Способ определения жизнеспособности неполовозрелых форм цестод Советский патент 1991 года по МПК A61B10/00 

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к определению жизнеспособности яиц и личинок гельминтов, а также может быть использовано в медицине и является дополнительным к основному авт. св. № 1337057.

Цель изобретения -увеличение продолжительности активного состояния неполовозрелых форм цестод.

Л р и м е р 1. Для активизации яиц цестод применяют 2%-ный водный раствор соляной кислоты или 0,2%-ный водный раствор едкого калия и активизирующий раствор, имеющий следующий состав пищеварительных ферментов на дистиллированной воде, г,%: панкреатин медицинский 1,2, сода пищевая 1,3, желчь овечья 20. Растворы рекомендуется использовать не ранее, чем через 2 ч после приготовления. Активность его сохраняется 10ч при комнатной температуре и 36 ч при хранении в холодильнике при температуре воздуха 5-7°С.

Зрелые членики цестод М. multicops с помощью препаровальных игл освобождают от яиц, к яйцам добавляют воду и получаю суспензию яиц цестод, хранящуюся в холодильнике в физрастворе при температуре воздуха 5-7° С.

На предметное стекло с лункой помещают с одной каплей воды 100-150 яиц М. multlceps, затем вливают 1 каплю 2%-ного водного раствора соляной кислоты и ставят в термостат при температуре воздуха 62°С. Через 2 мин пробу достают и добавляют в нее 6 капель активизирующего раствора и снова помещают в термостат при той же температуре на 2,5 мин. Затем пробу достают, ставят на предметный столик микроскопа и освещают электрической

Qs О

Os О

х|

hO

лампой 200 Вт, установленной на расстоянии от 5 до 35 см от пробы сроком на 3- 5 мин и смотрят под микроскопом (объектив х 8, окуляр х 15) ня содержание освободившихся от оболочек яйца онкосфер и на их подвижность.

В качестве контроля берут пробу с яйцами М. multlceps и подвергают воздействию 2%-ным водным раствором соляной кислоты и ставят в термостат при температуре воздуха 62° С продолжительностью на 2 мин. Затем в пробу вливают активизирующий раствор и инкубируют в термостате при той же температуре воздуха с экспозицией 2,5 мин, после чего исследуют под микроскопом при температуре воздуха 26° С.

Результаты отображены в табл.1, из которой видно, что в опытных пробах яиц под воздействием электрической лампы с увеличением температуры воздуха до 34-38° С соответственно увеличились продолжительность активного состояния и число их движений в 1 мин в 1,2-1,6 раза; при 40,5° С показатели интенсивности жизнедеятельности были близки к контрольной пробе и при 46° С интесивность движения ниже, чем в контроле.

П р и м е р 2. Для инкубации протоско- лексов цестод применяют тот же активизирующий раствор пищеварительных ферментов.

На предметное стекло с лункой вливают с 1-2 каплями суспензии протосколексы Е. granulosus (40-60) экземпляров при комнатной температуре воздуха, зародышевые капсулы с протосколексами разрывают с помощью препаровальных игл. Добавляют 5-6 капель активизирующего раствора и помещают на предметное стекло в термостате при 62° С на 1 мин, Затем пробу вынимают из термостата, помещают на предметный столик микроскопа МБС (объектив х 2 и х 4, окуляр х 8), подвергают инфракрасному воздействию электрической лампой 200 Вт на расстояние от пробы протосколексовот5 до 25 см в продолжении 3-4 мин и одновременно аедут подсчет подвижных и вывернутых зародышей.

В качестве контроля берут предметное стекло с лункой с 1-2 каплями протосколексов Е. granulosus (40-60 экземпляров) из свежевзятых эхинококковых цист и помещают в термостат при 62°С на 1 мин, после чего пробу вынимают и смотрят под микроскопом при температуре воздуха 26°С. Определяют количество активизированных протосколексов, в том числе подвижных и

вывернутых.

Результаты отображения в табл,2, из которой следует, что в опытных пробах протосколексов под воздействием электрической лампой на разных расстояниях от обьекта с увеличением температуры воздуха до 32-35,5°С соответственно увеличились продолжительность активного состояния зародышей и частота их сокращений в 1,3- 1,4 раза; при температуре воздуха 38°С

продолжительность их активного состояния близка к контрольной пробе.

Таким образом, из табл.1 и 2 следует, что при инфракрасном воздействии электрической лампой 200 Вт на онкосферы и

протосколексы цестод в конечной стадии их активизации с температурой воздуха 32- 38° С продолжительность активного состояния и частота сокращений зародышей увеличились в 1,2-1,6 раза. При этом содержание активизированных онкосфер и протосколексов цестод было 100%-ным.

Данный способ можно использовать для определения максимального срока выживаемости яиц и протосколексов цестод во

внешней среде с большей достоверностью в связи с увеличением интенсивности жизнедеятельности активизированных цестод, а также для культивирования их ларвальных и ленточных стадий.

Формула изобретения

Способ определения жизнеспособности неполовозрелых форм цестод по авт, св. № 1337057, отличающийся тем, что, с целью увеличения продолжительности активного состояния неполовозрелых форм цестод, после инкубации на них воздействуют инфракрасным излучением с температурой воздуха 32-38° С.

Таблица 1

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к определению жизнеспособности яиц и личинок гельминтов, а также может использоваться в медицине. Цель изобретения - увеличение продолжительности активного состояния неполовозрелых форм цистод. Указанные формы цестод обрабатывают водным раствором едкого калия или соляной кислоты с последующей обработкой активизирующим раствором. Инкубацию цестод проводят при температуре окружающей среды от 47 до 178°С в течение 5 - 180 с, а затем на них воздействуют инфракрасным излучением электрической лампы в 200 Вт с температурой воздуха 32 - 38°С. Данный способ позволяет продлить активное состояние зародышей до 4,6 - 5,0 мин, увеличить частоту их сокращений в 1,2 - 1,6 раза, обеспечить 100%-ный выход активизированных онкосфер и протосколексов цестод. 2 табл.

Таблица 2