БОТУЛИНИЧЕСКИЕ АНАТОКСИНЫ ТИПОВ АЙВ Советский патент 1965 года по МПК A61K39/00 

Известно использование нри изготовлении анатоксинов немясных питательных сред, а также обезвреживание ботулпнических анатоксинов на стадии концентрированного токсина путем дробной схемы обезвреживания.

Предлагаемые ботулинические анатоксины типов А и В обеспечивают создание в крови людей высоких антитоксических титров и являются качественно новыми, высокоактивными препаратами. Отличие анатоксинов состоит в том, что они содержат в 1 мл препарата 1000 антигенных единиц (ЕС и 1 АЕ) соответствующего анатоксина с удельной активностью не менее 3000 ЕС/1 мг общего азота и не более 3,5 мг гидроокиси алюминия.

Для получения ботулинических токсинов применяют штаммы С1. botulinum типа А с активностью не ниже 300 тыс. ДЛМ для белых мыщей в I мл и типа В с активностью не ниже 500 тыс. ДЛМ/жл и с антигенностью по реакции кольцепреципитации не ниже 100-200 НС (подшитрованных к IAE). Культуры выращивают на рыбокукурузной среде 14 суток. Для выделения и очистки токсина из культур применяют или двукратное осаждение соляной кислотой с добавлением при первом осаждении гексаметафосфата натрия или с дополнительной очисткой полученного концентрата осаждением этанолом на хояоду.

Получаемые очищенные и концентрированные ботулинические токсины должны иметь удельную активность не менее: тип А - 15 млн. ДЛМ и тип В - 20-30 млн. ДЛМ на мг общего азота.

Обезвреживание очищенных и концентрированных токсинов производят при 38-39°С путем дробного добавления формалина и поддерл ания рН на заданном уровне (6,2-6,4 в

первую неделю и 6,9-7,1 в дальнейщем) в течение 4 недель обезвреживания.

Очищенные и концентрированные анатоксины типа А иметь удельную активность не менее 3 тыс. ЕС к 1 АЕ, а апатоксины типа В - не менее 4 тыс. ЕС на 1 мг общего азота и быть безвредными (не вызывать общей и выраженной местной реакции у морских свинок при подкожном- введении по 2000 ЕС монотоксина).

Для сорбции ботулинических анатоксинов применяют суспензию гидрата окиси алюминия, приготовленную по методу Шмидта и содержащую 18-22 м сухого остатка А1 (ОН)з в 1 мл.

Полученные очищенные, концентрированные и сорбированные гидратом окиси алюминия ботз линические анатоксины типов А и В являются стерильными, безвредными (не вызывают местных и общих явлений у морских

свинок весом 300-400 г при подкожном введении 2 тл препарата), содержат в 1 мл 1000 ЕС антигена типа А или типа В и не более 3,5 м.г при практически полной сорбции анатоксинов, имеют рН 6,8-7,0 и в качестве консерванта содержат мертиолат (1 : 10000) или 0,2% фенола. При однократной внутрибрюшинной иммунизации 10 белых мышей дозами анатоксинов, содержащими 40 ЕС антигена типа А и 20 ЕС типа В, не менее половины животных должны выживать при внутривенном введении через 16 суток 50 ДЛМ токсина типа А или типа В.

Предметизобретения

Ботулинические анатоксины типов А и В, очищенные, концентрированные и сорбированные гидратом окиси алюминия, отличающиеся тем, что, с целью создания в крови привитых людей антитоксических титров типов А и В порядка 1-3 АЕ/мл, ъ мл каждого препарата содержится 1000 антигенных единиц (ЕС к 1 АЕ) соответствующего анатоксина с удельной активностью не менее 3000 ЕС/1 мг общего азота и не более 3,5 мг гидроокиси алюминия.