Способ прогнозирования тяжести течения язвенной болезни 12-перстной кишки Советский патент 1991 года по МПК G01N33/49 G01N21/76 

Изобретение относится к медицине, в частности к гастроэнтерологии.

Цель изобретения - повышение точности способа.

Способ осуществляют следующим образом.

Из локтевой вены у больного натощак в интервале с 8 00 до 9.00 забирают 10-12 мл крови в пробирку, содержащую 0,2 мл раствора гепарина (5000 ЕД в 1 мл) и 1,2 мл физраствора с рН 7,35 (для предотвращения свертывания). Кровь отстаивают при температуре 4-6°С в течение 1,5-2 ч. При этом кровь расслаивается на три слоя: нижний - эритроциты, верхний - плазма, средний - тонкая белесая пленка - лейкоциты. Затем забирают белесую пленку лейкоцитов и часть плазмы и центрифугируют полученную суспензию при 1000 об/мин в течение

5-7 мин Плазму сливают. Осадок представляет собой лейкомассу. При необходимости проводят осмолизис эритроцитов добавлением к лейкомассе 3 мл дистиллированной воды с рН 7,35 и затем не более чем через 10 с 1 мл 3,6%-ного раствора хлорида натрия с рН 7,35 для прекращения осмолиза. Проводят повторное центрифугирование, надосадочную жидкость сливают, осажденные клетки дополнительно отмывают физраствором с рН 7,35, центрифугируют при 1000 об/мин в течение 5 мин, затем ресус- пендируют в физрастворе с рН 7,35,

Подсчитывают количество гранулоци- тов и моноцитов (т е фагоцитов) в суспензии клеток Для этого 0,02 мл суспензии смешивают с 0,38 мл 3%-ного раствора уксусной кислоты, добавляют 2 капли 1%-ного раствора метиленовои синей Через 10-15 мин

О

00

ю ел го

полученную смесь вносят в камеру Горяева, при увеличении 300 считают количество гра- нулоцитов и моноцитов в 10 больших квадратах, умножают полученную цифру на 125 и получают количество фагоцитов в 1 мм3.

Лейкомассу разбавляют физраствором с рН 7,35 таким образом, чтобы в 1 см° находилось 106 фагоцитов.

Забирают 0,3 мл взвеси фагоцитов (содержащей 3 х 105 клеток), прибавляют к ней 0,02 мл насыщенного водного раствора лю- минола с рН 7,35. Хемилюминесценцию (ХЛ) измеряют на хемилюминометре типа Свет, ЛКБ ВАЛЛАК 1251 или др. Ведется непрерывная регистрация ХЛ с помощью графопостроителя. Затем на кривой находят точку, в которой ХЛ является наибольшей. Это и есть максимальная ХЛ.

Время наступления максимума ХЛ зависит от количества лейкоцитов, от количества люминола и от их соотношения в системе. При использовании 300 тыс. лейкоцитов и 0,02 мл насыщенного водного раствора люминола время наступления максимума ХЛ обычно не превышает 5-7 мин.

Затем рассчитывают показатель ХЛ фагоцитов (ПХЛФ) по формуле

ПХЛФ

МХЛ 106 N

где МХЛ - максимальная хемилюминесцен- ция;

N - количество фагоцитов, т.е. грануло- цитов и моноцитов, в исследованном объеме;

106 - множитель, введенный для удобства использования ПХЛ Ф, в виду его малой исходной величины.

Данные сравнительного исследования величины ПХЛФ в норме (доноры) с язвенной болезнью 12-перстной кишки (ЯБДПК), язвенной болезнью желудка (ЯБЖ) и хроническим гастритом представлены в табл. 1.

Результаты сравнения ПХЛФ у больных с тяжелым течением ЯБДПК и ЯБЖ представлены в табл. 2.

Таким образом, видно что значительное увеличение ПХЛФ характерно для тяжелого течения ЯБДПК.

При ПХЛФ, полученном у больных ЯБДПК в стадии обострения до начала лечения и превышающем таковой у здоровых доноров более чем в 3,64 раза, можно прогнозировать тяжелое течение заболевания,

Пример 1. Больная Ш,41 год. Диагноз при поступлении: язвенная болезнь 12-перстной кишки а стадии обострения. Объективно: состояние относительно удовлетворительное. Кожные покровы обычной окраски, чистые, сухие. Лимфоузлы не пальпируются. Над легкими дыхание везикулярное, хрипов нет. ЧД - 12 в 1 мин. Тоны сердца громкие, ритмичные, ЧСС 72 уд/мин, АД 130/80 мм рт.ст. Живот мягкий, умеренно болезненный при попытке паль0 пации в эпигастрии. Печень и селезенка не пальпируются, перкуторно - не увеличены. Стул ежедневный, оформленный, обычной окраски. Дизурических явлений нет. При эзофагогастродуоденоскопии (ЭГДС) выяв5 лены две язвы луковицы 12-перстной кишки, целующиеся, диаметром 0,5 и 0,6 см. При исследовании ХЛ исходный, измеренный до начала лечения ПХЛФ составил 41, 21. Таким образом, ПХЛФ больной превышает

0 средний ПХЛФ доноров в 8,3 раза. У данной

больной ЯБДПК протекает неблагоприятно,

с частыми - по 4-5 раз в год - обострениями.

