Питательная среда для микроклонального размножения косточковых культур Советский патент 1991 года по МПК A01H3/00 

Изобретение относится к биотехнологии и сельскому хозяйству, к ускоренному размножению посадочного материала косточковых культур, в частности межвидовых и межродовых гибридов черешни и вишни на основе культуры ткани.

Целью изобретения является ускорение процесса размножения и увеличение коэффициента размножения.

Пример. Растворяют в бидистиллиро- ванной воде последовательно все компоненты питательной среды, после чего

проводят автоклавирование ее при 0,8-1,0 атм в течение 20-30 мин. Различные концентрации компонентов питательной среды представлены в табл.1,

На указанные варианты питательной среды высаживают апексы косточковых культур: гибриды вишни и черешни Cerasus avium i Cerasus sachalinensis Dr. Edwin Muller, Cerasus sarrklata Hally Tollvetta. Cerasus avium, Cerapadus Рз х Cerasus vulgarls, сорта вишни Апухтинская и вида

вишни Cerasus lanneslana № 2, Cerapadus РЗХ Cerapadus Fa.

Кульгуральные сосуды помещают в камеру для культивирования. Условия культи- вирования: температура 26-27°С, длительность светового периода 16ч, освещенность 6000 лк, влажность 70%. Сравнение скорости и коэффициента микроразмножения проводят с известной средой следующего состава, мг/л:

Аммоний азотнокислый825

Калий азотнокислый950

Кальций хлористый двухводный 220 Магний сернокислый семиводный 185 Калий фосфорнокислый однозамещенный85

Борная кислота6,2

Марганец сернокислый четырехводный22,3

Цинк сернокислый семиводный 8,6 Калий йодистый0,83

Натрий молибденовокислый двухводный0,25

Медь сернокислая пятиводная 0,025 Кобальт хлористый шестиводный 0,025 Хеллат железа5,6

Никотиновая кислота0,5

Тиамин0,4

Пиридоксин0,1

Мезоинозит100,0

Глицин2,0

Гибберелловая кислота0,1

Флороглюцин16,2

6-БАП 1,0

Сахароза30000

Агар5000

Вода бидистиллиро- ваннаяОстальное до 1 л

Через 2 нед, каждый эксплантат дифференцирует несколько нормальных побегов, наиболее крупные из которых длиной более 10 мм высаживают для укоренения, а длиной 3-10 мм пассируют на среду указанного состава для дальнейшего размножения. Сравнительные результаты испытания известной и предложенной сред представлены в табл.2,

Из табл.2 следует, что питательная среда предлагаемого состава обеспечивает значительное по сравнению с известной средой сокращение сроков размножения до 12-14 дней вместо 90 дней и увеличение коэффициента размножения до 1 29-32, а также повышение эффективности выхода стандартных черенков до 20-22 шт. для этапа укоренения Предусматривается также возможность дальнейшего размножения

нестандартных побегов (19-23 шт.) и 100% дифференциации апексов независимо от генотипа.

Использование предлагаемой питательной среды позволяет сократить сроки размножения побегов, повысить эффективность выхода стандартных черенков и процента дифференциации апексов независимо от генотипа, а также увеличить

общую производительность процесса от высадки апексов и побегов на питательную среду до укоренения и высадки в грунт растений.

Формула изобретения

Питательная среда для микроклональ- ного размножения косточковых культур, содержащая азотнокислый аммоний, азотнокислый калий, хлористый двухводный кальций, сернокислый семиводный магний, фосфорнокислый однозамещенный калий, борную кислоту, сернокислый четырехводный марганец, сернокислый семиводный цинк, йодистый калий,

молибденовокислый двухводный натрцй, сернокислую пятиводную медь, хлористый шестиводный кобальт, хеллат железа, 6- бензиламинопурин, мезоинозит, никотиновую кислоту, глицин, тиамин, пиридоксин,

сахарозу, агар и воду, отличающаяся тем, что, с целью ускорения процесса размножения и увеличения коэффициента размножения, питательная среда дополнительно содержит индолилмасляную

кислоту, а в качестве хеллата железа - смесь сернокислого закисного семиводного железа и трилона Б при следующем соотношении компонентов, мг/л: азотнокислый аммоний 820-830; азотнокислый калий 940960; хлористый двухводный кальций 210- 230; сернокислый семиводный магний 180-190; фосфорнокислый однозамещенный калий 83-87: борная кислота 3,0-3,2; сернокислый четырехводный марганец

11,0-11,3; сернокислый семиводный цинк 4,1-4,4; йодистый калий 0,41-0,42; молибденовокислый двухводный натрий 0,12-0,13; сернокислая пятиводная медь 0,012-0,013; хлористый шестиводный кобальт 0,0120,013; сернокислое закисное семиводное железо 13,7-14,0; трилон Б 18-19; 6-бензи- ламинопурин 0,5-0,6; индолилмасляная кислота 0,001-0,002; мезионозит 50-60; никотиновая кислота 0,5-0,6; глицин 2,0-2,1;

тиамин 0,5-0,6; пиридоксин 0,5-0,6; сахароза 25000-30000; агар 6000-7000; бидистил- лированная вода до 1 л.

Таблица 1 Варианты питательной среды по концентрации компонентов

Влияние состава среды на коэффициент размножения и время получения побегов

Таблица 2

Изобретение относится к биотехнологии и сельскому хозяйству, к ускоренному размножению посадочного материала косточковых культур, в частности межвидовых и межродовых гибридов черешни и вишни на основе культуры ткани. Целью изобретения является ускорение процесса размножения и увеличение коэффициента- размножения. Цель достигается тем, что в питательную среду вводят дополнительно индолилмасляную кислоту, а в качестве хел- лата железа - смесь железа сернокислого закисного семиводного и трилона Б при следующем соотношении компонентов, мг/л: аммоний азотнокислый 820-830; калий азотнокислый 940-960; кальций хлористый

17,9+0,5

824-0,4

5

1:27

94,,3 98,4+0,5 98,2+0,6 83+0,7