основе эпидемического вируса А/Новошахтинск/3/86 (H1N1) (антигенно идентичный международному эталону А/Сингапур/6/86), пригодного для иммунизации как взрослых, так и детей. Штамм назван А/НЩ/3/86/17 и депонирован в Государственной коллекции вирусов под номером 2148. Штамм обладает ареактогенностью и необходимым уровнем иммуногенности при интраназальном введении восприимчивым взрослым и детям 3-15 лет.