П ример2. Больной С.,26лет. Диагноз:

язвенная болезнь двенадцатиперстной

5 кишки в стадии обострения.

Жалобы: боли в эпигастрии сжимающего и сосущего характера, возникающие натощак, часто ночью.

Из истории заболевания: боли в эпига0 стрии впервые возникли 3,5 года назад. Эндоскопически было диагностировано обострение язвенной болезни двенадцатиперстной кишки, В дальнейшем обострения заболевания отмечали 3-4 раза в году. По5 следнее обострение началось около двух недель до поступления, когда вновь возникли боли в эпигастрии.

ЭГДС 31.08.87: луковица двенадцатиперстной кишки отечна, гиперемирована.

0 На передней стенке - хроническая язва диаметром 0,5 см.

Исследование желудочной секреции с субмаксимальной стимуляцией гистамином 0.2.09.87, часовой объем 128/180 мл, рН

5 1,7/1,2; трит 60/112 ед. дебит-час секреции свободной соляной кислоты 7,2/20,2 мэкв/ч. Непрерывное кислотообразование, Гиперацидность до и после стимуляции гистамином.

0 ПХЛФ до лечения 08.09.87 18,1, т.е. превосходит среднюю норму доноров в 3,64 раза.

У данного больного прогнозируется тя- жепое течение ЯБДПК.

5 Действительно у больного отмечается тяжелое течение с обострениями заболевания чаще 2 раз в год.

П римерЗ. Больной С.,26 лет. Диагноз: язвенная болезнь 12-перстной кишки в стадии обострения. Объективно: состояние относительно удовлетворительное. Кожные покровы чистые. Лимфоузлы не пальпируются. Над легкими аускультативно дыхание везикулярное, хрипов нет. ЧД 16 в мин. Тоны сердца приглушены, ритмичны. ЧСС уд/мин, АД 120/80 мм рт.ст. Живот мягкий, умеренно болезненный при пальпации в эпигастрии. Печень и селезенка - перкутор- но не увеличены. Стул ежедневный, оформленный, обычной окраски. Дизурических явлений нет.

При ЭГДС выявлена язва луковицы 12- перстной кишки диаметром 0,5 см.

ПХЛФ больного - 18,1 (превосходит ПХЛФ здоровых доноров в 3,6 раза).

У данного больного ЯБДПК протекает достаточно благоприятно, обострения возникают 1 раз в 2-3 года, под действием антацидов и обволакивающих препаратов язва рубцуется в течение 1 мес.

Таким образом, использование данного способа прогнозирования тяжести течения

ЯБДПК позволяет уже при исходном - до начала лечения - исследовании ХЛ фагоцитов прогнозировать характер течения заболевания, что весьма важно при выборе терапии и дозы препаратов, а также имеет принципиальное значение при проведении поддерживающей терапии. Точность способа составляет 73%.

Ф о р м у л а и з о б р е те н и я

Способ прогнозирования тяжести течения язвенной болезни 12-перстной кишки путем клинико-биохимического исследования, отличающийся тем, что, с целью

повышения точности способа, определяют показатель люминолзависимой хемилюми- несценции фагоцитов крови и при его увеличении в 3,64 раза и более относительно нормы прогнозируют неблагоприятное течение язвенной болезни 12-перстной кишки.

Изобретение относится к медицине, в частности к гастроэнтерологии. Цель изобретения - повышение точности способа. Для этого из венозной крови пациента выделяют лейкоцитарную массу, определяют в ней количество фагоцитов. Массу разводят так, чтобы в 1 см было 106 фагоцитов. Затем к 0,3 мл взвеси фагоцитов добавляют 0,02 мл насыщенного водного раствора люминола с рН 7,35 и непрерывно измеряют хемилюми- нисценцию (ХЛ), после чего рассчитывают показатель хемилюминисценции фагоцитов (ПХЛФ) как отношение ХЛ к количеству фагоцитов в исследуемом объеме При увеличении ПХЛФ Б 3,64 раза и более относительно нормы прогнозируют тяжелое течение язвенной болезни 12-перстной кишки, т е наличие обострений чаще 2 раз в год или нерубцевание язвы в течение более 90 дней Точность способа составляет 73%.2табл Ё

PI - достоверность различия между ПХЛФ доноров и больных

ЯБДПК.

Р2 - достоверность различия между ПХЛФ доноров и больных ЯБЖ Рз- достоверность различия между ПХЛФ доноров и больных ХГ.

Таблица 1

Таблица 2